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公开(公告)号：CN116926201A
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202310377952.4
申请日：2023-04-11
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供基于斑点叉尾鮰EGFL9基因变异位点及应用，包括基于斑点叉尾鮰EGFL9基因的SNPs标记、开发斑点叉尾鮰EGFL9基因变异位点的引物及其试剂盒，本发明在EGFL9上共发现27个多态位点，经过过滤，获得22个有效突变位点，其中4个变异位点(g.142、g.573、g.3079、g.7409)对斑点叉尾鮰的生长性状具有显著影响，位点g.142、g.3079、g.7409为内含子，位点g.573为外显子，位于外显子上的InDel位点g.573使EGFL9基因编码蛋白减少了一个苏氨酸残基，对蛋白质三级结构产生较为明显的影响，从而使该位点的TACC/T型个体的平均体重显著性高于TACC/TACC型个体（P
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公开(公告)号：CN113475433A
公开(公告)日：2021-10-08
申请号：CN202110924437.4
申请日：2021-08-12
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明公开了一种斑点叉尾鮰伪雌鱼培育方法，其包括以下步骤，（1）斑点叉尾鮰卵黄囊苗完全消耗卵黄囊长成仔鱼时，开始投喂经雌性激素处理的丰年虫，投喂3天或投喂至仔鱼开口；（2）继续投喂经雌性激素处理的饲料至30日龄；（3）继续投喂常规饲料至60日龄以上，该方法创新的研究了受精卵孵化、伪雌鱼培育饵料的制作、鱼苗饲养与管理、性逆转评估、伪雌鱼筛选等培育环节，实现雄性遗传性别斑点叉尾鮰100%逆转成伪雌鱼，即遗传性别为雄性。
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公开(公告)号：CN113475433B
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202110924437.4
申请日：2021-08-12
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明公开了一种斑点叉尾鮰伪雌鱼培育方法，其包括以下步骤，（1）斑点叉尾鮰卵黄囊苗完全消耗卵黄囊长成仔鱼时，开始投喂经雌性激素处理的丰年虫，投喂3天或投喂至仔鱼开口；2）继续投喂经雌性激素处理的饲料至30日龄；3）继续投喂常规饲料至60日龄以上，该方法创新的研究了受精卵孵化、伪雌鱼培育饵料的制作、鱼苗饲养与管理、性逆转评估、伪雌鱼筛选等培育环节，实现雄性遗传性别斑点叉尾鮰100%逆转成伪雌鱼，即遗传性别为雄性。
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公开(公告)号：CN113373244B
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202110796789.6
申请日：2021-07-14
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6879 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于SNP位点特异性引物延伸反应快速检测斑点叉尾鮰遗传性别的方法，该方法设计扩增斑点叉尾鮰性别连锁SNP位点的外围引物、特异性延伸引物(ASE)和DNA探针(ASE‑DP)，利用所述待测斑点叉尾鮰的DNA、引物和DNA探针进行延伸反应和核酸杂交，再根据快速核酸检测试纸条显色结果判断待测样本的遗传性别。本发明的准确率达100％，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN115669575A
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202211049770.6
申请日：2022-08-30
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: A01K61/10 , C12Q1/6879 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种诱导斑点叉尾鮰性别分化的方法，其包括以下步骤，选择卵黄囊苗在斑点叉尾鮰鱼卵流水孵化装置中孵化出苗，培育至30日龄，培育期间控制水体温度为36±0.5℃，上调foxl2基因的表达实现性别逆转；待卵黄囊褪去，仔鱼上游觅食后，先投喂卤虫开口饵料，然后根据体长投喂对应的微粒饲料；30日龄试验鱼养殖至室外水泥池中，饲料更换为商品饲料，每日上、下午各投喂一次，日投喂量为鱼体重的3％，继续培育即可。本发明分别探究温度对斑点叉尾鮰生长及性腺分化的影响及不同温度对性腺分化影响的潜在机制，为温度影响斑点叉尾鮰分化机制奠定基础，同时为日后建立环境友好型的斑点叉尾鮰性别控制育种模式提供前期探索。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112342214B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202011253224.5
申请日：2020-11-11
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/70
Abstract: 本发明提供一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法，通过设计CRISPR序列，制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接，再通过体外转录方法制备sgRNA，将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵，以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列，特异性强且敲除效率高，敲除流程简单快捷，为后续解析斑点叉尾鮰zbtb38基因功能提供动物材料。
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公开(公告)号：CN112335581A
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN202011161332.X
申请日：2020-10-27
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明公开了一种用于斑点叉尾鮰基因敲除和过表达研究的受精卵及其制备方法，该方法包括亲鱼培育、强化促熟培育、亲鱼选择、雌性亲鱼的催产、精子溶液制备、卵子收集、人工授精，通过该方法制备的受精卵经显微注射后，孵化率超过80％。本发明还提供了促进斑点叉尾鮰雌性亲鱼排卵的催产剂及其剂量，注射催产剂后可促进雌性亲鱼产卵并可实现人工取卵。根据本发明制备的斑点叉尾鮰受精卵可以保证其同步的发育，满足基因敲除、过表达等研究需要。
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公开(公告)号：CN112342215B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202011255641.3
申请日：2020-11-11
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/89 , C12N15/55 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种靶向敲除斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列及其筛选方法，通过设计CRISPR序列，制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接，再通过体外转录方法制备sgRNA，将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵，以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列，特异性强且敲除效率高，敲除流程简单快捷，为后续解析斑点叉尾鮰mstna基因功能提供动物材料。
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公开(公告)号：CN113373244A
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN202110796789.6
申请日：2021-07-14
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6879 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于SNP位点特异性引物延伸反应快速检测斑点叉尾鮰遗传性别的方法，该方法设计扩增斑点叉尾鮰性别连锁SNP位点的外围引物、特异性延伸引物(ASE)和DNA探针(ASE‑DP)，利用所述待测斑点叉尾鮰的DNA、引物和DNA探针进行延伸反应和核酸杂交，再根据快速核酸检测试纸条显色结果判断待测样本的遗传性别。本发明的准确率达100％，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN112342215A
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN202011255641.3
申请日：2020-11-11
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/89 , C12N15/55 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种靶向敲除斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列及其筛选方法，通过设计CRISPR序列，制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接，再通过体外转录方法制备sgRNA，将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵，以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列，特异性强且敲除效率高，敲除流程简单快捷，为后续解析斑点叉尾鮰mstna基因功能提供动物材料。
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