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公开(公告)号：CN116949201A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310571730.6
申请日：2023-05-22
申请人： 广西工业职业技术学院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , G16B20/20 , G16B25/20 , C12R1/645
摘要： 本发明提供一种用于重伞灵芝的特异性分子鉴别方法，属于分子生物学技术领域，所述方法包括如下步骤：获取重伞灵芝保守核苷酸序列分子标记物的特异性引物组合F/R，提取待测灵芝样品DNA为模板，分别以特异性引物组合F/R进行PCR扩增反应，反应产物经琼脂糖凝胶电泳检测，出现F/R引物扩增产物特异性条带的样品为灵芝属重伞灵芝。本发明提供1组分子标记物，即重伞灵芝的特异性核苷酸序列，利用该特异性核苷酸序列能够将重伞灵芝与灵芝属其他种区分开来，有利于重伞灵芝的鉴定、保护和开发。
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公开(公告)号：CN114875045B
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202210424684.2
申请日：2022-04-21
申请人： 广西工业职业技术学院
摘要： 本发明提供一种产L‑乳酸的鼠李糖乳杆菌基因工程菌的构建方法，属于基因工程分子改造技术领域，本发明以出发菌株的全基因组序列信息为参考，采用非复制型质粒pK18mobsacB设计鼠李糖乳杆菌Rex基因的敲除方法，构建了鼠李糖乳杆菌Rex基因缺失工程菌株，提高了菌株L‑乳酸的表达产量。另外，利用该方法构建的同源双交换基因工程菌株没有外源基因的导入，适宜于食品安全乳酸菌的高性能遗传改造。工程菌株L.rhamnosus ATCC 11443‑ΔldhDldhL‑ΔRex基因组上Rex基因的缺失，导致基因的不同表达，提高了菌株的生长速率和葡萄糖利用速率，与出发菌株相比其发酵产物L‑乳酸的最大发酵速率提高了46.90％，糖酸转化率提高了15.76％。另外，该工程菌株基因组没有导入外源DNA，符合食品、药品生产的安全要求，也便于菌株的进一步工业改造和升级。
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公开(公告)号：CN115584356A
公开(公告)日：2023-01-10
申请号：CN202211321202.7
申请日：2022-10-26
申请人： 广西工业职业技术学院
摘要： 本发明公开了涉及乳酸菌发酵技术领域的一种乳酸菌有氧高密度发酵生产乳酸的方法，包括如下步骤：步骤一，选用兼性厌氧型乳酸菌为生产菌株，将选取的乳酸菌分为若干不同批次接种至菌种培养基中进行活化培养，培养温度为37℃；步骤二，采取通气的方式进行有氧培养，耦联活性氧抑制剂和膜分离技术进行分批补料发酵；步骤三，在每批次乳酸菌达到对数生长期间的8‑30小时内，按照不同时间段进行不同操作；步骤四，膜过滤发酵2‑3批次，每批次膜过滤后再经补料继续发酵；步骤五，发酵结束后发酵液和发酵过程的滤过液用以乳酸的生产。本发明从降低活性氧毒害作用和代谢产物乳酸两方面入手，提高菌体密度和细胞活性降低代谢产物乳酸的反馈抑制作用。
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公开(公告)号：CN114875079A
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202210424685.7
申请日：2022-04-21
申请人： 广西工业职业技术学院
摘要： 本发明提供一种产高光学纯L‑乳酸的鼠李糖乳杆菌基因工程菌的构建方法，属于基因工程分子改造技术领域，以出发菌株的全基因组序列信息为参考，采用非复制型质粒pK18mobsacB设计鼠李糖乳杆菌的同步基因敲除和基因插入方法，提高基因工程菌株的改造效率，该方法最终构建得到的同源双交换基因工程菌株没有外源基因的导入，在无痕敲除目标基因的同时可以按照设计要求增加需要表达的基因的拷贝数，适宜于食品安全乳酸菌的高性能遗传改造。构建的工程菌株基因组缺失了ldhD基因并增加1个ldhL基因，发酵产物L‑乳酸的光学纯度显著提高，达到99.54％，另外，该工程菌株基因组没有引入外源的DNA序列，符合食品、药品生产的安全要求，便于菌株的进一步工业改造和升级。
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公开(公告)号：CN114875045A
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202210424684.2
申请日：2022-04-21
申请人： 广西工业职业技术学院
摘要： 本发明提供一种高产L‑乳酸的鼠李糖乳杆菌基因工程菌的构建方法，属于基因工程分子改造技术领域，本发明以出发菌株的全基因组序列信息为参考，采用非复制型质粒pK18mobsacB设计鼠李糖乳杆菌Rex基因的敲除方法，构建了鼠李糖乳杆菌Rex基因缺失工程菌株，提高了菌株L‑乳酸的表达产量。另外，利用该方法构建的同源双交换基因工程菌株没有外源基因的导入，适宜于食品安全乳酸菌的高性能遗传改造。工程菌株L.rhamnosus ATCC11443‑Δ1dhDldhL‑ΔRex基因组上Rex基因的缺失，导致基因的不同表达，提高了菌株的生长速率和葡萄糖利用速率，与出发菌株相比其发酵产物L‑乳酸的最大发酵速率提高了46.90％，糖酸转化率提高了15.76％。另外，该工程菌株基因组没有导入外源DNA，符合食品、药品生产的安全要求，也便于菌株的进一步工业改造和升级。
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