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公开(公告)号：CN103901213B
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201410125740.8
申请日：2014-03-31
申请人： 山东农业大学
IPC分类号： G01N33/68
摘要： 本发明提供了一种区别坦布苏病毒活毒与灭活疫苗产生抗体的ELISA检测方法；分离纯化利用大肠杆菌原核表达的坦布苏病毒E蛋白和NS5蛋白；在96孔ELISA板中加入封闭液、待检鸭血清、PBST稀释液、PBST稀释液稀释HRP标记的兔(或羊)抗鸭的二抗等，终止反应后读取OD450nm值，结果中E蛋白OD450nm为阳性且NS5蛋白OD450nm值为阴性说明抗体为灭活疫苗产生；如果两者均为阳性说明抗体由活毒感染产生。本发明建立的坦布苏病毒ELISA检测方法能够区分坦布苏病毒活毒与灭活疫苗产生抗体，对鸭坦布苏病毒抗体水平监测和坦布苏病毒感染鉴定具有重要的作用，同时本发明操作简单，成本较低，适用于大规模的样品检测。
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公开(公告)号：CN105154410A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510606547.0
申请日：2015-09-21
申请人： 山东农业大学
摘要： 本发明涉及动物病毒学领域，提供了一种鸭细小病毒毒株及其活疫苗和制备方法，该毒株为鸭细小病毒，具体命名为GT2015v株，其生物保藏编号为CCTCC No：V201528；利用该毒株制备的疫苗有效解决了我国当前该病无法预防的现状，通过鸭胚连续传代对中等毒力分离株进行致弱，使其失去对鸭的致病性，并保持良好的免疫原性，能够安全、有效地预防和控制鸭细小病毒感染，降低养殖风险，保障养鸭业的健康发展。
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公开(公告)号：CN105063043A
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201510603558.3
申请日：2015-09-21
申请人： 山东农业大学
摘要： 本发明生物技术领域，涉及一种鸭细小病毒Taqman探针荧光定量PCR检测试剂盒及其应用，发明人提供了一对特异性引物及对应的荧光探针，之后利用已知鸭细小病毒株基因组序列选取保守基因序列，利用基因克隆技术构建含有该保守基因序列的标准质粒分子，进而获得标准曲线，利用对应的荧光定量PCR技术即可对样本进行检测并比对标准曲线即可判定样本是否为阳性，这种方法特异性好，灵敏度高且线性关系好，操作简单，自动化程度高、防污染；使用Taqman荧光探针定量扩增和检测可以在同一管内检测，不需要开盖，不易污染，同时扩增和检测一步完成，操作简单，易于实现自动化。
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公开(公告)号：CN103869066B
公开(公告)日：2017-01-04
申请号：CN201410123528.8
申请日：2014-03-28
申请人： 山东农业大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/535
摘要： 本发明提供了一种坦布苏病毒双抗体夹心ELISA检测方法；本发明包括单克隆抗体制备、酶标抗体的选择和ELISA检测程序等步骤；本发明建立的坦布苏病毒夹心ELISA检测方法具有快速、稳定、特异性高、灵敏度高，使用本发明只需使用棉拭子采集气管或泄殖腔分泌物或其它含有坦布苏病毒的样品，即可快速检测样品中是否含有坦布苏病毒；本发明适合应用于鸭场对鸭群是否感染坦布苏病毒的大批量检测。本发明首次用血清学方法进行坦布苏病毒的检测。与现有技术相比，本发明更适合于基层进行大规模的病原检测，是一种简便，快速，特异的双抗体夹心ELISA方法。
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公开(公告)号：CN105301240A
公开(公告)日：2016-02-03
申请号：CN201510603584.6
申请日：2015-09-21
申请人： 山东农业大学
IPC分类号： G01N33/569
CPC分类号： G01N33/56983 , G01N2333/015
摘要： 本发明涉及兽医病原抗体检测技术领域，具体涉及一种鸭细小病毒间接ELISA检测试剂盒，发明人首先提供了一种鸭细小病毒的VP3蛋白，该蛋白氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，表达该蛋白的核苷酸序列，如SEQ ID No.2所示。研究表明，该蛋白具有良好的免疫反应原性，可以用于DPV抗体的检测，进而利用该蛋白提供了鸭细小病毒抗体ELISA检测试剂盒，该试剂盒具有快速、稳定、特异性高、灵敏度强，能够快速检测血清中鸭细小病毒的抗体水平，为该病的预防和控制具有明显的推动作用。
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公开(公告)号：CN105153303A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510605188.7
申请日：2015-09-21
申请人： 山东农业大学
摘要： 本发明涉及生物制品技术领域，具体涉及一种防治鸭细小病毒的卵黄抗体及其制备方法，所述的卵黄抗体来源于使用鸭细小病毒活疫苗和鸭细小病毒灭活疫苗高强度联合免疫健康蛋鸡的初产蛋，这种卵黄抗体，不仅制备方法易于操作，适合大规模生产，且制备的鸭细小病毒卵黄抗体性质稳定、纯度高、效价高、特异性较强，无药残，温和环保，对鸭细小病毒感染的预防及治疗极具应用价值，为鸭细小病毒卵黄抗体的制备提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN106085964B
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201610394584.4
申请日：2016-06-03
申请人： 山东农业大学
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , C07K14/18 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
摘要： 本发明提供了一株分泌鸭坦布苏病毒NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、其分泌的单克隆抗体及其鉴定的TMUV‑NS1蛋白的TMUV特异性细胞表位。本发明利用TMUV NS1蛋白制备了单克隆抗体，利用单克隆抗体筛选鉴定了1个NS1蛋白的B细胞表位269DEKEIV313，该表位具有高度的保守性和特异性，可用于TMUV多肽疫苗的研制及特异性血清学方法的建立等方面。
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公开(公告)号：CN105219735B
公开(公告)日：2018-04-03
申请号：CN201510606498.0
申请日：2015-09-21
申请人： 山东农业大学
摘要： 本发明涉及动物病毒学领域，提供了一种鸭细小病毒毒株及其灭活疫苗和制备方法，该毒株为鸭细小病毒，具体命名为GT2015株，其生物保藏编号为CCTCCNo：V201527；利用该毒株制备的疫苗有效解决了我国当前该病无法预防的现状，提高肉鸭的出栏合格率，降低肉鸭养殖的料肉比，减少了该病造成了经济损失，制备方法简单，短时间内可制备完毕；安全性高，对环境没有任何不良影响；使用操作方便，使用时取出组织灭活苗注射即可；适于规模化批量生产和应用；免疫效率高，接种后保护率可至100％；保质期可达12个月。
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公开(公告)号：CN105154410B
公开(公告)日：2018-04-03
申请号：CN201510606547.0
申请日：2015-09-21
申请人： 山东农业大学
摘要： 本发明涉及动物病毒学领域，提供了一种鸭细小病毒毒株及其活疫苗和制备方法，该毒株为鸭细小病毒，具体命名为GT2015v株，其生物保藏编号为CCTCC No：V201528；利用该毒株制备的疫苗有效解决了我国当前该病无法预防的现状，通过鸭胚连续传代连续传代对中等毒力分离株进行致弱，使其失去对鸭的致病性，并保持良好的免疫原性，能够安全、有效地预防和控制鸭细小病毒感染，降低养殖风险，保障养鸭业的健康发展。
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公开(公告)号：CN105203757B
公开(公告)日：2017-07-07
申请号：CN201510604319.X
申请日：2015-09-21
申请人： 山东农业大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/577
摘要： 本发明提供了一种快速诊断坦布苏病毒的胶体金试纸条，包括PVC底板，所述的底板一端设置有样品垫，样品垫的一端通过金标垫与硝酸纤维素膜相连接，硝酸纤维素膜的另一端与吸水垫相连接，所述的金标垫上包被有抗坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体——胶体金标记物，所述的硝酸纤维素膜上设置有一条包抗坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的检测区和一条包被羊抗鼠二抗的对照区，采用这种结构的试纸条具有特异性强，操作简便、快速，结果显示直观、准确，减少投资和检测成本，应用范围广等优点，能广泛应用于基层对于坦布苏病毒的检测。
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