公开(公告)号：CN116143900B

公开(公告)日：2024-08-06

申请号：CN202310095939.X

申请日：2023-02-10

申请人： 江苏省农业科学院

发明人： 钱晶 ,  李丁 ,  陈鹏举 ,  汤正旭 ,  刘雪 ,  王建锟

IPC分类号： C07K14/56 ,  C12N15/81 ,  C12N15/66 ,  C07K1/14 ,  C07K1/22 ,  C12N15/21 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

摘要： 一种重组鸽干扰素α及其表达工程菌株与制备方法，涉及生物领域，通过将优化后的鸽干扰素α基因定向克隆至真核表达质粒pPIC9K中构建重组真核表达质粒转化至毕赤酵母X‑33感受态细胞中筛选表达工程菌株，对表达工程菌株进行甲醇诱导、上清收集、亲和层析纯化后获得重组鸽干扰素α。该重组鸽干扰素α产量达到45mg/L，抗病毒活性为3.16×106U/mL，比活性为6.77×106U/mg，其可刺激细胞提高ISG15、OAS、PKR、Mx基因的转录水平，具有显著的生物学活性，能提升鸽群天然免疫力和增强鸽群抗病能力。本发明的制备方法操作简单，成本低，适用于大规模生产。

公开(公告)号：CN117447589A

公开(公告)日：2024-01-26

申请号：CN202311445940.7

申请日：2023-11-02

申请人： 江苏省农业科学院

发明人： 钱晶 ,  王建锟 ,  李丁 ,  谭业平 ,  夏兴霞 ,  毕振威 ,  王永山 ,  徐司雨 ,  诸玉梅

IPC分类号： C07K16/10 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12N15/66 ,  A61K39/42 ,  A61P31/14 ,  G01N33/68 ,  C12R1/84

摘要： 一条重链抗体可变区序列、抗基因VI型新城疫病毒的重组纳米抗体及其制备方法和应用，涉及生物技术领域。本发明从免疫羊驼的VHH噬菌体文库中筛选到一条重链抗体可变区序列，将该重链抗体可变区序列定向克隆至pPIC9K载体中构建重组真核表达质粒，转化至毕赤酵母X‑33感受态细胞中筛选重组表达工程菌株，并对筛选的重组表达工程菌株进行甲醇诱导，再依次经过上清收集、亲和层析纯化后获得抗基因VI型新城疫病毒的重组纳米抗体，其产量高达14.5mg/L，且在DF‑1细胞上的中和效价为7log2，在鸽胚上的中和效价为5log2，具有显著的生物学活性，可用于制备预防和/或治疗鸽新城疫的新型纳米抗体制剂。

公开(公告)号：CN116143900A

公开(公告)日：2023-05-23

申请号：CN202310095939.X

申请日：2023-02-10

申请人： 江苏省农业科学院

发明人： 钱晶 ,  李丁 ,  陈鹏举 ,  汤正旭 ,  刘雪 ,  王建锟

IPC分类号： C07K14/56 ,  C12N15/81 ,  C12N15/66 ,  C07K1/14 ,  C07K1/22 ,  C12N15/21 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

摘要： 一种重组鸽干扰素α及其表达工程菌株与制备方法，涉及生物领域，通过将优化后的鸽干扰素α基因定向克隆至真核表达质粒pPIC9K中构建重组真核表达质粒转化至毕赤酵母X‑33感受态细胞中筛选表达工程菌株，对表达工程菌株进行甲醇诱导、上清收集、亲和层析纯化后获得重组鸽干扰素α。该重组鸽干扰素α产量达到45mg/L，抗病毒活性为3.16×106U/mL，比活性为6.77×106U/mg，其可刺激细胞提高ISG15、OAS、PKR、Mx基因的转录水平，具有显著的生物学活性，能提升鸽群天然免疫力和增强鸽群抗病能力。本发明的制备方法操作简单，成本低，适用于大规模生产。