公开(公告)号：CN114507648B

公开(公告)日：2024-01-16

申请号：CN202210289700.1

申请日：2022-03-23

申请人： 山东大学

发明人： 李盛英 ,  蒋媛媛 ,  李众 ,  马莉

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12P7/18 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一类催化维生素D3合成25‑羟基维生素D3的P450酶突变体，是由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示P450酶的第75位氨基酸由亮氨酸分别突变为丙氨酸或甘氨酸或苏氨酸或组氨酸形成的，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2‑NO.5所示。本发明还公开了所述P450酶突变体的制备方法及其在生产25‑羟基维生素D3中的应用。实验证实所述P450酶突变体催化维生素D3合成25‑羟基维生素D3的效率最高可达P450BM3F87A的3.1倍。并且，整个生产25‑羟基维生素D3的操作过程简单，工艺成熟，环境友好，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN114507648A

公开(公告)日：2022-05-17

申请号：CN202210289700.1

申请日：2022-03-23

申请人： 山东大学

发明人： 李盛英 ,  蒋媛媛 ,  李众 ,  马莉

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12P7/18 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一类催化维生素D3合成25‑羟基维生素D3的P450酶突变体，是由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示P450酶的第75位氨基酸由亮氨酸分别突变为丙氨酸或甘氨酸或苏氨酸或组氨酸形成的，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2‑NO.5所示。本发明还公开了所述P450酶突变体的制备方法及其在生产25‑羟基维生素D3中的应用。实验证实所述P450酶突变体催化维生素D3合成25‑羟基维生素D3的效率最高可达P450BM3F87A的3.1倍。并且，整个生产25‑羟基维生素D3的操作过程简单，工艺成熟，环境友好，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN117363589A

公开(公告)日：2024-01-09

申请号：CN202210763140.9

申请日：2022-06-30

申请人： 山东大学

发明人： 李盛英 ,  蒋媛媛

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  A62D3/02 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46 ,  A01H6/54 ,  A01H6/60 ,  C12R1/19 ,  A62D101/04

摘要： 本发明公开了一类降解苯氧羧酸类除草剂的P450酶及其突变体，所述P450酶分别命名为P450BSβ、OleTJE；所述P450酶突变体分别命名为P450BSβ‑F46A、P450BSβ‑F79A、P450BSβ‑F173A、P450BSβ‑F289A、P450BSβ‑F292A；其氨基酸序列分别如SEQIDNO.1‑7所示。本发明还公开了所述P450酶及其突变体在降解苯氧羧酸类除草剂及其相关基因在培育抗苯氧羧酸类除草剂转基因作物中的应用。实验证实所述P450酶突变体降解苯氧羧酸类除草剂的效率最高可达P450BSβ的12.3倍，且催化2,4‑二氯苯氧丁酸的总转化数最高可达8779。本发明所述的P450酶突变体具有催化效率高、蛋白表达量高以及工业成本低等优点，整个降解除草剂的操作过程简单，工艺成熟，成本低廉，具有广阔的应用前景。