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发明公开
从鱼类肠系膜脂肪组织中克隆鱼类ob基因的方法无效

公开(公告)号：CN101280302A

公开(公告)日：2008-10-08

申请号：CN200810023716.8

申请日：2008-04-18

申请人： 安徽省农业科学院水产研究所

发明人： 潘庭双 , 龙良启 , 王永杰 , 戴汉川 , 侯冠军

IPC分类号： C12N15/10

摘要： 本发明涉及从鱼类肠系膜脂肪组织中克隆鱼类ob基因的方法。解决了采用现有克隆技术较难克隆出鱼类ob基因的问题。本发明方法全新设计一对引物P1、P2，结构如下：P1：GAGGAATTCGTGCCTATCCAGGAT GAATTC为EcoRI酶切位点，P2：GACAAGCTTCTCAGCATTAGGGCG AAGCTT为HindIII酶切位点，从鱼类的肠系膜脂肪组织RNA中扩增出了不同鱼的ob基因片断，并将ob基因分别克隆至pMD18－T载体中，经酶切鉴定和聚合酶链反应(PCR)鉴定后，进行序列测定，达到能够高效克隆出鱼类ob基因的目的。本发明每个引物含有一个特异性酶切位点，特异性酶切位点的存在为酶切签定和定向克隆提供有利条件。