公开(公告)号：CN103665152A

公开(公告)日：2014-03-26

申请号：CN201310636895.3

申请日：2013-12-02

申请人： 山西农业大学

发明人： 段智变 ,  孙耀贵 ,  程志学 ,  员世宇 ,  詹俊杰 ,  杨妍丽 ,  李小茜

IPC分类号： C07K16/08 ,  C12N15/63 ,  A61K39/42 ,  A61P31/20

摘要： 本发明公开了一种犬细小病毒单域抗体及其制备方法和应用，所述犬细小病毒单域抗体具有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列，是以犬细小病毒灭活疫苗免疫羊驼，取外周血得到羊驼抗犬细小病毒血清；提取外周血中RNA，反转录生成cDNA；特异引物扩增纯化VHH片段；将VHH片段与噬菌粒载体连接并转化TG1，构建犬细小病毒单域抗体库；利用犬细小病毒结构蛋白VP2富集所述抗体库，导入表达菌株E.coilHB2151，IPTG诱导具有生物活性的犬细小病毒单域抗体VHH表达。本发明制备的犬细小病毒单域抗体检测活性15µg/ml，检测灵敏度250ng/ml，可作为药物应用于犬细小病毒病犬的治疗中。

公开(公告)号：CN103665152B

公开(公告)日：2016-01-20

申请号：CN201310636895.3

申请日：2013-12-02

申请人： 山西农业大学

发明人： 段智变 ,  孙耀贵 ,  程志学 ,  员世宇 ,  詹俊杰 ,  杨妍丽 ,  李小茜

IPC分类号： C07K16/08 ,  C12N15/63 ,  A61K39/42 ,  A61P31/20

摘要： 本发明公开了一种犬细小病毒单域抗体及其制备方法和应用，所述犬细小病毒单域抗体具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，是以犬细小病毒灭活疫苗免疫羊驼，取外周血得到羊驼抗犬细小病毒血清；提取外周血中RNA，反转录生成cDNA；特异引物扩增纯化VHH片段；将VHH片段与噬菌粒载体连接并转化TG1，构建犬细小病毒单域抗体库；利用犬细小病毒结构蛋白VP2富集所述抗体库，导入表达菌株E.coil HB2151，IPTG诱导具有生物活性的犬细小病毒单域抗体VHH表达。本发明制备的犬细小病毒单域抗体检测活性15μg/ml，检测灵敏度250ng/ml，可作为药物应用于犬细小病毒病犬的治疗中。