公开(公告)号：CN113433253A

公开(公告)日：2021-09-24

申请号：CN202110991715.8

申请日：2021-08-27

申请人： 天津海关动植物与食品检测中心 ,  天津科技大学

发明人： 董志珍 ,  赵良娟 ,  王洪彬 ,  王玉迎 ,  赵宏 ,  庞路 ,  宓捷波 ,  袁兆霆 ,  于敏 ,  赵化冰 ,  王淞

IPC分类号： G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/32 ,  G01N30/72 ,  C12Q1/04

摘要： 本发明公开了一种检测阪崎肠杆菌的新方法、应用及检测试剂盒，所述方法通过分析以下特征肽检测奶制品中的阪崎肠杆菌污染：I1：SEQ ID NO.1；I2：SEQ ID NO.2；I3：SEQ ID NO.3；I4：SEQ ID NO.4。本发明使用液相色谱三重四级杆质谱联用仪检测特征肽，本方法检测过程不依赖于菌落挑选和生化鉴定，具有高可靠性，并大大减少了检测时间，为食品中坂崎肠杆菌污染的检验提供了可靠有效的方法。

公开(公告)号：CN112666270A

公开(公告)日：2021-04-16

申请号：CN202010992553.5

申请日：2020-09-21

申请人： 天津科技大学 ,  天津海关动植物与食品检测中心

发明人： 王洪彬 ,  王玉迎 ,  赵宏 ,  董志珍 ,  赵良娟 ,  赵化冰

IPC分类号： G01N30/02 ,  G01N30/86 ,  G01N30/88 ,  G01N33/68 ,  C07K7/08 ,  C07K7/06

摘要： 本发明公开了一种基于组合特征肽的靶向分析检测金黄色葡萄球菌及肠毒素的新方法及试剂盒。具体地本发明中公开了可作为金黄色葡萄球菌及其分泌的肠毒素A和肠毒素B检测标准的特征肽。本发明的特征肽检测技术实现了同时检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素，极大的减少了检测时间和假阳性结果，为金黄色葡萄球菌及其肠毒素的检出提供了可靠有效的质量控制方法。

公开(公告)号：CN113433253B

公开(公告)日：2021-11-19

申请号：CN202110991715.8

申请日：2021-08-27

申请人： 天津海关动植物与食品检测中心 ,  天津科技大学

发明人： 董志珍 ,  赵良娟 ,  王洪彬 ,  王玉迎 ,  赵宏 ,  庞路 ,  宓捷波 ,  袁兆霆 ,  于敏 ,  赵化冰 ,  王淞

IPC分类号： G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/32 ,  G01N30/72 ,  C12Q1/04

摘要： 本发明公开了一种检测阪崎肠杆菌的新方法、应用及检测试剂盒，所述方法通过分析以下特征肽检测奶制品中的阪崎肠杆菌污染：I1：SEQ ID NO.1；I2：SEQ ID NO.2；I3：SEQ ID NO.3；I4：SEQ ID NO.4。本发明使用液相色谱三重四级杆质谱联用仪检测特征肽，本方法检测过程不依赖于菌落挑选和生化鉴定，具有高可靠性，并大大减少了检测时间，为食品中坂崎肠杆菌污染的检验提供了可靠有效的方法。

公开(公告)号：CN111334494A

公开(公告)日：2020-06-26

申请号：CN201910951895.X

申请日：2019-10-09

申请人： 天津科技大学

发明人： 路福平 ,  王洪彬 ,  邱悦悦 ,  王玉迎 ,  李雪 ,  刘逸寒

IPC分类号： C12N9/54 ,  C12N15/57 ,  C12N15/75 ,  C12N15/10 ,  C12R1/125

摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，涉及新型的高稳定性碱性蛋白酶突变体的筛选。本发明通过易错PCR技术筛选获得了克劳氏芽孢杆菌来源碱性蛋白酶的高稳定性突变体。这些突变体基因经测序发现分别在第747-749位为GAT，第859-861位为GTT，第955-957位为CTG，相应的氨基酸序列突变分别是在第165位突变为Asp，第203位为Val和第235位为Leu。发酵48h后，突变体发酵液的酶活力分别为30U/mL、41U/mL和35U/mL，比野生型碱性蛋白酶aprE重组菌株表达的发酵液的酶活力分别提高了11％、51％和30％。将得到的发酵液进行超滤纯化后在40℃恒温孵育48h后，碱性蛋白酶突变体的酶活保留率比野生型碱性蛋白酶的酶活提高了30％、88％、42％。这些高稳定性碱性蛋白酶突变体的筛选，有助于改善碱性蛋白酶的储存和应用效果。

公开(公告)号：CN111286470A

公开(公告)日：2020-06-16

申请号：CN201910952531.3

申请日：2019-10-09

申请人： 天津科技大学

发明人： 王洪彬 ,  路福平 ,  曾芳 ,  李雪 ,  王玉迎 ,  刘逸寒

IPC分类号： C12N1/20 ,  A62D3/02 ,  A62D101/28 ,  A62D101/26 ,  C12R1/125

摘要： 本发明筛选获得一株可降解红霉素的枯草芽孢杆菌BS-5，并将该菌株应用于红霉素发酵菌渣的无害化处理，有效降解了其中的红霉素残留。本发明属于微生物降解抗生素残留技术领域。该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.18635。本发明为红霉素发酵废弃物中红霉素残留的降解提供了有效的生物处理方法，适于工业推广应用，有望促进红霉素发酵工业健康和持续发展。

公开(公告)号：CN110819612A

公开(公告)日：2020-02-21

申请号：CN201910951894.5

申请日：2019-11-29

申请人： 天津科技大学

发明人： 路福平 ,  王洪彬 ,  邱悦悦 ,  李雪 ,  王玉迎 ,  刘逸寒

IPC分类号： C12N9/54 ,  C12N15/57 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12R1/125

摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种新型的能够抗自切的碱性蛋白酶突变体的筛选。本发明通过对克劳氏芽孢杆菌来源的碱性蛋白酶进行改造和筛选获得了抗自切性能优异的突变体，突变体的基因在第493-495位突变为GAT，第799-801位为GAT，相应的氨基酸序列分别是在第161位突变为Thr，第183位为Asp。在40℃恒温孵育48h后，碱性蛋白酶突变体的酶活保留率比野生型碱性蛋白酶的酶活提高了40％以上。抗自切碱性蛋白酶分子的筛选，有助于改善碱性蛋白酶的储存和应用效果。

公开(公告)号：CN110746485A

公开(公告)日：2020-02-04

申请号：CN201910952532.8

申请日：2019-10-09

申请人： 天津科技大学

发明人： 路福平 ,  王洪彬 ,  宋平 ,  李雪 ,  王玉迎 ,  刘逸寒

IPC分类号： C07K7/06 ,  C12N9/54 ,  C12N15/10 ,  C40B30/08

摘要： 本发明涉及新型碱性蛋白酶抑制肽的筛选，通过体外RNA展示筛选技术获得了芽孢杆菌来源的碱性蛋白酶的新型八肽抑制肽，该抑制肽能够增强液体制剂中碱性蛋白酶的稳定性，有望应用于液体酶制剂和加酶液体洗涤剂。

公开(公告)号：CN112280769A

公开(公告)日：2021-01-29

申请号：CN202010992651.9

申请日：2020-09-21

申请人： 天津科技大学

发明人： 王洪彬 ,  王玉迎 ,  李奕鸣 ,  杨霁菡 ,  曾芳

IPC分类号： C12N9/76

摘要： 本发明公开了一种利用甲基化修饰获得的抗自切甲基化胰蛋白酶及其制备方法。具体地本发明中公开了甲基化修饰的抗自切胰蛋白酶的性能和详细的制备方法。本发明的甲基化胰蛋白酶及制备方法实现了胰蛋白酶稳定性的显著提升，极大地减少了胰蛋白酶因自切带来的酶活损失和对应用效果的干扰，为将来实现高稳定胰蛋白酶的生产建立了重要的基础。

公开(公告)号：CN111175513A

公开(公告)日：2020-05-19

申请号：CN201910952170.2

申请日：2019-10-09

申请人： 天津科技大学

发明人： 王洪彬 ,  路福平 ,  曾芳 ,  王玉迎 ,  李雪

IPC分类号： G01N33/68 ,  G01N30/89 ,  G01N1/34

摘要： 一种从蛋白质提取样品中去除离子型表面活性剂的新方法，命名为电滤法，属于蛋白质样品前处理领域。从细胞中提取蛋白质常常需要借助十二烷基硫酸钠等离子型表面活性剂，但是表面活性剂的加入又会影响后续的酶切处理、色谱分离和质谱分析，因此需要去除蛋白质提取液中的表面活性剂。本发明创新性地整合了电场提供的分子迁移作用和超滤膜提供的分子筛作用，依靠蛋白质和表面活性剂在分子大小上的不同，实现蛋白质样品中离子型表面活性剂的去除。该方法可以有效去除蛋白质提取样品中的离子型表面活性剂，消除离子型表面活性剂对蛋白质酶切处理和质谱分析的不利影响。