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公开(公告)号:CN109529032A
公开(公告)日:2019-03-29
申请号:CN201811472454.3
申请日:2018-12-04
申请人: 四川农业大学
IPC分类号: A61K39/245 , A61P31/22 , C12N15/85 , C12N15/38
摘要: 本发明涉及疫苗技术领域,具体涉及一种伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gD基因mRNA疫苗,采用如下步骤制备:步骤1:构建PRV-gD基因mRNA克隆质粒和真核质粒;步骤2:伪狂犬病毒增殖与细胞培养;步骤3:抽提伪狂犬病毒DNA;步骤4:设计特异性引物:步骤5:PCR扩增伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gD基因;步骤6:回收后目的片段与pMD19-T载体连接;步骤7:DH5α大肠杆菌感受态细胞的制备以及连接产物的转化;其构建了伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gD基因真核表达载体PVAX-gD,可以刺激机体产生免疫反应并产生特异性抗体和中和抗体,与空白对照有显著的差异;攻毒保护试验表明,真核表达载体具有良好的免疫原性。