快速广谱检测支原体的引物探针组合、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN116516032A

    公开(公告)日:2023-08-01

    申请号:CN202310480341.2

    申请日:2023-04-28

    摘要: 本发明公开了一种快速广谱检测支原体的引物探针组合、试剂盒及其应用,涉及支原体检测技术领域。引物探针组合包括10条正向引物,5条反向引物和4条检测探针;正向引物序列如SEQ ID NO.1‑10所示,反向引物序列如SEQ ID NO.11‑15所示,检测探针序列如SEQ ID NO.16‑19所示;本发明提供了用于广谱检测支原体的试剂盒和检测方法,试剂盒中包括内控质粒和内控探针。试剂盒中的引物探针所检测的支原体种类覆盖度广,可以检测>132种、>410株支原体,检测限0.1‑0.5copies/μl,灵敏度可达10CFU/ml以下;能监测样品中可能存在的PCR抑制情况,避免假阴性出现。

    一种用于多细胞种属鉴别和交叉污染检测的混合引物及其使用方法

    公开(公告)号:CN112941201A

    公开(公告)日:2021-06-11

    申请号:CN202110223240.8

    申请日:2021-03-01

    摘要: 本发明属于分子遗传学技术领域,具体提供了一种用于多细胞种属鉴别和交叉污染检测的混合引物及其使用方法。本发明的混合引物包括11对引物,各引物基于MDBK、BALB/c‑3T3、MDCK、Walker‑256、BHK‑21、Hela、FRhK‑4、Vero、CH0‑K1、PG‑4和PK‑15细胞的Cytb和CO I基因标准序列的差异而设计,大大减小了引物之间的交叉配对和干扰概率,提高了检测的特异性和灵敏度,只需对细胞DNA进行提取便可以同时对多种细胞的种属来源进行鉴别,还可以对培养过程中是否存在不同种属间细胞的交叉污染进行检测,具有操作简单、用时短、效率高和价格便宜等优势。

    一种马秋波病毒的特异性识别抗体及检测试剂盒

    公开(公告)号:CN112321707A

    公开(公告)日:2021-02-05

    申请号:CN202011092262.7

    申请日:2020-10-13

    IPC分类号: C07K16/10 C12N5/20 G01N33/569

    摘要: 本发明公开了一种马秋波病毒的特异性识别抗体及检测试剂盒,通过以下方法制备获得:以假病毒作为免疫原对小鼠进行免疫,再用真核表达的重组MACV GP1蛋白作为抗原对免疫小鼠血清进行第一轮特异性结合筛选,取血清特异性抗体滴度高的小鼠脾脏,与鼠骨髓瘤细胞融合,融合细胞继续以真核表达的重组MACV GP1蛋白作为抗原进行第二轮特异性结合筛选,得到杂交瘤细胞株,能分泌特异性识别马秋波病毒(MACV)的抗体;所述假病毒为带MACV包膜蛋白的VSV骨架假病毒。该抗体能够特异性结合MACV,将其区别于不同种类的NW沙粒病毒,假阳性和假阴性均降低,提高了检测准确性。

    用于检测多种Vesivirus的RT-PCR引物和探针、试剂盒及方法和应用

    公开(公告)号:CN111808996A

    公开(公告)日:2020-10-23

    申请号:CN202010826556.1

    申请日:2020-08-17

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/686 C12N15/11

    摘要: 本发明属于生物技术技术领域,具体涉及一种用于检测多种Vesivirus的RT-PCR引物和探针、试剂盒及方法,包括用于检测Vesivirus 2117、vesivirus strain CU/296/15/USA、Canine caliciviruses、Vesivirus Allston 2009/US、Vesivirus Allston 2008/US、Vesivirus Geel 2008/Belgium、Vesivirus W191R、vesivirus strain Bari/212/07/ITA的正向引物、反向引物和探针;其中,所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;所述探针的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,且所述探针的5’端标记有报告荧光基团,3’端标记有淬灭荧光基团。本发明的引物和探针、试剂盒及方法可以同时检测8种病毒,扩大了生物制品质量监控的范围,为预防和减少CHO生物制品中可能出现的外源因子的污染提供了技术支持,且具有简单高效,灵敏度高、特异性强、高通量操作等优点。

    一种检测昆虫杆状病毒的引物组合、检测产品及其应用

    公开(公告)号:CN118932116A

    公开(公告)日:2024-11-12

    申请号:CN202411151763.6

    申请日:2024-08-21

    摘要: 本发明公开了一种检测昆虫杆状病毒的引物组合、检测产品及其应用,涉及昆虫杆状病毒的生物检测技术。本发明提供了一种检测昆虫杆状病毒的引物组合,包括正向引物NPV‑F1、NPV‑F2和GV‑F1,以及反向引物NPV‑R1、NPV‑R2和GV‑R1;这些引物序列分别如SEQ ID NO.1‑6。本发明还提供了上述引物组合的应用方法,包括但不限于检测试剂盒等产品,以及检测昆虫杆状病毒的具体方法。本发明提供的引物组合,能用同一检测方法和程序,检测杆状病毒科AcMNPV、SpliNPV、SfMNPV、TnSNPV、SfGV和TnGV,通用性好;不受检测样本中昆虫细胞基因组干扰,耐用性强,特异性好;检测限可达2×101 copies/μl,灵敏度高;可用于生产用昆虫细胞及其生物制品中杆状病毒的快速检测和安全性评估。

    快速检测野生型腺相关病毒的引物探针、试剂盒及方法和应用

    公开(公告)号:CN116622908A

    公开(公告)日:2023-08-22

    申请号:CN202310393586.1

    申请日:2023-04-13

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/686 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了快速检测野生型腺相关病毒的引物探针、试剂盒及方法和应用,涉及腺相关病毒检测技术领域。所述引物探针包括两组引物探针组合;第一组引物探针组合的正向引物序列如SEQ ID NO.1所示,反向引物序列如SEQ ID NO.2所示,探针序列如SEQ ID NO.3所示;第二组引物探针组合的正向引物序列如SEQ ID NO.4所示,反向引物序列如SEQ ID NO.5所示,探针序列如SEQ ID NO.6所示。本发明的引物探针组合能一次性、特异性地检测1‑13血清型AAV病毒,灵敏度高,对每种AAV血清型灵敏度均可达25拷贝/ml,比常规PCR高1‑2个数量级,且比SYBR green I qPCR法更高。

    一种检测猴D型逆转录病毒的引物探针组合物、试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN115323076B

    公开(公告)日:2023-06-30

    申请号:CN202210936071.7

    申请日:2022-08-05

    摘要: 本发明属于分子生物学技术领域,具体提供了一种检测猴D型逆转录病毒的引物探针组合物,包括反转录引物SRV‑RT.RP,检测猴D型逆转录病毒4型的上游引物P‑SRV4‑F、下游引物P‑SRV4‑R和探针SRV4‑P,检测猴D型逆转录病毒5型的上游引物P‑SRV5‑F、下游引物P‑SRV5‑R和探针SRV5‑P,检测猴D型逆转录病毒8型的上游引物P‑SRV8‑F、下游引物P‑SRV8‑R和探针SRV8‑P。本发明还提供了包括该引物探针组合物的试剂盒及采用该引物探针组合物同时检测多血清型猴D型逆转录病毒的方法,特异性强、灵敏度高,极大的缩短了检测时间,为采取有针对性的综合防控措施提供参考数据,利于实验猴病原体SRV的快速检测和流行病学的调查与预防。