一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法

    公开(公告)号:CN106349348A

    公开(公告)日:2017-01-25

    申请号:CN201610937104.4

    申请日:2016-11-01

    申请人: 扬州大学

    IPC分类号: C07K14/01 C12N15/70 C12N15/11

    摘要: 本发明提供了一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法。该方法基于重组酶ExnaseTM II将线性化的pGEX-6p-1载体与GyV7病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应,直接重组克隆技术;并转化到大肠杆菌,实现VP3蛋白表达;其中,用于PCR扩增GyV7病毒VP3基因的上、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。该方法操作简单、快速高效,获得的GyV7病毒VP3表达及纯化的蛋白,可直接提供VP3蛋白作为GyV7诊断抗原;作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体;为开展GyV7流行病学调查提供有效诊断试剂;并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。

    源于鸡传染性贫血病毒VP1-aa 23-43多肽作为高效细胞穿膜肽的应用

    公开(公告)号:CN106995487B

    公开(公告)日:2019-12-03

    申请号:CN201710248386.1

    申请日:2017-04-17

    申请人: 扬州大学

    IPC分类号: C07K14/01

    摘要: 本发明涉及一种源于鸡传染性贫血病毒(Chicken anemia virus,CAV)VP1‑aa 23‑43多肽作为高效细胞穿膜肽的应用。所述VP1‑aa 23‑43多肽序列如SEQ ID NO.2所示。该多肽可以携带FITC在30min内进入293T细胞、HCT‑116细胞、3T3细胞、MDCK细胞、MSB1细胞,而且穿膜效率与穿膜肽浓度呈正相关性,关键特点其可高效进入悬浮培养细胞。结合激光共聚焦显微镜和流式细胞术结果显示,鸡传染性贫血病毒VP1‑aa 23‑43多肽在10μM时具有比TAT短肽的穿膜效率高2倍多。