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公开(公告)号：CN110646614B
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN201910636369.4
申请日：2019-07-15
申请人： 新乡学院
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/535 , G01N33/543
摘要： IBDV抗体的ELISA试剂盒和测试方法、有效抗体效价确定方法，ELISA试剂盒包括，1）包被IBDV抗原的酶标板；2）1:3000稀释的HRP标记的羊抗鸡Ig Y；其中，所述包被IBDV抗原的酶标板，通过IBDV抗原浓度稀释到10ng/孔后，包被上述稀释液到反应板相应孔后制作而成，IBDV抗原为由杆状病毒表达系统制备的rVP2蛋白，检测结果是依据ELISA检测方法的S/P值进行判定。依据ELISA检测方法的S/P值检测结果是阳性时，检测结果是阳性时，说明有效抗体水平高，能够中和IBDV，不需要重新免疫疫苗；检测结果S/P值阴性时，说明抗体水平较低不具有保护力，容易感染病毒，需要重新进行疫苗的免疫。因此，本发明建立的ELISA试剂盒抗体阳性检出率高，并且能够指导生产上疫苗的免疫，减少经济损失。
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公开(公告)号：CN112745384A
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN202110052246.3
申请日：2021-01-15
申请人： 新乡学院
IPC分类号： C07K14/705 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61K39/187 , A61P31/14 , A61P31/20
摘要： 本发明涉及一种猪PD‑L14QN‑GF表位多肽，其氨基酸序列为QDAQINECLIGYGGASFPRITLKVN。本发明的多肽PD‑L14QN‑GF具有与PD‑L1蛋白上对应序列高度一致的空间结构，确保改良后多肽PD‑L14QN‑GF具有更有效的受体识别能力。本发明将两个关键亲水氨基酸突变为结构相近的疏水氨基酸，通过增强疏水作用力增加了与PD‑1蛋白的亲和力，从而发挥出更显著的免疫效应。在PBMC细胞增殖实验中，本发明的表位多肽PD‑L14QN‑GF细胞增殖百分比为42.4％，能显著减缓PRRSV增殖效率，下调PD‑1的表达，能显著的上调IFN‑γ及IL‑2基因的表达与分泌。在体内实验中，改良的多肽PD‑L14QN‑GF能作为免疫佐剂显著提升PCV2疫苗免疫后的抗体保护率，相对于正常免疫组升高近2倍。
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公开(公告)号：CN112679509A
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN202110080548.1
申请日：2021-01-21
申请人： 新乡学院
IPC分类号： C07D487/06 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , G01N33/53 , G01N33/543 , G01N33/577 , G01N33/58
摘要： 本发明公开了一种齐帕特罗半抗原、完全抗原及单克隆抗体的制备和应用，包括齐帕特罗半抗原、完全抗原及单克隆抗体及其的制备方法，还包括齐帕特罗单克隆抗体在制备用于检测齐帕特罗残留的试剂盒或胶体金层析试纸条中的应用。本发明制备的完全抗原具有很好的免疫原性，用以制备高效稳定的单克隆抗体，本发明将单抗的高度特异性和方法的高度敏感性有机地结合起来，达到抗原快速检测，适宜于短时间内检测大量样品，能够用于样品中齐帕特罗残留的检测。
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公开(公告)号：CN112379104A
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN202011240714.1
申请日：2020-11-09
申请人： 新乡学院
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
摘要： 本发明公开了一种PRRSV的IFA抗体检测方法，属于分子生物学检测技术领域。本发明公开的一种PRRSV的IFA抗体检测方法，包括接毒、铺板、固定、加一抗、加二抗、结果观察。本发明PRRSV的IFA抗体检测方法，细胞反应板可提前制备，在‑20℃长期保存；反应结果可用荧光显微镜进行观察；具有特异性强、敏感性高、操作简单、可长期保存的特点；本发明利用全病毒进行抗体检测，能够真实反应动物的抗体水平。
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公开(公告)号：CN111718397A
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN202010427060.7
申请日：2020-05-19
申请人： 新乡学院
摘要： 基于鼠源天然单链抗体库筛选识别CIM-ScFv抗体的多肽序列及其应用，多肽序列的重链可变区的氨基酸序列为如SEQ ID NO.1所示序列：ARWTVITYAMDY，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示序列：QNGHSFPYT，多肽序列在西马特罗抗原鉴定中的应用。本发明对获得的单链抗体进行质量评价，四轮筛选中噬菌体回收率一直呈增加的趋势，说明随着淘选次数的增加，特异性的噬菌体抗体得到了有效富，与西马特罗抗原进行亲和力鉴定，亲和力较好，可应用于西马特罗抗原的快速检测试剂的生产中，丰富西马特罗等β2型受体激动剂的残留检测方法，为进一步制备西马特罗的抗体和抗体进化奠定物质基础，为西马特罗等非法添加物的控制使用提供参考，以满足公众对无残留动物肉制品的要求。
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公开(公告)号：CN107056944B
公开(公告)日：2020-05-29
申请号：CN201710049240.4
申请日：2017-01-20
申请人： 新乡学院
IPC分类号： C07K16/28 , C12N5/20 , G01N33/68 , G01N33/577 , A61K39/395 , A61P37/06 , A61P31/12
摘要： 本发明公开了一株鼠抗猪PD‑1单克隆抗体，所述的单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO：C2016196的杂交瘤细胞株2B5分泌，所述的杂交瘤细胞株2B5保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏日期为2016年11月30日。本发明的单抗为Ig G1类免疫球蛋白，且具有良好的效价。通过ELISA试验鉴定，结果呈阳性反应，初步证明该株单抗是抗PD‑1胞外区蛋白的，再用交叉试验证明该株单抗与pET32a载体蛋白和无关蛋白无交叉反应，进一步证明所筛出的杂交瘤是特异的，用Western‑blot鉴定阳性杂交瘤分泌单克隆抗体与重组蛋白发生特异性反应，最后用流式细胞术检测证实杂交瘤分泌单克隆抗体可以与外周血单核细胞(PBMC)上PD‑1蛋白有效结合。
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公开(公告)号：CN111154000A
公开(公告)日：2020-05-15
申请号：CN202010047965.1
申请日：2020-01-16
申请人： 新乡学院
IPC分类号： C07K16/44 , C07K14/77 , G01N33/577 , C12N15/06 , G01N33/535
摘要： 本发明提供一种抗西马特罗单克隆抗体及其应用，包括一种制备抗西马特罗单克隆抗体的方法，还包括制备西马特罗抗原工作液和制备西马特罗单克隆抗体两个内容，还提供抗西马特罗单克隆抗体的具体应用，包括制备ELISA试剂盒或胶体金层析试纸条。本发明制备的完全抗原具有很好的免疫原性，制备高效稳定的单克隆抗体，获得通过检测系列稀释的标准溶液将单抗的高度特异性和方法的高度敏感性有机地结合起来，达到抗原快速检测，适宜于短时间内检测大量样品，为样品中西马特罗残留的检测奠定了基础。
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公开(公告)号：CN110646614A
公开(公告)日：2020-01-03
申请号：CN201910636369.4
申请日：2019-07-15
申请人： 新乡学院
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/535 , G01N33/543
摘要： IBDV抗体的ELISA试剂盒和测试方法、有效抗体效价确定方法，ELISA试剂盒包括，1）包被IBDV抗原的酶标板；2）1:3000稀释的HRP标记的羊抗鸡Ig Y；其中，所述包被IBDV抗原的酶标板，通过IBDV抗原浓度稀释到10ng/孔后，包被上述稀释液到反应板相应孔后制作而成，IBDV抗原为由杆状病毒表达系统制备的rVP2蛋白，检测结果是依据ELISA检测方法的S/P值进行判定。依据ELISA检测方法的S/P值检测结果是阳性时，检测结果是阳性时，说明有效抗体水平高，能够中和IBDV，不需要重新免疫疫苗；检测结果S/P值阴性时，说明抗体水平较低不具有保护力，容易感染病毒，需要重新进行疫苗的免疫。因此，本发明建立的ELISA试剂盒抗体阳性检出率高，并且能够指导生产上疫苗的免疫，减少经济损失。
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公开(公告)号：CN108659101A
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201810308336.2
申请日：2018-04-09
申请人： 新乡学院
IPC分类号： C07K7/08
摘要： 本发明公开了一种鸡新城疫病毒抗原表位多肽制备方法，属于抗原表位多肽的筛选技术领域。本发明的技术方案要点为：一种鸡新城疫病毒抗原表位多肽制备方法，其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。采用鸡新城疫病毒表位多肽P25与新城疫病毒临床抗体反应，显示出较高的灵敏性和特异性，与其它家族疾病如IBDV和AIV抗体无交叉反应性，此外，多肽合成非常方便，不需要蛋白的纯化过程，提高了检测抗体过程中的稳定性。
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公开(公告)号：CN107056944A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201710049240.4
申请日：2017-01-20
申请人： 新乡学院
IPC分类号： C07K16/28 , C12N5/20 , G01N33/68 , G01N33/577 , A61K39/395 , A61P37/06 , A61P31/12
摘要： 本发明公开了一株鼠抗猪PD‑1单克隆抗体，所述的单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO：C2016196的杂交瘤细胞株2B5分泌，所述的杂交瘤细胞株2B5保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏日期为2016年11月30日。本发明的单抗为Ig G1类免疫球蛋白，且具有良好的效价。通过ELISA试验鉴定，结果呈阳性反应，初步证明该株单抗是抗PD‑1胞外区蛋白的，再用交叉试验证明该株单抗与pET32a载体蛋白和无关蛋白无交叉反应，进一步证明所筛出的杂交瘤是特异的，用Western‑blot鉴定阳性杂交瘤分泌单克隆抗体与重组蛋白发生特异性反应，最后用流式细胞术检测证实杂交瘤分泌单克隆抗体可以与外周血单核细胞(PBMC)上PD‑1蛋白有效结合。
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