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公开(公告)号：CN101703002A
公开(公告)日：2010-05-12
申请号：CN200910213356.2
申请日：2009-11-03
申请人： 江苏农林职业技术学院 , 山东省林业科学研究院
摘要： 本发明公开了一种克服苜蓿品种基因型限制高频体胚再生培养基，包括幼苗生长驯化培养基、体细胞胚胎发生诱导培养基、胚继代形成培养基和胚成熟萌发成苗培养基，幼苗生长驯化培养基为1/2改良MS+20g/L白糖+0.7％琼脂；体细胞胚胎发生诱导培养基为改良SH+6～10mg/L2，4-D+0.2～0.5mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+0.3％phytagel；胚继代形成培养基为改良SH+2～5mg/L 2，4-D+0.2～0.5mg/L6-BA+500mg/L水解酪蛋白+50g/L蔗糖+0.35％phytagel；胚成熟萌发成苗培养基为改良MS+500mg/L水解酪蛋白+30g/L白糖+0.7％琼脂。本发明可有效地克服苜蓿高频体胚再生培养中不同品种及基因型限制问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率，提高育种效率。
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公开(公告)号：CN102934613A
公开(公告)日：2013-02-20
申请号：CN201210500422.6
申请日：2012-11-30
申请人： 山东省林业科学研究院 , 江苏农林职业技术学院
IPC分类号： A01H4/00
摘要： 本发明公开了一种利用60Co r射线辐射诱变红叶石楠体细胞育种的方法，是以在愈伤组织增殖培养基上暗培养获得的红叶石楠胚性愈伤组织为辐射材料，用辐照剂量为15-45Gy的60Co r射线辐射对其处理1-2小时，然后将辐射处理后的愈伤组织转到愈伤组织分化培养基上，在温度为25±2℃条件下暗培养30-35天，之后转移到组培室光照条件下培养，愈伤组织绿芽分化率高达79%，由辐射诱变筛选的细胞再生出植株。本发明适宜用于植物新品种选育，为在细胞水平上开展植物体细胞突变体育种提供条件。
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公开(公告)号：CN102972287A
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201210498866.0
申请日：2012-11-30
申请人： 江苏农林职业技术学院 , 山东省林业科学研究院
摘要： 本发明公开了一种红叶石楠体细胞60Co r射线辐射诱变和低温复合处理方法，是将红叶石楠胚性愈伤组织先用60Co r射线辐射处理，然后再置于愈伤组织分化培养基上低温处理，其后暗培养，最后继代到培养基中继续培育至长出红叶石楠组培苗即可移栽至大田种植。本发明建立的方法分化率高达65%，为红叶石楠新品种开发、优质品种的选育奠定了基础。
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公开(公告)号：CN102925481A
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201210501416.2
申请日：2012-11-30
申请人： 山东省林业科学研究院 , 江苏农林职业技术学院
摘要： 本发明公开了一种通过基因枪介导红叶石楠叶片胚性愈伤组织遗传转化方法，是以红叶石楠组培苗叶片为材料，在诱导培养基上诱导胚性愈伤组织，提供转基因的受体材料。采用基因枪轰击法将外源基因导入受体细胞，经过筛选获得转基因植株。本发明方法优选的参数为胚性愈伤组织在添加渗透剂甘露醇浓度为0.3mol/L，添加DNA沉淀剂12.5mol/LCaCl250μl+0.1mol/L亚精胺50μl和基因枪轰击距离采用9cm，真空度大于28inHg，气体压力1100Psi，轰击1次时，转化效率最高。本发明取材不受季节限制，转化效率较高，适合于对农杆菌无效的植物，建立了适合红叶石楠可重复转化的优化技术体系。
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公开(公告)号：CN102124955B
公开(公告)日：2012-11-28
申请号：CN201110033701.1
申请日：2011-01-31
申请人： 江苏农林职业技术学院 , 山东省林业科学研究院
IPC分类号： A01H4/00
摘要： 一种红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养方法，包括以下步骤：（1）建立红叶石楠无菌试管苗再生体系；（2）建立离体叶片体胚和不定芽诱导的高频快繁体系；（3）试管苗生根炼苗移栽。本发明所述的红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养方法通过选择适宜外植体、改良基本培养基及成分、调整培养条件等配套措施，使种子繁殖困难的红叶石楠通过体细胞胚胎发生途径快繁，并使得植株移栽成活率达到95%以上，种苗生长健壮，可有效解决优良种苗种质退化问题，也可为生产上提供大量优质提纯复壮的脱毒苗木，此外，还可为红叶石楠遗传转化或诱变育种选育新品种提供一个理想的受体体系。
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公开(公告)号：CN101703002B
公开(公告)日：2012-06-20
申请号：CN200910213356.2
申请日：2009-11-03
申请人： 江苏农林职业技术学院 , 山东省林业科学研究院
摘要： 本发明公开了一种克服苜蓿品种基因型限制高频体胚再生培养基，包括幼苗生长驯化培养基、体细胞胚胎发生诱导培养基、胚继代形成培养基和胚成熟萌发成苗培养基，幼苗生长驯化培养基为1/2改良MS+20g/L白糖+0.7％琼脂；体细胞胚胎发生诱导培养基为改良SH+6～10mg/L2，4-D+0.2～0.5mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+0.3％phytagel；胚继代形成培养基为改良SH+2～5mg/L 2，4-D+0.2～0.5mg/L6-BA+500mg/L水解酪蛋白+50g/L蔗糖+0.35％phytagel；胚成熟萌发成苗培养基为改良MS+500mg/L水解酪蛋白+30g/L白糖+0.7％琼脂。本发明可有效地克服苜蓿高频体胚再生培养中不同品种及基因型限制问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率，提高育种效率。
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公开(公告)号：CN101926285B
公开(公告)日：2012-05-30
申请号：CN200910213357.7
申请日：2009-11-03
申请人： 江苏农林职业技术学院 , 山东省林业科学研究院
摘要： 本发明公开了一种克服苜蓿品种基因型限制高频体胚再生培养方法，包括(1)选材：苜蓿成熟种子经冲洗、消毒杀菌、干燥后选取无菌苗的上胚轴、下胚轴和再生植株叶片三种外植体；(2)将上述选取的外植体接种于体细胞胚胎发生诱导培养基上培养；(3)将上述经体细胞胚胎发生诱导培养后的外植体接种于胚继代形成培养基上培养；(4)将上述经胚继代形成培养后的外植体接种于胚成熟萌发成苗培养基上培养形成幼苗；(5)壮苗生根培养；(6)再生植株移栽、成活。本发明可有效地克服苜蓿高频体胚再生培养中不同品种及基因型限制问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率，提高育种效率。
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公开(公告)号：CN101926285A
公开(公告)日：2010-12-29
申请号：CN200910213357.7
申请日：2009-11-03
申请人： 江苏农林职业技术学院 , 山东省林业科学研究院
摘要： 本发明公开了一种克服苜蓿品种基因型限制高频体胚再生培养方法，包括(1)选材：苜蓿成熟种子经冲洗、消毒杀菌、干燥后选取无菌苗的上胚轴、下胚轴和再生植株叶片三种外植体；(2)将上述选取的外植体接种于体细胞胚胎发生诱导培养基上培养；(3)将上述经体细胞胚胎发生诱导培养后的外植体接种于胚继代形成培养基上培养；(4)将上述经胚继代形成培养后的外植体接种于胚成熟萌发成苗培养基上培养形成幼苗；(5)壮苗生根培养；(6)再生植株移栽、成活。本发明可有效地克服苜蓿高频体胚再生培养中不同品种及基因型限制问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率，提高育种效率。
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公开(公告)号：CN102124954B
公开(公告)日：2012-11-28
申请号：CN201110033598.0
申请日：2011-01-31
申请人： 江苏农林职业技术学院 , 山东省林业科学研究院
摘要： 一种红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养基包括芽启动培养基、试管苗增殖培养基、第一诱导体胚和/或不定芽形成培养基、第二诱导体胚和/或不定芽形成培养基、第三诱导体胚和/或不定芽形成培养基、第一体胚和/或不定芽生长与分化培养基、第二体胚和/或不定芽生长与分化培养基和壮苗生根培养基。本发明所述的红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养基通过改良基本培养基及成分、调整培养条件，使繁殖困难的红叶石楠通过体细胞胚发生途径快繁，植株移栽成活率达到95%以上，种苗生长健壮，可有效解决优良种苗种质退化问题，也可为生产上提供大量优质提纯复壮的脱毒苗木，还可为红叶石楠遗传转化或诱变育种选育新品种提供一个理想的受体体系。
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公开(公告)号：CN102124955A
公开(公告)日：2011-07-20
申请号：CN201110033701.1
申请日：2011-01-31
申请人： 江苏农林职业技术学院 , 山东省林业科学研究院
IPC分类号： A01H4/00
摘要： 一种红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养方法，包括以下步骤：（1）建立红叶石楠无菌试管苗再生体系；（2）建立离体叶片体胚和不定芽诱导的高频快繁体系；（3）试管苗生根炼苗移栽。本发明所述的红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养方法通过选择适宜外植体、改良基本培养基及成分、调整培养条件等配套措施，使种子繁殖困难的红叶石楠通过体细胞胚胎发生途径快繁，并使得植株移栽成活率达到95%以上，种苗生长健壮，可有效解决优良种苗种质退化问题，也可为生产上提供大量优质提纯复壮的脱毒苗木，此外，还可为红叶石楠遗传转化或诱变育种选育新品种提供一个理想的受体体系。
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