-
公开(公告)号:CN112538459A
公开(公告)日:2021-03-23
申请号:CN202011449872.8
申请日:2020-12-11
Applicant: 林洁
IPC: C12N5/09
Abstract: 一种肝癌组织中的外泌体的分离方法,包括:手术后的新鲜HCC组织标本一经离体,立即浸泡于含链霉素、青霉素双抗的PBS中;在无菌操作条件下,用剪刀将组织块剪成大小1~3mm的组织碎块;用含双抗的PBS漂洗净血液后,置于DMEM/F12培养基,同时加入I型、IV型胶原蛋白酶和透明质酸酶降解细胞外基质,并加入DNA酶消化死亡细胞所释放的基因组DNA;恒温摇床孵育30~60分钟;消化液经70μm过滤器过滤,去除未被消化的组织碎片;梯度离心法获得外泌体。本发明的方法可直接从术后肝癌组织标本中分离,可获得精确反映HCC肿瘤本身特征的外泌体。