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公开(公告)号：CN110684782B
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN201911037753.9
申请日：2019-10-29
发明人： 夏俊 , 汪萍 , 苗书魁 , 杜玮 , 马文戈 , 黄炯 , 金映红 , 沙吾尔江·阿不都力艾拉 , 赵洁雅 , 王文 , 马晓艳 , 席瑞 , 陆桂丽 , 魏玉荣 , 米晓云 , 沙依兰·卡依扎 , 沈辰峰 , 参都哈西·加吾丁 , 徐猛 , 木克日木·帕尔哈提
IPC分类号： C12N15/45 , C12N15/85 , A61K39/155 , A61P31/14
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，具体的涉及一种密码子优化的小反刍兽疫病毒F基因核酸疫苗。该密码子优化基因序列兼顾了哺乳动物细胞密码子使用偏好，序列如SEQ ID NO.2所示。所涉及的小反刍兽疫病毒F基因核酸疫苗，在剔除F基因5′端信号肽后，将剩余序列经密码子优化，在5′端连接乙型脑炎病毒信号肽序列，最后将该序列插入真核表达载体中。该核酸疫苗在免疫小鼠后有效地刺激了免疫系统，产生了中和抗体，体现了良好的免疫原性。
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公开(公告)号：CN110684782A
公开(公告)日：2020-01-14
申请号：CN201911037753.9
申请日：2019-10-29
发明人： 夏俊 , 汪萍 , 苗书魁 , 杜玮 , 马文戈 , 黄炯 , 金映红 , 沙吾尔江·阿不都力艾拉 , 赵洁雅 , 王文 , 马晓艳 , 席瑞 , 陆桂丽 , 魏玉荣 , 米晓云 , 沙依兰·卡依扎 , 沈辰峰 , 参都哈西·加吾丁 , 徐猛 , 木克日木·帕尔哈提
IPC分类号： C12N15/45 , C12N15/85 , A61K39/155 , A61P31/14
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，具体的涉及一种密码子优化的小反刍兽疫病毒F基因核酸疫苗。该密码子优化基因序列兼顾了哺乳动物细胞密码子使用偏好，序列如SEQ ID NO.2所示。所涉及的小反刍兽疫病毒F基因核酸疫苗，在剔除F基因5′端信号肽后，将剩余序列经密码子优化，在5′端连接乙型脑炎病毒信号肽序列，最后将该序列插入真核表达载体中。该核酸疫苗在免疫小鼠后有效地刺激了免疫系统，产生了中和抗体，体现了良好的免疫原性。
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公开(公告)号：CN108957012A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201811046536.1
申请日：2018-09-08
IPC分类号： G01N33/68
CPC分类号： G01N33/68
摘要： 本发明公开了一种3E6单抗腹水包被ELISA板的试剂盒的建立方法，包括以下步骤：应用方阵法确定3E6单抗腹水包被ELISA板浓度，37℃ 2小时，弃液体PBST洗3次；5%的脱脂奶粉300ul 37℃ 1小时，PBST洗3次；加小反刍兽疫Nigera75/1细胞毒（1:8），37℃ 1小时，PBST洗3次；加兔抗V蛋白血清1:100，同时设VERO细胞上清做对照，37℃ 45min，PBST洗3次；加兔二抗稀释浓度1:10000，100ul/孔，25℃ 45min，PBST洗3次；加TMB显色液100ul/孔，25℃ 3‑5min；2M硫酸终止液100ul/孔，450nm测ELISA OD值。
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公开(公告)号：CN110850092B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN201911146139.6
申请日：2019-11-17
IPC分类号： G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558
摘要： 小反刍兽疫抗体和抗原胶体金检测方法，包括；步骤一：制备培养基和溶液：步骤二：样品垫的制备：步骤三：胶体金的制备：步骤四：重组蛋白pGEX‑4T‑V、Nig75/1浓缩病毒和三株单抗的金标记：步骤五：反应膜的制备；步骤六：PPR双抗体和双抗原夹心胶体金试纸条的组装、分切和包装：步骤七：PPR双抗体夹心胶体金试纸条样品的检测：步骤八：PPR双抗原夹心胶体金试纸条样品的检测：步骤九：PPR双抗原夹心胶体金试纸与商品化试剂盒对样品检测的比对。本发明应用金标PPRV V蛋白、Nig 75/1疫苗毒和三株单抗建立的双抗体和双抗原胶体金检测方法，方法操作简单、快速，无需任何仪器，适用于大量临床样品的检测。
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公开(公告)号：CN108642068A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810356227.8
申请日：2018-04-19
IPC分类号： C12N15/42 , C12Q1/6869 , C12N15/11 , C12N7/00 , C12N7/04 , A61K39/135 , A61P31/14
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，是一种口蹄疫病毒人工致弱株O/Akesu/58 CE39B全基因组序列、引物及应用，该口蹄疫病毒人工致弱株O/Akesu/58 CE39B全基因组序列，如SEQ ID No.1所示。本发明首次公开口蹄疫病毒人工致弱株O/Akesu/58 CE39B全基因组序列，其有助于病毒的反向遗传学研究，为进一步研究FMDV在细胞中的增殖机制、病毒滴度、致病机理和FMDV标记疫苗奠定基础，有利于研究病毒的进化、致病性及分子流行病学等；并且口蹄疫病毒人工致弱株O/Akesu/58 CE39B拯救病毒具有良好的安全性和有效性，有望作为下一代基因工程疫苗用于口蹄疫的预防与控制，具有广阔的研究与工业化前景。
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公开(公告)号：CN108642068B
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN201810356227.8
申请日：2018-04-19
IPC分类号： C12N15/42 , C12Q1/6869 , C12N15/11 , C12N7/00 , C12N7/04 , A61K39/135 , A61P31/14
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，是一种口蹄疫病毒人工致弱株O/Akesu/58 CE39B全基因组序列、引物及应用，该口蹄疫病毒人工致弱株O/Akesu/58 CE39B全基因组序列，如SEQ ID No.1所示。本发明首次公开口蹄疫病毒人工致弱株O/Akesu/58 CE39B全基因组序列，其有助于病毒的反向遗传学研究，为进一步研究FMDV在细胞中的增殖机制、病毒滴度、致病机理和FMDV标记疫苗奠定基础，有利于研究病毒的进化、致病性及分子流行病学等；并且口蹄疫病毒人工致弱株O/Akesu/58 CE39B拯救病毒具有良好的安全性和有效性，有望作为下一代基因工程疫苗用于口蹄疫的预防与控制，具有广阔的研究与工业化前景。
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公开(公告)号：CN111172118A
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN202010220553.3
申请日：2020-03-25
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
摘要： 本申请涉及一种抗A型口蹄疫抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株和抗A型口蹄疫抗原单克隆抗体及其应用。该抗A型口蹄疫抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株，分类命名为杂交瘤细胞株XJ14-2F7，已于2017年09月25日保藏于中国典型培养物保藏中心(China Center for Type Culture Collection，简称CCTCC)，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：C201790。本申请对A型口蹄疫全病毒抗原进行处理，免疫Balb/c小鼠，获得分泌抗A型口蹄疫全病毒抗原的脾淋巴细胞，将其与SP2/0细胞融合获得抗A型口蹄疫抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株XJ14-2F7，从而获得抗A型口蹄疫抗原单克隆抗体，该抗体作为诊断试剂，可灵敏的检测出A型口蹄疫全病毒抗原的感染。从而区分疫苗感染和自然感染，为大范围普查检测试剂盒的制备提供必要条件。
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公开(公告)号：CN110850092A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201911146139.6
申请日：2019-11-17
IPC分类号： G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558
摘要： 小反刍兽疫抗体和抗原胶体金检测方法，包括；步骤一：制备培养基和溶液：步骤二：样品垫的制备：步骤三：胶体金的制备：步骤四：重组蛋白pGEX-4T-V、Nig75/1浓缩病毒和三株单抗的金标记：步骤五：反应膜的制备；步骤六：PPR双抗体和双抗原夹心胶体金试纸条的组装、分切和包装：步骤七：PPR双抗体夹心胶体金试纸条样品的检测：步骤八：PPR双抗原夹心胶体金试纸条样品的检测：步骤九：PPR双抗原夹心胶体金试纸与商品化试剂盒对样品检测的比对。本发明应用金标PPRV V蛋白、Nig 75/1疫苗毒和三株单抗建立的双抗体和双抗原胶体金检测方法，方法操作简单、快速，无需任何仪器，适用于大量临床样品的检测。
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公开(公告)号：CN109136241A
公开(公告)日：2019-01-04
申请号：CN201811046531.9
申请日：2018-09-08
CPC分类号： C07K14/005 , C07K16/1027 , C12N15/70 , C12N2760/18422
摘要： 本发明公开了一种小反刍兽疫V蛋白原核和真核表达、纯化和单抗的制备方法，包括以下步骤：小反刍兽疫病毒V基因原核表达载体构建pGEX–4T–V；重组pGEX–4T–V蛋白SDS–PAGE和western–blot鉴定；pGEX–4T–V蛋白纯化和浓度测定；重组pGEX–4T–V蛋白免疫小鼠制备单抗；单抗腹水的制备；小反刍兽疫V基因一个片段（已知序列）的多肽合成制备单抗；真核表达小反刍兽疫V蛋白；三株单抗间接免疫荧光和抗体分型试验等。本发明为小反刍兽疫基因工程疫苗的诊断奠定可靠的技术保障和支撑。
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公开(公告)号：CN108813175A
公开(公告)日：2018-11-16
申请号：CN201810728484.X
申请日：2018-07-05
摘要： 本发明公开了一种新疆南疆繁殖羊专用微量元素舔砖，其中每100克舔砖中：NaCl 的质量百分比为93.360%、CuSO4•5H2O 的质量百分比为0.517%、FeSO4·5H2O的质量百分比为1.205%、MnSO4•H2O 的质量百分比为2.488%、ZnSO4•H2O 的质量百分比为2.369%、CoCl2的质量百分比为0.018%、KI的质量百分比为0.008%、Na2SeO3的质量百分比为0.005%、CrCl3的质量百分比为0.026%。
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