公开(公告)号：CN114908177A

公开(公告)日：2022-08-16

申请号：CN202110183452.8

申请日：2021-02-10

申请人： 山东农业大学

发明人： 李建亮 ,  栾晓宁 ,  王超 ,  王一新 ,  郭云 ,  贝峰 ,  徐瑞雪 ,  曹凤阳

IPC分类号： C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

摘要： 本发明公开了EMA处理结合微控芯片数字PCR检测肉制品中单增李斯特菌的方法，包括以下步骤：菌液培养；确定EMA处理单增李斯特菌的处理方式，提取DNA模板；选择单增李斯特菌hly基因的LM溶血素保守区设计探针和引物；确定微控芯片数字PCR的反应体系，进行扩增反应；待反应到达终点后，含有待测基因靶标的反应体系中可检测到荧光信号，不含待测基因靶标时没有信号积累，读取阴性、阳性微滴的数量后传至数据处理软件得到最终定量检测结果。本发明的EMA‑dPCR检测方法将是一种快速、简便、特异性强、灵敏度高、稳定性良好的仅检测单增李斯特菌活菌的有效方法。该法标准程序的建立，将提高肉制品中单增李斯特菌检验的效率和精确度，尤其有利于进出口肉制品的快速通关。