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公开(公告)号:CN115040163A
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN202210443221.0
申请日:2022-04-26
申请人: 天津科技大学 , 天科本真(天津)生物科技有限公司
IPC分类号: A61B10/00
摘要: 本发明公开了一种鼠口腔内微生物的采样方法及应用,包括如下步骤:在鼠的口腔内部表面擦拭,从舌头开始,然后是颊部、上牙龈、上颚,最后是下门牙的牙龈及唇部,共计30s;结束后快速将采样后的棉签放入无菌EP管中或含有无菌Pbw溶液的EP管中,用剪刀切割棉签柄,长度不低于EP管长度的1/2;扣盖后立即将管放在干冰上;收集所有样品后,直接放入EP管中的样品存储在‑80℃。本发明方法中采样过程中不会对鼠口腔内部表面造成损伤,避免了侵入性采样对口腔产生的创伤,适合鼠口腔内部微生物采样使用。同时,本发明方法收集到的生物量较大,后续最终获得的菌量、总DNA浓度及质量能够达到要求。
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公开(公告)号:CN114381535A
公开(公告)日:2022-04-22
申请号:CN202111599138.4
申请日:2021-12-24
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明公开了一种不基于测序的快速检测口腔生物膜中总细菌及5种主要属细菌数量的方法,步骤如下:(1)提取口腔生物膜样品的微生物基因组DNA;(2)制备质粒标准品;(3)标准曲线建立;(4)定量分析;(5)计算待测生物膜样品目标基因片段的总拷贝数N=10(Ct‑b)/a。本发明方法能够快速、准确、灵敏地定量出口腔生物膜中总细菌的数量以及5种主要属细菌的丰度和比例,避免了测序耗时、耗费成本的问题和传统的细菌培养数据不可靠的弊端,对研究体外口腔生物膜的物种组成和功能具有重要作用,且操作方便、快捷、经济。本发明所建立的标准曲线具有较高的线性相关(R2>0.99),数据精准度高。
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