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公开(公告)号:CN104946742B
公开(公告)日:2017-12-22
申请号:CN201510269108.5
申请日:2015-05-22
申请人: 广西壮族自治区农业科学院经济作物研究所
摘要: 本发明公开了一种基于单引物扩增反应的DNA分子标记方法,属生物技术领域。包括以下步骤:设计并合成单引物,提取样品基因组DNA作为模板,利用单引物和样品DNA模板在常规PCR反应体系和反应程序下进行PCR扩增,扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳分离后,检测单引物在基因组基因外显子区域中的两个结合位点间的多态性;其中单引物的序列长度为17bp,5’端的6个碱基填充序列为富含AT碱基的限制性内切酶酶切位点序列,中间核心区序列是由8个GC碱基随机组成,最后3’端是3个选择性碱基。本发明中的引物通用性好,本发明的DNA分子标记方法具有操作简单、稳定性高、重复性好、数量丰富、特异性高、多态性高、结果可靠等优点。
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公开(公告)号:CN106906289A
公开(公告)日:2017-06-30
申请号:CN201710184205.3
申请日:2017-03-24
申请人: 广西壮族自治区农业科学院经济作物研究所
发明人: 熊发前 , 刘俊仙 , 唐荣华 , 贺梁琼 , 韩柱强 , 蒋菁 , 钟瑞春 , 唐秀梅 , 杨行海 , 严华兵 , 吴建明 , 陈华 , 黄志鹏 , 吴海宁 , 周慧文 , 庄伟建 , 高轶静 , 丘立杭 , 罗赛云 , 史卫东 , 邹成林
CPC分类号: C12Q1/6895 , C12Q2600/156
摘要: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种可进行多物种分子标记的单引物及其标记方法,该引物根据真核生物基因组中基因内含子区域或调控区域富含AT设计,引物序列长度为17bp,其中,填充序列为富含GC碱基的任意序列,核心区序列由AT碱基随机排列组成,选择性碱基序列为任意碱基序列,引物可以在真核生物间通用,大大减少了引物的合成费用,也大大地提高了引物的利用率;同时,本发明的DNA分子标记方法是基于PCR反应的,多态性始于内含子序列变异及插入/缺失,该方法简单高效、多态性高、扩增条带数量丰富、结果可靠、条带易于分离及可测序等。
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公开(公告)号:CN104946742A
公开(公告)日:2015-09-30
申请号:CN201510269108.5
申请日:2015-05-22
申请人: 广西壮族自治区农业科学院经济作物研究所
CPC分类号: C12Q1/6876 , C12Q2600/156
摘要: 本发明公开了一种基于单引物扩增反应的DNA分子标记方法,属生物技术领域。包括以下步骤:设计并合成单引物,提取样品基因组DNA作为模板,利用单引物和样品DNA模板在常规PCR反应体系和反应程序下进行PCR扩增,扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳分离后,检测单引物在基因组基因外显子区域中的两个结合位点间的多态性;其中单引物的序列长度为17bp,5’端的6个碱基填充序列为富含AT碱基的限制性内切酶酶切位点序列,中间核心区序列是由8个GC碱基随机组成,最后3’端是3个选择性碱基。本发明中的引物通用性好,本发明的DNA分子标记方法具有操作简单、稳定性高、重复性好、数量丰富、特异性高、多态性高、结果可靠等优点。
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公开(公告)号:CN106906289B
公开(公告)日:2017-12-19
申请号:CN201710184205.3
申请日:2017-03-24
申请人: 广西壮族自治区农业科学院经济作物研究所
发明人: 熊发前 , 刘俊仙 , 唐荣华 , 贺梁琼 , 韩柱强 , 蒋菁 , 钟瑞春 , 唐秀梅 , 杨行海 , 严华兵 , 吴建明 , 陈华 , 黄志鹏 , 吴海宁 , 周慧文 , 庄伟建 , 高轶静 , 丘立杭 , 罗赛云 , 史卫东 , 邹成林
摘要: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种可进行多物种分子标记的单引物及其标记方法,该引物根据真核生物基因组中基因内含子区域或调控区域富含AT设计,引物序列长度为17bp,其中,填充序列为富含GC碱基的任意序列,核心区序列由AT碱基随机排列组成,选择性碱基序列为任意碱基序列,引物可以在真核生物间通用,大大减少了引物的合成费用,也大大地提高了引物的利用率;同时,本发明的DNA分子标记方法是基于PCR反应的,多态性始于内含子序列变异及插入/缺失,该方法简单高效、多态性高、扩增条带数量丰富、结果可靠、条带易于分离及可测序等。
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