公开(公告)号：CN104711276A

公开(公告)日：2015-06-17

申请号：CN201510121857.3

申请日：2015-03-19

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 范军 ,  项艳 ,  赵华琳 ,  王蕾蕾 ,  董庆 ,  李媛

IPC: C12N15/55 ,  C12N15/84 ,  C12N15/66 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及一种新型筛选标记玉米丝氨酸消旋酶基因应用于烟草转化技术。本发明以玉米自交系B73三叶期的cDNA为模板克隆得到玉米丝氨酸消旋酶基因序列(ZmSR)，将该基因替换双元表达载体pCAMBIA1301上的GUS标记基因，将该载体命名为pBI1301-ZmSR。本研究利用玉米丝氨酸消旋酶基因，通过农杆菌介导法对烟草叶片及愈伤组织进行遗传转化，同时用含有GUS基因的pBI121载体导入烟草中作为对照，对比ZmSR和GUS基因在叶片及愈伤组织的转化效果，为ZmSR作为新型无抗性筛选标记奠定基础。

公开(公告)号：CN104920213A

公开(公告)日：2015-09-23

申请号：CN201510297831.4

申请日：2015-06-02

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 项艳 ,  赵康 ,  李媛 ,  陈丹梅 ,  王依依

IPC: A01H4/00

Abstract: 毛竹种胚诱导愈伤组织形成的方法，包括以下步骤：(1)筛选出生活力高于75％的毛竹种子；(2)取出筛选出的毛竹种子的种胚，切除50％以上的胚乳，依次用流水、乙醇、无菌水、次氯酸钠溶液、无菌水、加有吐温-80的升汞进行处理，再去除表面水分备用；(3)将消毒后的种胚接种到诱导培养基上，暗培养7—10天使愈伤组织形成，然后将愈伤组织分离出来，接种到增殖培养基上增殖培养20—30天即可。本发明选取毛竹种子的种胚作为外植体，可以直接将毛竹种子的外种皮与内在种胚之间的缝隙处藏纳的污垢、泥土和细菌等污染物去除，从而有效降低污染率。本发明愈伤组织诱导率可以达到64.3％，而污染率能控制在20％以下，并且愈伤组织的形态优良，生长状态好。

公开(公告)号：CN104920213B

公开(公告)日：2017-03-22

申请号：CN201510297831.4

申请日：2015-06-02

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 项艳 ,  赵康 ,  李媛 ,  陈丹梅 ,  王依依

IPC: A01H4/00

Abstract: 毛竹种胚诱导愈伤组织形成的方法，包括以下步骤：(1)筛选出生活力高于75％的毛竹种子；上的胚乳，依次用流水、乙醇、无菌水、次氯酸钠溶液、无菌水、加有吐温-80的升汞进行处理，再去除表面水分备用；(3)将消毒后的种胚接种到诱导培养基上，暗培养7—10天使愈伤组织形成，然后将愈伤组织分离出来，接种到增殖培养基上增殖培养20—30天即可。本发明选取毛竹种子的种胚作为外植体，可以直接将毛竹种子的外种皮与内在种胚之间的缝隙处藏纳的污垢、泥土和细菌等污染物去除，从而有效降低污染率。本发明愈伤组织诱导率可以达到64.3％，而污染率能控制在20％以下，并且愈伤组织的形态优良，生长状态好。(2)取出筛选出的毛竹种子的种胚，切除50％以