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公开(公告)号：CN119547721A
公开(公告)日：2025-03-04
申请号：CN202411925567.X
申请日：2024-12-25
Applicant: 河北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种创制高频渐渗大白菜‑甘蓝渐渗系的方法，涉及渐渗育种技术领域。本发明利用四倍体大白菜和二倍体甘蓝进行种间杂交获得异源三倍体杂交种(AAC)，继而与二倍体大白菜杂交、自交，结合游离小孢子培养，创制高频渐渗外源种基因组序列的大白菜‑甘蓝渐渗系。本发明利用异源三倍体杂交种介导的遗传系统实现了种间高渐渗，为破解外源种渐渗频率低这一瓶颈提供了新方法。
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公开(公告)号：CN106701952B
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN201710004003.6
申请日：2017-01-04
Applicant: 河北农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种基于共线性基因开发标记鉴定大白菜‑结球甘蓝易位系的方法，包括：a)确定易位系中结球甘蓝的基因片段区段；获得所述结球甘蓝的基因片段区段及其侧翼区域所有基因序列以及大白菜中对应的共线性基因序列，并根据基因序列的差异位点设计覆盖差异位点区域的引物；b)利用上述引物对易位系亲本大白菜和亲本结球甘蓝进行PCR扩增，根据扩增结果确定结球甘蓝相对于大白菜特异的基因标记；c)利用上述基因标记对易位系亲本大白菜、亲本结球甘蓝和易位系自交后代进行PCR扩增，根据扩增结果获得易位系的鉴定结果。本发明基于大白菜和结球甘蓝共线性基因序列差异位点设计引物，增加扩增效率的差异，可以直接鉴定外源基因的导入。
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公开(公告)号：CN103509864B
公开(公告)日：2014-12-03
申请号：CN201310423234.2
申请日：2013-09-17
Applicant: 河北农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种区分鉴定大白菜、结球甘蓝FLCs基因的方法。该方法包括（1）根据已公布的拟南芥、白菜和甘蓝FLCs基因序列，对白菜和甘蓝FLCs基因外显子4和外显子7区段设计引物，合成引物序列；（2）提取不同基因型大白菜和结球甘蓝的基因组DNA，以其为模板进行上述引物的PCR扩增；（3）扩增产物在1.8％琼脂糖凝胶中电泳分离检测；（4）筛选能够区分大白菜、结球甘蓝FLCs基因的引物；（5）利用FLCs基因的特异引物鉴定大白菜—结球甘蓝异源三倍体杂交种FLCs基因组成。本发明实现了对大白菜、结球甘蓝8个FLCs同源基因的全面、有效鉴定，为进一步研究不同FLCs基因对抽薹开花等的作用提供技术支撑。
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公开(公告)号：CN103509864A
公开(公告)日：2014-01-15
申请号：CN201310423234.2
申请日：2013-09-17
Applicant: 河北农业大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6895 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明公开了一种区分鉴定大白菜、结球甘蓝FLCs基因的方法。该方法包括（1）根据已公布的拟南芥、白菜和甘蓝FLCs基因序列，对白菜和甘蓝FLCs基因外显子4和外显子7区段设计引物，合成引物序列；（2）提取不同基因型大白菜和结球甘蓝的基因组DNA，以其为模板进行上述引物的PCR扩增；（3）扩增产物在1.8％琼脂糖凝胶中电泳分离检测；（4）筛选能够区分大白菜、结球甘蓝FLCs基因的引物；（5）利用FLCs基因的特异引物鉴定大白菜—结球甘蓝异源三倍体杂交种FLCs基因组成。本发明实现了对大白菜、结球甘蓝8个FLCs同源基因的全面、有效鉴定，为进一步研究不同FLCs基因对抽薹开花等的作用提供技术支撑。
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公开(公告)号：CN101822213B
公开(公告)日：2012-06-06
申请号：CN200910175393.9
申请日：2009-12-21
Applicant: 河北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高辣(甜)椒游离小孢子培养胚状体诱导率的方法，属于利用细胞遗传学理论与育种技术领域。该发明在前人已发表的辣椒游离小孢子培养获得胚状体培养方法的基础上，通过提高培养用花蕾质量，采用从花蕾的取样、前期预处理、灭菌到花药剥取全程低温控制，并于7℃黑暗预培养一周后转到28℃黑暗培养的关键技术，使获得的胚状体最高达8.4个胚状体/花药，平均为1.3个胚状体/花药，高于公布的1个胚状体/花药的专利技术及国内目前报道的最高为1.83个胚状体/花药的研究。本发明的特点是：方法实用、步骤具体、适用的基因型广泛、重复性好，可实现辣(甜)椒游离小孢子培养在单倍体育种及创建遗传作图群体上的广泛应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1784952A
公开(公告)日：2006-06-14
申请号：CN200510112658.2
申请日：2005-10-13
Applicant: 河北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种大白菜初级三体系的培养方法，属于利用细胞遗传学理论与育种技术领域。该方法包括(1)游离小孢子培养；(2)小孢子单株系的建立；(3)2n+1(三体)植株的筛选；(4)三体类别的鉴定；(5)三体植株标记性特征的确定。本发明的特点是：采用植物组织和细胞培养技术，对四倍体大白菜的游离小孢子进行离体培养，然后从培养获得的小孢子植株中直接进行初级三体的筛选和鉴定。利用本发明的方法创建初级三体，效率高，时间短，较常规的创建方法相比，创建一套初级三体，一般可缩短2－3年。利用本发明创建的一套大白菜初级三体可广泛用以大白菜的基因定位、遗传效应研究、染色体工程育种和分子工程育种等。
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公开(公告)号：CN106636320B
公开(公告)日：2020-09-18
申请号：CN201610135140.9
申请日：2016-03-10
Applicant: 河北农业大学
IPC: C12Q1/6841
Abstract: 本发明属于作物分子细胞遗传学技术领域，具体涉及一种白菜成熟花粉细胞荧光原位杂交的方法。该方法步骤包括白菜成熟花粉时期花蕾的确定、成熟花粉细胞制片、探针标记、原位杂交和信号检测等。本发明的特点是：取白菜开花前1‑2 d的花蕾，在50%冰醋酸溶液中分离出新鲜花粉粒，采用垂直压片法破碎花粉壁，释放出完整的营养细胞与生殖细胞；细胞标本经预处理后与变性探针在80℃共变性3 min，直接进行原位杂交，获得了信号清晰的荧光杂交图片，揭示出目标DNA在营养细胞和生殖细胞中的信号表现差异。本发明填补了十字花科芸薹属植物成熟花粉细胞荧光原位杂交技术空白，应用于白菜花粉发育的分子细胞遗传学研究中。
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公开(公告)号：CN101956012B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201010297749.9
申请日：2010-09-30
Applicant: 河北农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种鉴定结球甘蓝—大白菜异附加系的方法。该方法包括(1)根据已发表的甘蓝遗传图谱，选用了位于大白菜10个连锁群的207个SSR标记，引物序列由上海生工生物技术有限公司合成。(2)提取不同结球甘蓝和大白菜品种的基因组DNA，PCR扩增。(3)扩增产物电泳分离，银染检测。(4)筛选大白菜连锁群相对于结球甘蓝特异的SSR标记。(5)利用大白菜连锁群相对于结球甘蓝特异的SSR标记，鉴定结球甘蓝-大白菜异附加系。由于大白菜和甘蓝染色体小且形态相近，在细胞水平很难准确鉴定，本发明可以实现分子水平快速、准确鉴定大白菜-结球甘蓝异附加系、异代换系、易位系等重要的遗传分析材料，为利用大白菜基因改良结球甘蓝遗传背景奠定基础。
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公开(公告)号：CN101423867B
公开(公告)日：2012-01-11
申请号：CN200810055317.X
申请日：2008-07-03
Applicant: 河北农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种鉴定大白菜-甘蓝异附加系的方法。该方法包括(1)根据已发表的甘蓝遗传图谱，选用了位于甘蓝不同连锁群的91对SSR引物；(2)提取不同品种的大白菜和甘蓝的基因组DNA，PCR扩增；(3)扩增产物在6％变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离，银染检测；(4)筛选甘蓝连锁群相对于大白菜特异的SSR引物；(5)利用甘蓝连锁群相对于大白菜特异的SSR引物，鉴定大白菜-甘蓝异附加系。本发明可以在分子水平快速、准确鉴定大白菜与甘蓝的杂交种、异附加系、异代换系、易位系等重要的遗传分析材料，为利用甘蓝基因改良大白菜遗传背景奠定基础。
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公开(公告)号：CN101956012A
公开(公告)日：2011-01-26
申请号：CN201010297749.9
申请日：2010-09-30
Applicant: 河北农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种鉴定结球甘蓝—大白菜异附加系的方法。该方法包括(1)根据已发表的甘蓝遗传图谱，选用了位于大白菜10个连锁群的207个SSR标记，引物序列由上海生工生物技术有限公司合成。(2)提取不同结球甘蓝和大白菜品种的基因组DNA，PCR扩增。(3)扩增产物电泳分离，银染检测。(4)筛选大白菜连锁群相对于结球甘蓝特异的SSR标记。(5)利用大白菜连锁群相对于结球甘蓝特异的SSR标记，鉴定结球甘蓝-大白菜异附加系。由于大白菜和甘蓝染色体小且形态相近，在细胞水平很难准确鉴定，本发明可以实现分子水平快速、准确鉴定大白菜-结球甘蓝异附加系、异代换系、易位系等重要的遗传分析材料，为利用大白菜基因改良结球甘蓝遗传背景奠定基础。
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