公开(公告)号：CN101560494A

公开(公告)日：2009-10-21

申请号：CN200910015751.X

申请日：2009-05-31

Applicant: 山东农业大学

Inventor： 谭景和 ,  周萍 ,  吴延光 ,  罗明久 ,  李青 ,  王刚 ,  高达 ,  魏德莉

IPC: C12N5/06

Abstract: 本发明涉及一种小鼠裸卵体外成熟技术，属于生物技术领域。本发明为卵丘细胞利用胱氨酸和半胱胺提高了小鼠裸卵GSH合成和发育能力，进而建立了卵丘细胞共培养结合添加半胱胺和胱氨酸使小鼠裸卵完全恢复发育能力的体外成熟系统。小鼠裸卵在添加100－200μmol/l半胱胺和250－300μmol/l胱氨酸的TCM－199成熟培养液中与小鼠或山羊卵丘细胞共培养，其囊胚率达到添加相同巯基化合物培养成熟COC水平。将共培养成熟的裸卵和COC产生的2－细胞胚胎移植后，妊娠率和产仔数差异不显著。这是在国际上首次建立使小鼠裸卵完全恢复发育能力的体外成熟系统，对于动物胚胎工程以及人类辅助生殖技术研究和应用都有重要意义。

公开(公告)号：CN102618495A

公开(公告)日：2012-08-01

申请号：CN201210061136.4

申请日：2012-03-09

Applicant: 山东农业大学

Inventor： 谭景和 ,  李青 ,  王刚 ,  张杰 ,  周萍 ,  罗明久

IPC: C12N5/075

Abstract: 本发明涉及一种小鼠成熟卵母细胞体外保存方法，是把小鼠成熟卵母细胞用含10.27mM丙酮酸的HCZB培养液在15°C下培养36小时，37°C恢复培养6小时，体外受精后囊胚发育率和胚胎移植妊娠率、产仔数及胎儿初生重都达到与新排卵卵母细胞相同水平。研究目的是通过在培养液中添加高浓度丙酮酸结合降低培养温度防止卵母细胞老化，延长体外保存时间。本发明体外保存哺乳动物成熟卵母细胞长达42小时不影响发育能力，对于动物胚胎工程及人类辅助生殖技术研究和应用都有重要意义。

公开(公告)号：CN101560494B

公开(公告)日：2010-12-29

申请号：CN200910015751.X

申请日：2009-05-31

Applicant: 山东农业大学

Inventor： 谭景和 ,  周萍 ,  吴延光 ,  罗明久 ,  李青 ,  王刚 ,  高达 ,  魏德莉

IPC: C12N5/06

Abstract: 本发明涉及一种小鼠裸卵体外成熟技术，属于生物技术领域。本发明为卵丘细胞利用胱氨酸和半胱胺提高了小鼠裸卵GSH合成和发育能力，进而建立了卵丘细胞共培养结合添加半胱胺和胱氨酸使小鼠裸卵完全恢复发育能力的体外成熟系统。小鼠裸卵在添加100-200μmol/l半胱胺和250-300μmol/l胱氨酸的TCM-199成熟培养液中与小鼠或山羊卵丘细胞共培养，其囊胚率达到添加相同巯基化合物培养成熟COC水平。将共培养成熟的裸卵和COC产生的2-细胞胚胎移植后，妊娠率和产仔数差异不显著。这是在国际上首次建立使小鼠裸卵完全恢复发育能力的体外成熟系统，对于动物胚胎工程以及人类辅助生殖技术研究和应用都有重要意义。