公开(公告)号：CN118497423A

公开(公告)日：2024-08-16

申请号：CN202410743339.4

申请日：2024-06-11

Applicant: 广西农业职业技术大学

Inventor： 潘艳 ,  谢江 ,  李凤梅 ,  陈集成 ,  王小玲 ,  莫锋 ,  覃振斌 ,  周辰瑜 ,  覃梓轩 ,  农彩璇

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种快速检测BEFV和MRV的方法，包括以下步骤：包括以下步骤：步骤(1)：分别取BEFV、MRV组织样本，分别将得到的BEFV和MRV基因组cDNA为模板；步骤(2)：根据1对BEFV特异性引物和一对MRV特异性引物进行扩增；步骤(3)：对反应体系进行优化，并加入PCR扩增产物继续实验，实验结束后，应用产物条带进行扩增产物检测并判断结果；步骤(4)：将得到的2种病毒基因组等体积混合，作为二重PCR反应的模板，对反应体系进行优化，使用引物对混合病毒模板进行二重PCR扩增，反应结束后，使用凝胶成像系统并根据产物条带判断结果。通过本发明的方法具有敏感性高、特异性强、快速准确和容易操作等优点，为快速诊断BEFV和MRV提供了理论依据和技术支持。

公开(公告)号：CN118562984A

公开(公告)日：2024-08-30

申请号：CN202410713286.1

申请日：2024-06-04

Applicant: 广西农业职业技术大学

Inventor： 潘艳 ,  谢江 ,  李凤梅 ,  陈集成 ,  王小玲 ,  莫锋 ,  覃振斌 ,  周辰瑜 ,  覃梓轩 ,  农彩璇

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种羊溶血性曼氏杆菌LAMP方法及应用，该检测方法包括菌种的培养、细菌基因组DNA的提取、LAMP引物的设计与合成、阳性质粒的构建、质粒的提取、LAMP反应体系建立以及采用LAMP检测方法，所述的LAMP检测方法是采用特异性检测、灵敏度检测和临床样品检测的方法，反应温度为63℃、反应在20‑35min间出现扩增，引物包括外引物、内引物、环引物和上下游引物，所述的外引物是F3和B3；所述的内引物是FIP和BIP；所述的环引物是LF和LB；所述的上下游引物是3F和13R；本发明建立了一种快速、简便的羊溶血曼氏杆菌LAMP方法，可用于临床检测。

公开(公告)号：CN119859693A

公开(公告)日：2025-04-22

申请号：CN202510010172.5

申请日：2025-01-03

Applicant: 广西农业职业技术大学

Inventor： 潘艳 ,  覃振斌 ,  王小玲 ,  谢江 ,  李凤梅 ,  董覃婷 ,  谢飞 ,  覃梓轩 ,  农彩璇

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种β‑内酰胺酶耐药基因的检测方法，包括如下步骤：细菌质粒的提取；从GenBank中下载TEM‑1与ampC的序列，利用Megalign对核苷酸序列进行比较，找到基因保守区域，利用Primer explore V5设计引物；以提取的细菌全基因DNA和细菌质粒DNA为模板，加入PCR反应体系各反应物，并按照对应扩增物所需的反应温度进行PCR扩增。本发明通过对牛源大肠杆菌作质粒介导β‑内酰胺耐药性检测和分析发现，对于全基因组的TEM‑1型、ampC型基因的耐药检出率，右江为76％和95％(n＝38)；玉林为98％和89％(n＝44)，而质粒DNA的耐药检出率均为100％。本发明为进一步防控牛源细菌感染性疾病以及合理使用抗菌药物提供了科学依据，同时也为指导畜牧场用药和兽医临床的科学用药提供了有价值的数据支持和理论参考。