公开(公告)号：CN117305366A

公开(公告)日：2023-12-29

申请号：CN202311214286.9

申请日：2023-09-20

Applicant: 塔里木大学

Inventor： 李有文 ,  周正国 ,  赵垚鑫 ,  张汐 ,  王永飞 ,  刘晓艳 ,  邓博文

IPC: C12N15/863 ,  C12N15/31 ,  C12N7/01 ,  A61K39/08 ,  A61K39/275 ,  A61K39/295 ,  A61P31/04 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种羊魏氏梭菌抗原蛋白‑羊痘病毒疫苗株重组多价疫苗的构建方法，以无标记山羊痘病毒表达载体为基础，该载体以山羊痘病毒疫苗株为病毒活载体，以其腺甘酸酶基因(TK)为复制非必需区，以VV7.5基因为启动子，绿色荧光蛋白基因(GFP)和大肠杆菌gpt基因为两报告基因，报告基因两侧加了重组酶识别序列，有利于清除双报告基因标记。本发明先对引起羊致死性强的梭菌4种抗原蛋白基因(α抗原蛋白、β2抗原蛋白、ε抗原蛋白、β1抗原蛋白)进行扩增，并进克隆原核表达，评价其抗原性和毒性，然后利于融合PCR的方法将其连接在一起，利用同源重组的方法将其插入表达外源基因的无标记山羊痘病毒表达载体，构建有效预防羊魏氏梭菌病的疫苗。

公开(公告)号：CN117384963A

公开(公告)日：2024-01-12

申请号：CN202311214038.4

申请日：2023-09-20

Applicant: 塔里木大学

Inventor： 李有文 ,  张汐 ,  赵垚鑫 ,  周正国 ,  王永飞 ,  刘晓艳 ,  邓博文

IPC: C12N15/863 ,  C12N15/65 ,  A61K39/275 ,  A61K39/02 ,  A61K39/295 ,  A61P31/04 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明属于免疫工程领域，具体公开了一种山羊肺炎支原体M17抗原基因‑羊痘病毒重组多价疫苗及其构建方法，所述方法包括以下步骤：1)山羊肺炎支原体M17基因的获得及原核表达：2)山羊肺炎支原体M17‑羊痘病毒重组表达载体的构建；3)多价病毒的重组与筛选；4)重组病毒的纯化与鉴定；5)双报告系统的消除；本发明利用羊痘病毒可插入26‑45kb的外源基因而不影响病毒繁殖传代，且羊痘病毒弱毒疫苗免疫效果好，具有研发重组多价疫苗的潜质的优点，以羊痘病毒疫苗株为载体，重组羊肺炎支原体重要抗原基因M17构建重组多价疫苗，能够同时对羊痘和羊支原体肺炎具有免疫保护作用。

公开(公告)号：CN117604000A

公开(公告)日：2024-02-27

申请号：CN202311319521.9

申请日：2023-10-12

Applicant: 塔里木大学

Inventor： 李有文 ,  张汐 ,  周正国 ,  王永飞 ,  刘晓艳 ,  邓博文 ,  赵垚鑫

IPC: C12N15/31 ,  C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  A61K39/275 ,  A61K39/02 ,  A61K39/295 ,  A61P31/20 ,  A61P31/04

Abstract: 本发明属于免疫工程领域，具体公开了一种增强型绵羊肺炎支原体抗原蛋白TU‑羊痘病毒重组多价疫苗及其构建方法，本发明选择绵羊肺炎支原体的抗原基因TU，并加入HSP70、I FN‑γ两个非特异免疫的基因增强其免疫作用，分别对其进行生物信息分析，选择其抗原性强的区域进行基因合成，并使三个基因片段连接在一起，然后利用同源重组的方法分别将其插入表达外源基因的无标记山羊痘病毒表达载体，构建成表达绵羊肺炎支原体三个抗原基因的羊痘病毒疫苗株重组多价疫苗表达载体，随后转染获得能够表达绵羊肺炎支原体HSP70‑I FN‑γ‑TU的重组羊痘病毒。本发明以羊痘病毒疫苗株为载体，重组羊肺炎支原体重要抗原基因构建重组多价疫苗，能够同时对羊痘和羊支原体肺炎具有免疫保护作用。