公开(公告)号：CN104678044A

公开(公告)日：2015-06-03

申请号：CN201510109474.4

申请日：2015-03-12

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 宛晓春 ,  李敏 ,  李大祥 ,  邰玉玲 ,  顾晨晨 ,  宗建法

IPC: G01N30/89

Abstract: 本发明涉及一种反相高效液相色谱检测茶叶中游离氨基酸的方法，首先将鲜茶叶干燥粉碎，加入沸水浸提，收集上清后重复提取合并上清液，上清液经抽滤后通过AccQ·Tag衍生试剂对茶汤样品进行柱前衍生，采用HPLC和AccQ-Tag C18氨基酸专用分析柱对色谱分离检测条件进行优化，从而能够对谷氨酰胺等19种游离氨基酸进行分离和检测。该方法可同时测定茶叶中谷氨酰胺等19种游离氨基酸含量。弥补了目前基于高效液相色谱不能快速准确对茶叶中谷氨酰胺进行定性和定量分析的空缺，并为研究茶叶氨基酸合成途径提供了新思路。

公开(公告)号：CN102703397A

公开(公告)日：2012-10-03

申请号：CN201210142194.X

申请日：2012-05-09

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 袁艺 ,  邰玉玲 ,  杨秀梅

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了一种洋甘菊法呢基焦磷酸合酶及其重组表达载体的构建与表达方法，该酶的氨基酸序列如SEQ NO 2所示，其核苷酸序列如SEQ NO 1所示。本发明洋甘菊FPS基因ORF框为1032bp,通过序列比较，证明洋甘菊FPS基因与其他植物倍半萜合成酶基因具有较高的同源性；并通过构建原核表达载体pET-30a(+)/ FPS，诱导表达可溶性蛋白，进行Westerning 验证，得到分子量约为38KDa的目的蛋白，为下一步FPS蛋白纯化及蛋白结构和特性的研究奠定基础，进而为通过转基因方法提高洋甘菊母菊薁产量提供依据。此外本发明对诱导表达蛋白的条件进行了优化，其最佳诱导时间为6h；最佳诱导温度为37℃。

公开(公告)号：CN113318184A

公开(公告)日：2021-08-31

申请号：CN202110687418.4

申请日：2021-06-21

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 袁艺 ,  郑路杰 ,  黄世霞 ,  邰玉玲

IPC: A61K36/8967 ,  A61K125/00

Abstract: 一种卷丹百合总皂苷的提取方法，包括：（1）卷丹百合预处理、（2）充氮研磨、（3）复合酶处理、（4）乙醇提取、（5）离心与浓缩和（6）大孔树脂纯化。本发明提取的皂苷，纯度可达73‑75%。

公开(公告)号：CN102816784A

公开(公告)日：2012-12-12

申请号：CN201210322250.8

申请日：2012-09-04

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 袁艺 ,  杨秀梅 ,  邰玉玲

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/54 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种洋甘菊法尼基焦磷酸合酶（FPS）基因真核表达载体的构建及转化方法，从洋甘菊花瓣中提取RNA，以洋甘菊总RNA为模板，反转录为cDNA；然后以cDNA为模板；进行PCR扩增；得到目的片段，目的片段与T4连接酶连接，将连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，得到真核表达载体PBI121/FPS，然后将重组表达载体导入根癌农杆菌EHA105后，根癌农杆菌EHA105侵染模式植物云烟85等过程，最终获得抗性烟草植株。本发明利用基因工程技术克隆FPS基因，借助根癌农杆菌侵染植株的愈伤组织，通过FPS基因在植物体内的表达为提高母菊薁产量作铺垫。

公开(公告)号：CN113295788A

公开(公告)日：2021-08-24

申请号：CN202110529100.3

申请日：2021-05-14

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 赵天宇 ,  袁艺 ,  邰玉玲 ,  黄世霞 ,  余晓锐

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/14 ,  G01N30/34 ,  G01N30/74 ,  G01N30/88

Abstract: 本发明提供了一种用于提取多种B族维生素提取剂的制备方法，主要包括如下步骤：(1)将EDTA溶液、冰乙酸、三乙胺按比例称取后混合均匀得到混合液；(2)在所述混合液中加水进行稀释定容得到稀释溶液；(3)将所述稀释溶液与甲醇按比例混合后超声脱气得到所述的用于提取多种B族维生素的提取剂。本发明的用于提取B族维生素的提取剂的制备方法操作简单，成本低廉，使用该制备方法制得的提取剂能够一次性提取多种B族维生素，从而使样品在一次液相进样中可以被同时检测到多种维生素，简化了提取步骤，节约时间，降低对检测仪器的要求。

公开(公告)号：CN104678044B

公开(公告)日：2016-03-30

申请号：CN201510109474.4

申请日：2015-03-12

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 宛晓春 ,  李敏 ,  李大祥 ,  邰玉玲 ,  顾晨晨 ,  宗建法

IPC: G01N30/89

Abstract: 本发明涉及一种反相高效液相色谱检测茶叶中游离氨基酸的方法，首先将鲜茶叶干燥粉碎，加入沸水浸提，收集上清后重复提取合并上清液，上清液经抽滤后通过AccQ·Tag衍生试剂对茶汤样品进行柱前衍生，采用HPLC和AccQ-Tag C18氨基酸专用分析柱对色谱分离检测条件进行优化，从而能够对谷氨酰胺等19种游离氨基酸进行分离和检测。该方法可同时测定茶叶中谷氨酰胺等19种游离氨基酸含量。弥补了目前基于高效液相色谱不能快速准确对茶叶中谷氨酰胺进行定性和定量分析的空缺，并为研究茶叶氨基酸合成途径提供了新思路。