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公开(公告)号：CN109342627B
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN201811506295.4
申请日：2018-12-10
申请人： 杭州奕安济世生物药业有限公司
摘要： 本发明涉及化学分析检测技术领域，尤其是涉及一种细胞培养物中氨基酸的检测方法。所述细胞培养物中氨基酸的检测方法，包括如下步骤：将待测细胞培养物离心处理，取上清液，稀释100‑500倍，得到供试样品；通过毛细管电泳‑质谱联用法检测供试样品，得到离子流色谱图；获取供试样品中待测氨基酸的提取离子流色谱图对应的峰面积，代入由对应氨基酸标准品建立的标准曲线中，得到细胞培养物中待测氨基酸的含量。本发明通过对细胞培养物进行一定的预处理，结合毛细管电泳‑质谱联用技术，利用外标法定量，可对细胞培养物中氨基酸含量进行快速检测，针对细胞培养的不同阶段可测试细胞培养物中氨基酸的含量，了解细胞对氨基酸的消耗。
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公开(公告)号：CN109358131B
公开(公告)日：2019-10-22
申请号：CN201811504871.1
申请日：2018-12-10
申请人： 杭州奕安济世生物药业有限公司
摘要： 本发明提供了一种单抗N糖糖型的快速分析方法。分析方法的步骤：将待测细胞培养物离心后，取上清液，稀释，向其中加入IdeS酶和还原剂进行酶解反应和还原反应，之后离心，取上清液；通过毛细管电泳‑质谱联用法检测所述抗体酶切与还原亚单位溶液，获取所述抗体酶切与还原亚单位溶液中不同糖型分子Ai的强度和分子量；对照含有各种糖型分子的分子量的数据库，确定所述不同糖型分子Ai的分子量所对应的糖型，并以每个糖型分子Ai的强度占所属的亚单位的总强度的比例作为其糖型比例。本发明相比传统的多糖标记法具有快速、高效、灵敏的优点，为生物制药行业的细胞株开发提供有力支持，将极大地助力于加快细胞株筛选的开发进度。
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公开(公告)号：CN109374779A
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201811543467.5
申请日：2018-12-17
申请人： 杭州奕安济世生物药业有限公司
摘要： 本发明提供了一种蔗糖含量的快速检测方法。检测方法：标准溶液和样品稀释所用的稀释剂相同，为0.05％～3％体积比的甲酸水溶液；利用超高压液相-质谱联用法检测待测液和标准溶液中的蔗糖含量；超高压液相：亲水作用色谱柱，流动相的流速为0.1～0.5mL/min，柱温30～60℃，采用梯度洗脱方式；流动相由10～100mmol/L的甲酸水溶液和含0.05～0.2％甲酸的乙腈组成；质谱采用PRM扫描模式，蔗糖离子母离子/子离子离子对为m/z 387.08>m/z 341.08，碎裂能量20eV～50eV。本发明克服了现有技术准确度低、灵敏度低、费时费力等问题，适用于食品和药物等任意制品中蔗糖含量的检测。
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公开(公告)号：CN109342627A
公开(公告)日：2019-02-15
申请号：CN201811506295.4
申请日：2018-12-10
申请人： 杭州奕安济世生物药业有限公司
摘要： 本发明涉及化学分析检测技术领域，尤其是涉及一种细胞培养物中氨基酸的检测方法。所述细胞培养物中氨基酸的检测方法，包括如下步骤：将待测细胞培养物离心处理，取上清液，稀释100-500倍，得到供试样品；通过毛细管电泳-质谱联用法检测供试样品，得到离子流色谱图；获取供试样品中待测氨基酸的提取离子流色谱图对应的峰面积，代入由对应氨基酸标准品建立的标准曲线中，得到细胞培养物中待测氨基酸的含量。本发明通过对细胞培养物进行一定的预处理，结合毛细管电泳-质谱联用技术，利用外标法定量，可对细胞培养物中氨基酸含量进行快速检测，针对细胞培养的不同阶段可测试细胞培养物中氨基酸的含量，了解细胞对氨基酸的消耗。
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公开(公告)号：CN109633053B
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN201811558166.X
申请日：2018-12-19
申请人： 杭州奕安济世生物药业有限公司
摘要： 本发明涉及蛋白质检测技术领域，尤其是涉及一种细胞培养物蛋白质表达量和蛋白质聚集体量的检测方法和系统。所述检测方法包括如下步骤：细胞培养物经串接的亲和色谱柱和体积排阻色谱柱进行梯度洗脱和检测；梯度洗脱的流动相包括：流动相A：10‑200mM磷酸二氢钠‑磷酸氢二钠混合物，50‑500mM氯化钠，pH 6.8±0.5；流动相B：10‑200mM甘氨酸，20‑300mM氯化钠，pH 2.5±0.5。本发明的检测方法，将亲和色谱柱和体积排阻色谱柱串接，采用一定的流动相进行梯度洗脱，能够同时检测细胞培养物中蛋白质表达量和聚集体百分比，简便、易用、费用低廉，且结果可靠。
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公开(公告)号：CN110021382B
公开(公告)日：2021-04-06
申请号：CN201910301134.X
申请日：2019-04-15
申请人： 杭州奕安济世生物药业有限公司
摘要： 本发明提供一种蛋白质药物辅料筛选方法。本发明的蛋白质药物辅料筛选方法包括：提供一种治疗性蛋白以及该治疗性蛋白的多个候选辅料，采用AutoDockTools软件与AggreScan在线软件对辅料与治疗性蛋白之间的解离能量值以及辅料与治疗性蛋白的可能结合位点进行分析，对多个候选辅料进行筛选，筛选得到的结果与常规稳定性实验的结果具有很好的对应关系，证明本发明的蛋白质药物辅料筛选方法的筛选结果稳定可靠，并且该方法操作简便，耗时短，每次辅料筛选仅需1‑2天。
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公开(公告)号：CN109358131A
公开(公告)日：2019-02-19
申请号：CN201811504871.1
申请日：2018-12-10
申请人： 杭州奕安济世生物药业有限公司
摘要： 本发明提供了一种单抗N糖糖型的快速分析方法。分析方法的步骤：将待测细胞培养物离心后，取上清液，稀释，向其中加入IdeS酶和还原剂进行酶解反应和还原反应，之后离心，取上清液；通过毛细管电泳-质谱联用法检测所述抗体酶切与还原亚单位溶液，获取所述抗体酶切与还原亚单位溶液中不同糖型分子Ai的强度和分子量；对照含有各种糖型分子的分子量的数据库，确定所述不同糖型分子Ai的分子量所对应的糖型，并以每个糖型分子Ai的强度占所属的亚单位的总强度的比例作为其糖型比例。本发明相比传统的多糖标记法具有快速、高效、灵敏的优点，为生物制药行业的细胞株开发提供有力支持，将极大地助力于加快细胞株筛选的开发进度。
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公开(公告)号：CN110021382A
公开(公告)日：2019-07-16
申请号：CN201910301134.X
申请日：2019-04-15
申请人： 杭州奕安济世生物药业有限公司
摘要： 本发明提供一种蛋白质药物辅料筛选方法。本发明的蛋白质药物辅料筛选方法包括：提供一种治疗性蛋白以及该治疗性蛋白的多个候选辅料，采用AutoDockTools软件与AggreScan在线软件对辅料与治疗性蛋白之间的解离能量值以及辅料与治疗性蛋白的可能结合位点进行分析，对多个候选辅料进行筛选，筛选得到的结果与常规稳定性实验的结果具有很好的对应关系，证明本发明的蛋白质药物辅料筛选方法的筛选结果稳定可靠，并且该方法操作简便，耗时短，每次辅料筛选仅需1-2天。
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公开(公告)号：CN109633053A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201811558166.X
申请日：2018-12-19
申请人： 杭州奕安济世生物药业有限公司
CPC分类号： G01N30/462 , G01N30/02
摘要： 本发明涉及蛋白质检测技术领域，尤其是涉及一种细胞培养物蛋白质表达量和蛋白质聚集体量的检测方法和系统。所述检测方法包括如下步骤：细胞培养物经串接的亲和色谱柱和体积排阻色谱柱进行梯度洗脱和检测；梯度洗脱的流动相包括：流动相A：10‑200mM磷酸二氢钠‑磷酸氢二钠混合物，50‑500mM氯化钠，pH 6.8±0.5；流动相B：10‑200mM甘氨酸，20‑300mM氯化钠，pH 2.5±0.5。本发明的检测方法，将亲和色谱柱和体积排阻色谱柱串接，采用一定的流动相进行梯度洗脱，能够同时检测细胞培养物中蛋白质表达量和聚集体百分比，简便、易用、费用低廉，且结果可靠。
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