一种构建重组表达载体的方法、工程菌及表达系统

    公开(公告)号:CN114752617B

    公开(公告)日:2024-07-16

    申请号:CN202210638496.X

    申请日:2022-06-08

    摘要: 本发明涉及基因工程,为了提高超氧化物歧化酶的产量,提供了一种构建含有牦牛锰超氧化物歧化酶基因的重组表达载体的方法,包括如下步骤:(1)根据Mn‑SOD基因序列,设计Mn‑SOD的扩增引物,并对Mn‑SOD进行扩增;(2)将步骤(1)的扩增产物纯化后,连接到转移载体中,并转移到大肠杆菌宿主细胞DH5α中,对大肠杆菌中的质粒进行测序;(3)使用限制性内切酶对将步骤(2)获得的质粒和连接载体进行酶切,使得Mn‑SOD片段连接到连接载体中;(4)将步骤(3)的产物转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α中,转染成功后测序;得到表达载体。本发明还提供了与上述表达载体相适配的基因工程菌以及重组牦牛Mn‑SOD蛋白的高效表达系统。通过本发明的方法,能够高效地表达锰超氧化物歧化酶,为进一步规模化生产与利用牦牛Mn‑SOD提供条件。

    一种构建重组表达载体的方法、工程菌及表达系统

    公开(公告)号:CN114752617A

    公开(公告)日:2022-07-15

    申请号:CN202210638496.X

    申请日:2022-06-08

    摘要: 本发明涉及基因工程,为了提高超氧化物歧化酶的产量,提供了一种构建含有牦牛锰超氧化物歧化酶基因的重组表达载体的方法,包括如下步骤:(1)根据Mn‑SOD基因序列,设计Mn‑SOD的扩增引物,并对Mn‑SOD进行扩增;(2)将步骤(1)的扩增产物纯化后,连接到转移载体中,并转移到大肠杆菌宿主细胞DH5α中,对大肠杆菌中的质粒进行测序;(3)使用限制性内切酶对将步骤(2)获得的质粒和连接载体进行酶切,使得Mn‑SOD片段连接到连接载体中;(4)将步骤(3)的产物转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α中,转染成功后测序;得到表达载体。本发明还提供了与上述表达载体相适配的基因工程菌以及重组牦牛Mn‑SOD蛋白的高效表达系统。通过本发明的方法,能够高效地表达锰超氧化物歧化酶,为进一步规模化生产与利用牦牛Mn‑SOD提供条件。

    一种生产犏牛可控性别体外胚胎的方法

    公开(公告)号:CN103215220A

    公开(公告)日:2013-07-24

    申请号:CN201310093517.5

    申请日:2013-03-22

    IPC分类号: C12N5/073

    摘要: 本发明公开了一种生产犏牛可控性别体外胚胎的方法,包括以下步骤:将牦牛卵巢去除周围结缔组织并清洗后,选取卵母细胞并洗涤;将洗涤后的卵母细胞转入添加有血清、激素、卵泡液和Hepes缓冲液的培养皿中,再将培养皿放入培养箱中进行成熟培养;取普通牛的含X或Y染色体的精子,通过Percoll梯度分离液将精液中的死精子与活精子分开;将培养成熟的卵母细胞从Hepes缓冲液中拣出,用受精液洗涤后将含X或Y染色体的精子加入到含有卵母细胞的受精微滴中,放入培养箱中进行体外受精培养;受精后进行囊胚成熟处理;成熟时回收囊胚,进行胚胎移植或贮存。通过本发明与其他多种现代胚胎生产技术相结合能进行性控犏牛的繁育,迅速增加优质犏牛的数量。

    高寒牧区节能型牦牛暖棚

    公开(公告)号:CN102805037A

    公开(公告)日:2012-12-05

    申请号:CN201210305250.7

    申请日:2012-08-24

    IPC分类号: A01K1/02

    摘要: 本发明公开了一种高寒牧区节能型牦牛暖棚,包括东墙板、南墙板、西墙板、北墙板、坡面顶板和玻璃顶板,所述东墙板、所述南墙板、所述西墙板和所述北墙板依次连接后形成长方形棚体,所述南墙板和所述北墙板的宽度大于所述东墙板和所述西墙板的宽度,所述坡面顶板与所述玻璃顶板连接后形成屋顶,所述坡面顶板在由北到南的方向由低到高,所述玻璃顶板在由北到南的方向由高到低。与传统简单牦牛棚相比,本发明所述高寒牧区节能型牦牛暖棚的玻璃顶板能透过阳光,照射到棚内及牦牛体表,给牦牛能提供一个舒适温暖的环境,由于本发明所述牦牛暖棚为一个封闭空间(需要时可交换空气),热量不易从棚体中散失出去,具有保温的作用。

    一种提高金花菜种子繁殖的方法

    公开(公告)号:CN112913371A

    公开(公告)日:2021-06-08

    申请号:CN202110097970.8

    申请日:2021-01-25

    IPC分类号: A01C1/00

    摘要: 本发明公开了一种提高金花菜种子繁殖的方法,采用60Co‑γ辐射源对金花菜种子进行辐照,0<辐照剂量≤600Gy,1.5Gy/min<辐照剂量率≤2.3Gy/min;通过60Co‑γ辐射源对金花菜种子进行辐射且辐照剂量≤600Gy,辐照剂量率≤2.3Gy/min,诱变金花菜种子的胚胎,从而提高发芽率,且金花菜种子的发芽势和发芽指数也较高,幼苗的成活率并没有明显的下降趋势,幼苗的生长也没有被明显的抑制。

    高寒牧区犊牛断奶器
    8.
    实用新型

    公开(公告)号:CN203709020U

    公开(公告)日:2014-07-16

    申请号:CN201420115702.X

    申请日:2014-03-14

    IPC分类号: A01K19/00

    摘要: 本实用新型公开了一种高寒牧区犊牛断奶器,包括一个大致半圆环形的半环柱和一个大致半圆形的半圆板,所述半圆板上位于大致直线边的两端分别沿半圆弧线的方向向外延伸形成所述半圆板的两端,所述半环柱的第一端与所述半圆板的第一端连接并能够旋转,所述半环柱的第二端与所述半圆板的第二端均设有螺孔并通过螺栓连接,所述半圆板的其中一个表面上设有多个外端为钉尖的金属钉。本实用新型所述犊牛断奶器在套装于犊牛牛鼻后,既不会影响正常吃草,又能有效阻止犊牛吃奶,而且不会对母牛造成伤害,犊牛也能靠近母牛,其心理仍然保持健康,不影响健康成长,为高寒牧区犊牛及时断奶提供了有力保障,而且不需另外增加隔离机构,节约了成本。

    双槽式自动落料牛用精料补饲装置

    公开(公告)号:CN203709013U

    公开(公告)日:2014-07-16

    申请号:CN201420114558.8

    申请日:2014-03-14

    IPC分类号: A01K5/02 A01K5/01

    摘要: 本实用新型公开了一种双槽式自动落料牛用精料补饲装置,包括精料存/排装置,精料存/排装置包括顶部的料斗、底部的料槽板以及设于料斗和料槽板之间的过渡侧板,过渡侧板包括两个左右侧板和两个前后侧板,两个前后侧板之间形成精料下落通道,料槽板的上表面为“ω”形,料槽板的前后两侧上表面形成两个前后排列的料槽,两个前后侧板的下端分别与料槽板的中部上表面的前后两侧之间形成两个空隙作为两个分别与两个料槽对应的出料口。本实用新型通过设置前后两个料槽,显著提高了精料补饲装置的利用率;采用倾斜的出料通道并将出料口置于料槽底部的上方,使料斗内的所有精料最后均能落入料槽中,避免因平底料槽导致的精料浪费,节约了精料成本。

    牛只采精、授精、人工辅助配种多用保定架

    公开(公告)号:CN203749636U

    公开(公告)日:2014-08-06

    申请号:CN201420115396.X

    申请日:2014-03-14

    IPC分类号: A61D3/00

    摘要: 本实用新型公开了一种牛只采精、授精、人工辅助配种多用保定架,包括两个前立柱、两组后立柱、一组前横杆和两组侧横杆,前立柱和两组侧横杆确定的区域为牛只站立区域,前横杆一端的上方安装有固定立柱,前横杆上设有能在前横杆的轴向方向调节连接位置的连接装置,活动杆的下端和上端分别与连接装置和固定立柱的上部连接,活动杆、前横杆和固定立柱围成一个用于限定牛只颈部的限位孔。本实用新型通过限位孔对牛只的颈部进行限位,实现对整个牛只的限位,便于对该牛只进行人工授精,或便于后面的公牛配种或人工采精,利用活动杆可以快速改变限位孔的大小,以适应不同大小的牛只,从而满足不同牛只生产中采精、人工授精和人工辅助配种的需求。