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公开(公告)号：CN115747381A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211707215.8
申请日：2022-12-29
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/94
摘要： 本发明属于病毒分子检测技术领域，具体涉及一种马铃薯纺锤块茎类病毒TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测荧光探针、试剂盒及应用。本技术方案所涉及的引物的核苷酸序列为：正向引物：5'‑GGGTTTTCACCCTTCCTTTC‑3'，反向引物：5'‑TGTTTCWRCDGGGATTACTCCTG‑3'；荧光探针的序列为：5'‑FAM‑CCGCTGGGCACTCCCCACCGTCCTTT‑BHQ1‑3'；试剂盒至少包括上述的引物和荧光探针。本发明提供的马铃薯纺锤块茎类病毒荧光定量PCR检测方法操作方便且快速，可对马铃薯纺锤块茎类病毒进行定量检测，该引物的特异性好，灵敏度高，适合于在植物病害诊断领域广泛推广应用。
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公开(公告)号：CN116042922A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202211707223.2
申请日：2022-12-29
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/94
摘要： 本发明属于病毒分子检测技术领域，具体涉及一种番茄雄性株类病毒TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测荧光探针、试剂盒及应用。本技术方案所涉及的引物的核苷酸序列为：正向引物：5'‑GGGTTTTCACCCTTCCTTTC‑3'，反向引物：5'‑TGTTTCWRCDGGGATTACTCCTG‑3'；荧光探针的序列为：5'‑FAM‑TGGGAGACTCCCCAGCCGCGACTCCTT‑BHQ1‑3'；试剂盒至少包括上述的引物和荧光探针。本发明提供的番茄雄性株类病毒荧光定量PCR检测方法操作方便且快速，可对番茄雄性株类病毒进行定量检测，该引物的特异性好，灵敏度高，适合于在植物病害诊断领域广泛推广应用。
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公开(公告)号：CN116240313A
公开(公告)日：2023-06-09
申请号：CN202211707230.2
申请日：2022-12-29
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/94
摘要： 本发明属于病毒分子检测技术领域，具体涉及一种番茄褪绿矮缩类病毒TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测荧光探针、试剂盒及应用。本技术方案所涉及的引物的核苷酸序列为：正向引物：5'‑GGGTTTTCACCCTTCCTTTC‑3'，反向引物：5'‑TGTTTCWRCDGGGATTACTCCTG‑3'；荧光探针的序列为：5'‑FAM‑CGCCTTCCACAAGCTCCCTGCCGCCTTT‑BHQ1‑3'；试剂盒至少包括上述的引物和荧光探针。本发明提供的番茄褪绿矮缩类病毒荧光定量PCR检测方法操作方便且快速，可对番茄褪绿矮缩类病毒进行定量检测，该引物的特异性好，灵敏度高，适合于在植物病害诊断领域广泛推广应用。
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公开(公告)号：CN115820940A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211707226.6
申请日：2022-12-29
摘要： 本发明属于病毒分子检测技术领域，具体涉及一种辣椒小果类病毒TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测荧光探针、试剂盒及应用。本技术方案所涉及的引物的核苷酸序列为：正向引物：5'‑GGGTTTTCACCCTTCCTTTC‑3'，反向引物：5'‑TGTTTCWRCDGGGATTACTCCTG‑3'；荧光探针的序列为：5'‑FAM‑CTCCCCCGAAGCCCGCTTAGGGAAAAAG‑BHQ1‑3'；试剂盒至少包括上述的引物和荧光探针。本发明提供的辣椒小果类病毒荧光定量PCR检测方法操作方便且快速，可对辣椒小果类病毒进行定量检测，该引物的特异性好，灵敏度高，适合于在植物病害诊断领域广泛推广应用。
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公开(公告)号：CN115896355A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202211707245.9
申请日：2022-12-29
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/94
摘要： 本发明属于病毒分子检测技术领域，具体涉及一种金鱼草潜隐类病毒TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测荧光探针、试剂盒及应用。本技术方案所涉及的引物的核苷酸序列为：正向引物：5'‑GGGTTTTCACCCTTCCTTTC‑3'，反向引物：5'‑TGTTTCWRCDGGGATTACTCCTG‑3'；荧光探针的序列为：5'‑FAM‑CGTCAGCACCTGCGCTGGTCAAGAGGTT‑BHQ1‑3'；试剂盒至少包括上述的引物和荧光探针。本发明提供的金鱼草潜隐类病毒荧光定量PCR检测方法操作方便且快速，可对金鱼草潜隐类病毒进行定量检测，该引物的特异性好，灵敏度高，适合于在植物病害诊断领域广泛推广应用。
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公开(公告)号：CN115786596A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211707222.8
申请日：2022-12-29
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/94
摘要： 本发明属于病毒分子检测技术领域，具体涉及一种番茄顶缩类病毒TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测荧光探针、试剂盒及应用。本技术方案所涉及的引物的核苷酸序列为：正向引物：5'‑GGGTTTTCACCCTTCCTTTC‑3'，反向引物：5'‑TGTTTCWRCDGGGATTACTCCTG‑3'；荧光探针的序列为：5'‑FAM‑AATGATCCGAAGCCCCCGACCTCGACTTC‑BHQ1‑3'；试剂盒至少包括上述的引物和荧光探针。本发明提供的番茄顶缩类病毒荧光定量PCR检测方法操作方便且快速，可对番茄顶缩类病毒进行定量检测，该引物的特异性好，灵敏度高，适合于在植物病害诊断领域广泛推广应用。
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公开(公告)号：CN116555483A
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202211528526.8
申请日：2022-11-30
IPC分类号： C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6848 , C12R1/94
摘要： 本发明提供的茄科植物病毒及类病毒的多重巢式RT‑PCR检测用引物，通过对茄科植物保守基因、PepMV 6个株系和6种类病毒的保守区域及特异区域，设计通用和特异性检测引物，采用其引物构建多重巢式RT‑PCR检测体系，能特异扩增出PepMV、PSTVd、CLVd、PCFVd、TASVd、TCDVd和TPMVd的基因片段，各病毒引物之间不会出现交叉干扰，所扩增的目的片段条带清晰，可明确区分上述7种病毒及类病毒，该检测体系特异性强。本发明的检测方法不仅快速准确灵敏，最低检出限为0.14pg/μL的模板，而且降低了检测成本，提高了病毒检测效率，为我国海关进出境茄科植物种子检疫提供技术和产品支撑。
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公开(公告)号：CN108148794B
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN201810202589.1
申请日：2018-03-13
申请人： 华中农业大学
摘要： 本发明公开了一种广谱抑菌活性的枯草芽孢杆菌DYr3.3及制备方法和应用，拮抗细菌枯草芽孢杆菌菌株DYr3.3，CCTCC M 2018024，步骤是：（1）采集紫枝玫瑰根，将根切成大小的组织，经过70%酒精消毒，经无菌水冲洗后，放置于PDA培养基上暗培养，培养后，将长出来的细菌菌落转移至新的PDA培养基上划线分离纯化单菌落；（2）分离纯化后，获得一种拮抗细菌枯草芽孢杆菌菌株DYr3.3，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，该菌株DYr3.3在制备治疗或预防梨果实腐烂病药物中的应用。菌株DYr3.3经过液体发酵获得的DYr3.3菌液可以阻止因梨轮纹病和炭疽病危害造成的梨果实腐烂，对梨果实的腐烂具有良好的防病效果，显著抑制梨果实腐烂，防效率可达100％，广泛应用于梨果实腐烂病的防治。
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公开(公告)号：CN108148794A
公开(公告)日：2018-06-12
申请号：CN201810202589.1
申请日：2018-03-13
申请人： 华中农业大学
摘要： 本发明公开了一种广谱抑菌活性的枯草芽孢杆菌DYr3.3及制备方法和应用，拮抗细菌枯草芽孢杆菌菌株DYr3.3，CCTCC M 2018024，步骤是：（1）采集紫枝玫瑰根，将根切成大小的组织，经过70%酒精消毒，经无菌水冲洗后，放置于PDA培养基上暗培养，培养后，将长出来的细菌菌落转移至新的PDA培养基上划线分离纯化单菌落；（2）分离纯化后，获得一种拮抗细菌枯草芽孢杆菌菌株DYr3.3，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，该菌株DYr3.3在制备治疗或预防梨果实腐烂病药物中的应用。菌株DYr3.3经过液体发酵获得的DYr3.3菌液可以阻止因梨轮纹病和炭疽病危害造成的梨果实腐烂，对梨果实的腐烂具有良好的防病效果，显著抑制梨果实腐烂，防效率可达100％，广泛应用于梨果实腐烂病的防治。
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公开(公告)号：CN102443580B
公开(公告)日：2013-11-13
申请号：CN201010509840.2
申请日：2010-10-15
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N15/10
摘要： 本发明属于分子生物学方法领域，涉及一种分离植物或微生物总RNA的试剂组合物及制备方法。以异硫氰酸胍、苯酚为主要成分，以NaCl、MgCl2等提供阳离子，以醋酸钠-醋酸缓冲系统稳定溶液pH，经氯仿简单抽提后，即可得高质量的RNA。由于本发明的RNA提取试剂中添加了糖原作为核酸沉淀剂，与同类试剂相比，核酸的沉降效率大为提高，对组织样品中含量很低的核酸成分亦能有效分离。使核酸沉降过程短时间内即可完成，免除了-20℃沉降数小时的过程，大大缩短了操作时间。该方法快捷、高效，适用样品广泛，比商业化TRIzol试剂更为廉价。克服了传统方法样品选择性强、操作繁琐、效率较低等缺点。且操作更为灵活，样品匀浆后可于-20℃保存3天再进行RNA的提取。
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