公开(公告)号：CN105177078A

公开(公告)日：2015-12-23

申请号：CN201510638769.0

申请日：2015-09-30

申请人： 天津科技大学

发明人： 谢希贤 ,  陈宁 ,  吴雪娇 ,  宁义科 ,  范晓光 ,  徐庆阳 ,  张成林

IPC分类号： C12P17/12 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种羟基四氢嘧啶的制备方法，该制备方法采用含四氢嘧啶的料液为底物，加入具有四氢嘧啶羟化酶活性的大肠杆菌、α-酮戊二酸，在pH7.0-8.0、37-45℃条件下进行酶促反应合成羟基四氢嘧啶。该方法以发酵法制备的含有四氢嘧啶的料液为底物合成附加值较高的羟基四氢嘧啶，具有原料来源广、生产成本低等优点。

公开(公告)号：CN105669560B

公开(公告)日：2019-02-19

申请号：CN201610017537.8

申请日：2016-01-12

申请人： 天津科技大学

发明人： 陈宁 ,  范晓光 ,  宁义科 ,  徐庆阳 ,  谢希贤 ,  张成林 ,  李燕军

IPC分类号： C07D239/06

摘要： 本发明提供一种从发酵液中分离提取四氢嘧啶的方法，克服现有生产工艺中存在的工艺路线复杂，分离纯化困难，能耗水耗较多等问题。本发明从富含四氢嘧啶的发酵液中分离提取四氢嘧啶，首先利用双膜系统即微滤膜、超滤膜分离系统过滤去除发酵液中的菌体、大部分蛋白和部分色素，然后利用阳离子交换树脂吸附四氢嘧啶，再用氨水将四氢嘧啶洗脱后，经过活性炭脱色、浓缩醇沉、重结晶、干燥成品等操作步骤得到四氢嘧啶晶体。

公开(公告)号：CN105018403B

公开(公告)日：2018-01-09

申请号：CN201510410080.2

申请日：2015-07-14

申请人： 天津科技大学

发明人： 谢希贤 ,  陈宁 ,  宁义科 ,  范晓光 ,  吴雪娇 ,  徐庆阳 ,  张成林

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种产生四氢嘧啶的基因工程菌及其构建方法与应用，所述基因工程菌为具有特定基因型的大肠杆菌，包含来源于伸长盐单胞菌ectABC基因；lysA、thrA、iclR三个基因缺陷型；具有lac启动子控制的谷氨酸棒状杆菌lysC基因；trc启动子控制的ppc基因；使用该菌利用葡萄糖发酵生产四氢嘧啶能够克服化学合成法反应条件苛刻、能耗大等不足；能够克服伸长盐单胞菌发酵或酶催化法存在的工艺复杂、生产成本高等不足。发酵20‑28h后，四氢嘧啶产量达到了12‑18g/L，具有较好的工业应用价值。

公开(公告)号：CN105669560A

公开(公告)日：2016-06-15

申请号：CN201610017537.8

申请日：2016-01-12

申请人： 天津科技大学

发明人： 陈宁 ,  范晓光 ,  宁义科 ,  徐庆阳 ,  谢希贤 ,  张成林 ,  李燕军

IPC分类号： C07D239/06

CPC分类号： C07D239/06

摘要： 本发明提供一种从发酵液中分离提取四氢嘧啶的方法，克服现有生产工艺中存在的工艺路线复杂，分离纯化困难，能耗水耗较多等问题。本发明从富含四氢嘧啶的发酵液中分离提取四氢嘧啶，首先利用双膜系统即微滤膜、超滤膜分离系统过滤去除发酵液中的菌体、大部分蛋白和部分色素，然后利用阳离子交换树脂吸附四氢嘧啶，再用氨水将四氢嘧啶洗脱后，经过活性炭脱色、浓缩醇沉、重结晶、干燥成品等操作步骤得到四氢嘧啶晶体。

公开(公告)号：CN105018403A

公开(公告)日：2015-11-04

申请号：CN201510410080.2

申请日：2015-07-14

申请人： 天津科技大学

发明人： 谢希贤 ,  陈宁 ,  宁义科 ,  范晓光 ,  吴雪娇 ,  徐庆阳 ,  张成林

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种产生四氢嘧啶的基因工程菌及其构建方法与应用，所述基因工程菌为具有特定基因型的大肠杆菌，包含来源于伸长盐单胞菌ectABC基因；lysA、thrA、iclR三个基因缺陷型；具有lac启动子控制的谷氨酸棒状杆菌lysC基因；trc启动子控制的ppc基因；使用该菌利用葡萄糖发酵生产四氢嘧啶能够克服化学合成法反应条件苛刻、能耗大等不足；能够克服伸长盐单胞菌发酵或酶催化法存在的工艺复杂、生产成本高等不足。发酵20-28h后，四氢嘧啶产量达到了12-18g/L，具有较好的工业应用价值。