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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112646797A
公开(公告)日：2021-04-13
申请号：CN202110087099.3
申请日：2021-01-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种异源表达大球盖菇β‑葡萄糖苷酶基因的方法。该方法包括如下步骤：（1）在大球盖菇基因组中获得大球盖菇β‑葡萄糖苷酶，并设计引物；（2）提取大球盖菇RNA，反转录成CDNA作为模板，然后进行PCR扩增；（3）使用内切酶对扩增的EC2基因片段、载体质粒PMAL‑c5g分别进行双酶切，并进行片段回收；（4）连接目的片段和空载体片段；（5）连接体系转入感受态细胞转化培养，获得重组载体；（6）将重组载体转至大肠杆菌，选取表达β‑葡萄糖苷酶的大肠杆菌工程菌株。本发明改造的E.coil Rosetta(DE3)重组菌株能够更高效的表达β‑葡萄糖苷酶蛋白，对农业废弃资源进行降解利用。
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公开(公告)号：CN114196682B
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202111567938.8
申请日：2021-12-21
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种提高大球盖菇木质纤维素酶活性的方法。本发明首次实现大球盖菇中碳代谢转录因子(CreA)基因沉默，获得了能够使大球盖菇基因沉默的体系，沉默体系中具有如SEQ ID NO.3所示的干扰片段基因序列；本发明通过在特异性引物中引入KpnⅠ酶切位点和SpeⅠ酶切位点，构建的CreA沉默载体在转至大球盖菇体内后可以显著降低大球盖菇CreA基因的表达；同时碳代谢转录因子(CreA)基因的沉默也可以解除碳代谢阻遏效应，使大球盖菇纤维素酶和半纤维素酶活性显著提高，从而增强秸秆的降解效率。因此，本发明对大球盖菇栽培生产过程中提高栽培基质的利用效率和缩短栽培周期有重要的意义。
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公开(公告)号：CN110558119A
公开(公告)日：2019-12-13
申请号：CN201910718749.2
申请日：2019-08-06
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蔬果病虫害防治技术领域，具体为一种通过外源施加化学诱导剂提高黄瓜对白粉病抗性的方法。本发明是将化学诱导剂烯丙异噻唑（PBZ）混合在浇灌液中，施加于定植后15-20天的黄瓜秧的根部；所述浇灌液中PBZ的浓度为0.3-0.5 mM。施加的次数控制在1-3次。本发明通过外施烯丙异噻唑诱导内源乙烯合成，可显著增强黄瓜对白粉病的抗性，减少黄瓜病害的发生。本发明方法操作简单，成本较低，效果优异。
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公开(公告)号：CN114196682A
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202111567938.8
申请日：2021-12-21
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种提高大球盖菇木质纤维素酶活性的方法。本发明首次实现大球盖菇中碳代谢转录因子(CreA)基因沉默，获得了能够使大球盖菇基因沉默的体系，沉默体系中具有如SEQ ID NO.3所示的干扰片段基因序列；本发明通过在特异性引物中引入KpnⅠ酶切位点和SpeⅠ酶切位点，构建的CreA沉默载体在转至大球盖菇体内后可以显著降低大球盖菇CreA基因的表达；同时碳代谢转录因子(CreA)基因的沉默也可以解除碳代谢阻遏效应，使大球盖菇纤维素酶和半纤维素酶活性显著提高，从而增强秸秆的降解效率。因此，本发明对大球盖菇栽培生产过程中提高栽培基质的利用效率和缩短栽培周期有重要的意义。
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公开(公告)号：CN112646797B
公开(公告)日：2022-11-18
申请号：CN202110087099.3
申请日：2021-01-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种异源表达大球盖菇β‑葡萄糖苷酶基因的方法。该方法包括如下步骤：（1）在大球盖菇基因组中获得大球盖菇β‑葡萄糖苷酶，并设计引物；（2）提取大球盖菇RNA，反转录成CDNA作为模板，然后进行PCR扩增；（3）使用内切酶对扩增的EC2基因片段、载体质粒PMAL‑c5g分别进行双酶切，并进行片段回收；（4）连接目的片段和空载体片段；（5）连接体系转入感受态细胞转化培养，获得重组载体；（6）将重组载体转至大肠杆菌，选取表达β‑葡萄糖苷酶的大肠杆菌工程菌株。本发明改造的E.coil Rosetta(DE3)重组菌株能够更高效的表达β‑葡萄糖苷酶蛋白，对农业废弃资源进行降解利用。
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