-
公开(公告)号:CN118272299A
公开(公告)日:2024-07-02
申请号:CN202310998568.6
申请日:2021-05-25
IPC分类号: C12N5/0781 , C12N15/13 , C12N15/85 , C07K16/10 , C12R1/91
摘要: 本发明提供了一种特异性表达人源性单克隆中和抗体的B细胞的制备方法,以CD19+磁珠对样本进行细胞分离,筛选出IgG+的记忆B细胞,再对IgG+的记忆B细胞进行流式检测,得到纯度超过90%的CD19+IgG+B细胞;对细胞培养14天,得到细胞培养液,对细胞培养液进行上清液收集,检测上清液中抗SARS‑CoV‑2病毒RB D抗体IgG的含量,并根据所得IgG浓度判断CD19+IgG+B细胞的活性和功能,再筛选出阳性孔中具有RBD特异性的CD19+IgG+B细胞的细胞培养液,作为表达B细胞,该细胞可以特异性表达人源性单克隆中和抗体,提高了单克隆抗体的抗体亲和力与中和活性。
-
公开(公告)号:CN116068165A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202310065005.1
申请日:2023-02-06
IPC分类号: G01N33/531 , G01N33/564 , G01N21/78 , G01N30/02 , G01N30/72
摘要: 本发明公开了鸡蛋过敏原点刺液检测试剂盒制备方法,包括以下步骤:步骤一,鸡蛋过敏患者血清样本收集;步骤二,鸡蛋蛋清过敏原提取制备;步骤三,鸡蛋过敏原蛋白表达制备;步骤四,免疫斑点实验;步骤五,ELISA试验检测患者血清与过敏原的反应;步骤六,点刺液制备;其中在上述步骤一中,鸡蛋过敏患者进行血清样本收集;该鸡蛋过敏原点刺液检测试剂盒制备方法,从过敏原的分离与制备出发,提高抗原的纯度,并利用交叉免疫测试实验、结合阳性对照与阴性对照,降低检测的假阳性,提高检测的准确性;同时设计的鸡蛋过敏原点刺液检测试剂盒进一步提高了过敏原的检出率并增加了可靠性;对临床食物过敏原点刺检测具有重要的意义。
-
公开(公告)号:CN117265014A
公开(公告)日:2023-12-22
申请号:CN202311245855.6
申请日:2021-05-25
IPC分类号: C12N15/867 , C12N15/53 , C12Q1/18 , G01N21/76
摘要: 本发明公开了一种病毒S蛋白突变体的构建方法及应用,涉及病毒S蛋白突变体的构建技术领域,根据基因组序列号GenBank:MN908947,密码子优化合成S蛋白全长基因序列并连接真核表达质粒pcDNA3.1(+)得到重组表达质粒pcDNA3.1(+)‑Spike;采用点突变的方式对真核表达质粒pcDNA3.1(+)‑Spike进行反向PCR,正反向扩增引物5’端包含15‑21bp反向互补区域,引物设计时将引入突变包含在互补区域内;对目标质粒扩增后对产物消化,去除甲基化模板质粒后进行重组反应;反应产物转化并进行克隆鉴定,测序正确即为突变成功的S蛋白突变体表达质粒。
-
公开(公告)号:CN115993459A
公开(公告)日:2023-04-21
申请号:CN202310101680.5
申请日:2023-02-13
摘要: 本发明公开了牛奶过敏原点刺液检测试剂盒制备方法,包括以下步骤:步骤一,样本收集;步骤二,过敏原提取;步骤三,蛋白表达制备;步骤四,免疫斑点实验;步骤五,ELISA试验;步骤六,点刺液制备;本发明,通过招募牛奶过敏患者,并采集患者的血清进行IgE检测帅选出阳性的血清样本,之后从牛奶中提取过敏原,分析并提取牛奶基因组表达和纯化高纯度的乳清蛋白,然后使用提取的乳清蛋白进行免疫斑点试验、过敏原ELISA检测和交叉免疫测试,最终获得和制备出高特异性高灵敏的牛奶过敏原点刺液试剂盒,从根本上提高了点刺液中过敏原的纯度,降低了临床测试中的假阳性率,提高了牛奶过敏原检测的精准性,对临床食物过敏原点刺检测具有重要的意义。
-
公开(公告)号:CN113321728A
公开(公告)日:2021-08-31
申请号:CN202110571826.3
申请日:2021-05-25
摘要: 本发明公开了新型人源性单克隆中和性抗体XG‑81与XG‑83的制备方法,包括以下步骤:步骤一,标本采集;步骤二,标本分离;步骤三,滴度检测;步骤四,细胞分离;步骤五,铺板培养;步骤六,细胞筛选;步骤七,序列合成;步骤八,载体构建;步骤九,真核表达;步骤十,结合鉴定;步骤十一,阻断鉴定;步骤十二,病毒构建;步骤十三,中和鉴定;步骤十四,特性筛选;步骤十五,位点选定;步骤十六,突变扩增;步骤十七,抗体优化;其中在上述步骤一中,根据入选标准招募20名康复期患者,并采用非干预性研究方法;本发明公开了新型人源性单克隆中和性抗体XG‑81与XG‑83的制备方法。
-
公开(公告)号:CN116183895A
公开(公告)日:2023-05-30
申请号:CN202211636270.2
申请日:2022-12-20
IPC分类号: G01N33/531 , G01N33/68
摘要: 本发明公开了食物过敏原点刺液检测试剂盒的制备方法,包括以下步骤:步骤一,食物过敏患者血清样本收集;步骤二,花生过敏原提取制备;步骤三,花生过敏原蛋白表达制备;步骤四,免疫斑点实验;步骤五,点刺液试验检测患者血清与过敏原的反应;步骤六,点刺液制备;其中在上述步骤一中,对食物过敏患者的血清样本进行收集;该发明,通过收集花生过敏患者血清、从花生中提取过敏原、利用花生基因组表达和纯化花生过敏原,并结合免疫斑点试验、过敏原点刺液检测、交叉免疫测试,最终获得和制备高特异性高灵敏度的花生过敏原点刺液试剂盒;降低了临床测试中的假阳性率,对临床食物过敏原点刺检测具有重要的意义。
-
公开(公告)号:CN113444745A
公开(公告)日:2021-09-28
申请号:CN202110573556.X
申请日:2021-05-25
IPC分类号: C12N15/867 , C12N15/65 , C12Q1/18 , G01N21/76
摘要: 本发明公开了病毒S蛋白突变体假病毒盘的构建及其疫苗评价应用,包括以下步骤:步骤一,假病毒体系的构建;步骤二,假病毒活性的检测;步骤三,假病毒用于新冠疫苗免疫效果的评估;其中步骤一中根据新型冠状病毒基因组序列号GenBank:MN908947,对数据库中变异位点毒株数量较多且传播范围较广的突变位点进行分析统计,选择40种突变位点用于构建假病毒;步骤二中对S蛋白假病毒的活性进行检测,并分类统计后组成新冠病毒假病毒盘;步骤三中将此假病毒盘应用于SARS‑CoV‑2疫苗效果评估,该发明可以更为全面评估新冠疫苗的免疫效果,特别是评估现行的新冠疫苗是否可以有效地预防新冠病毒突变株的感染和流行。
-
-
-
-
-
-