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公开(公告)号：CN111944769B
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN202010798191.6
申请日：2020-08-10
Applicant: 塔里木大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/47 , C12N15/65 , C12N5/071 , A61K39/295 , A61K39/205 , A61K39/275 , A61P31/20 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种狂犬病毒G蛋白‑羊痘病毒重组疫苗的构建方法，包括以下步骤：步骤1、重组病毒疫苗构建模型设计；步骤2、各基因的扩增及各组合基因的融合扩增；步骤3、各种组合重组转移载体的构建；步骤4、狂犬病毒G蛋白‑羊痘病毒的重组及病毒纯化；步骤5、狂犬病毒G蛋白表达检测；步骤6、狂犬病毒G蛋白‑山羊痘重组病毒疫苗株免疫效果检测。本发明的方法构建的疫苗可有效预防羊狂犬病，并且具有生产高效、简便、实用的特点，适合推广应用。
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公开(公告)号：CN109680344A
公开(公告)日：2019-04-26
申请号：CN201811555952.4
申请日：2018-12-19
Applicant: 塔里木大学
Inventor： 李有文 , 张雪萍 , 米丽开姆·托合提尼亚改 , 童建军 , 何川川
Abstract: 本发明公开了一种羊皮肤组织酵母cDNA文库及其构建方法，涉及生物技术领域。本发明方法包括：提取羊痘病羊皮组织总RNA；从所述总RNA中分离出mRNA；构建酵母双杂交文库；鉴定所述酵母双杂交文库的质量；提取所述酵母双杂交文库的质粒，并将文库保存。本发明提取的文库质粒可直接用于酵母文库筛选；本发明通过上述方法建立了羊皮肤组织酵母cDNA文库，为以后研究羊痘病病例提供科学依据。
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公开(公告)号：CN111944769A
公开(公告)日：2020-11-17
申请号：CN202010798191.6
申请日：2020-08-10
Applicant: 塔里木大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/47 , C12N15/65 , C12N5/071 , A61K39/295 , A61K39/205 , A61K39/275 , A61P31/20 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种狂犬病毒G蛋白-羊痘病毒重组疫苗的构建方法，包括以下步骤：步骤1、重组病毒疫苗构建模型设计；步骤2、各基因的扩增及各组合基因的融合扩增；步骤3、各种组合重组转移载体的构建；步骤4、狂犬病毒G蛋白-羊痘病毒的重组及病毒纯化；步骤5、狂犬病毒G蛋白表达检测；步骤6、狂犬病毒G蛋白-山羊痘重组病毒疫苗株免疫效果检测。本发明的方法构建的疫苗可有效预防羊狂犬病，并且具有生产高效、简便、实用的特点，适合推广应用。
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公开(公告)号：CN110387357A
公开(公告)日：2019-10-29
申请号：CN201910650817.6
申请日：2019-07-18
Applicant: 塔里木大学
Inventor： 李有文 , 米丽开姆·托合提尼亚孜 , 童剑军 , 张雪萍 , 何川川
Abstract: 本发明公开了一种带荧光标记的重组病毒的纯化方法，包括以下步骤：步骤1、KLP2基因缺失的山羊痘病毒的重组：1)培养绵羊睾丸原代细胞并铺细胞板，待细胞培养找满80％左右，用羊痘病毒疫苗株感染细胞。2)病毒重组；步骤2、重组病毒的纯化：1)挑取带荧光的重组病毒：2)病毒纯化；3)继续纯化：对上一步挑取的带荧光病毒反复冻融，按照步骤2中的2)的操作，再稀释接毒，再挑，一般3-4代后就可以得到纯化的重组病毒。
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