公开(公告)号：CN103756994A

公开(公告)日：2014-04-30

申请号：CN201310091005.5

申请日：2013-03-21

申请人： 四川农业大学

发明人： 王小蓉 ,  陈涛 ,  汤浩茹 ,  刘泽静 ,  陈清 ,  张勇 ,  罗娅 ,  黄晓姣 ,  陈娇

IPC分类号： C12N15/10

摘要： 本发明公开了一种适合多糖类植物干燥叶片的DNA提取方法，包括干燥叶片研磨、去糖、裂解、抽提、沉淀、洗涤和检测等步骤。其中，去糖是本发明的关键，在核膜没有裂解释放出基因组DNA之前，加入预热的去糖缓冲液，在65℃水浴条件下悬浮叶片组织溶液，可以使多糖及其他次生代谢物质溶解于缓冲液中，再通过低速离心去除多糖等杂质，使最后沉淀得到的DNA具有较高的浓度和纯度。本发明适用于所有樱属植物及其它富含多糖类植物的干燥成熟叶片，如果是幼嫩叶片则会增加所得DNA的浓度，在成熟叶片中一样能够得到较多较高质量的DNA。

公开(公告)号：CN102559909A

公开(公告)日：2012-07-11

申请号：CN201210032586.0

申请日：2012-02-15

申请人： 四川农业大学

发明人： 王小蓉 ,  汤浩茹 ,  南红 ,  王燕 ,  刘泽静 ,  陈清 ,  陈涛 ,  黄晓姣 ,  何文

IPC分类号： C12Q1/68 ,  G01N21/64

摘要： 本发明公开了一种悬钩子属原位杂交方法，包括制片、制备探针、杂交前预处理、制备杂交液、制片变性、杂交和检测七个步骤。其中，制片采用根尖压片法，制片前处理时用2％纤维素酶和2％果胶酶在37℃下酶解细胞壁1.5h，探针采用单色标记，杂交前杂交液需在100℃变性5min，杂交时在37℃温育18h。本发明所述的杂交方法能有效消除背景干扰，提高检测灵敏度和准确性。本发明适用以45S rDNA、5S rDNA和悬钩子属植物基因组为探针的悬钩子属植物的染色体原位杂交。