公开(公告)号：CN119432902A

公开(公告)日：2025-02-14

申请号：CN202411539441.9

申请日：2024-10-31

Applicant: 新疆农业大学

Inventor： 雷建峰 ,  代培红 ,  张佳俊 ,  刘晓东 ,  李月

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  A01H5/00 ,  A01H6/60

Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种棉花中植物病毒介导的ABE碱基编辑系统的建立与应用。本发明以CLCrV作为递送媒介，nCas9‑TadA7.10‑OE棉花作为转化受体，构建基于CLCrV介导的ABE碱基编辑系统。基因表达量结果显示nCas9在不同转基因株系中稳定遗传表达。将构建好的不同CLCrV‑ABEs病毒载体接种nC as9‑TadA7.10‑OE棉花并进行突变检测，深度测序结果表明CLCrV‑AtU6‑26::sgGhPEBP‑ABE能有效引起GhPEBP基因靶位点A碱基向G碱基的转换，编辑效率为6.18％～29.26％。同时，在GhPEBP发生碱基编辑的植株中进行脱靶检测，结果显示并没有在预测的潜在脱靶位点上检测到脱靶现象，表明CLCrV介导的ABE碱基编辑系统具有一定的基因编辑特异性。棉花中植物病毒介导的ABE碱基编辑系统的建立为在棉花中筛选高效sgRNAs以及棉花分子设计育种提供了有利技术工具。