公开(公告)号：CN115850365A

公开(公告)日：2023-03-28

申请号：CN202211629372.1

申请日：2022-12-19

申请人： 河北省微生物研究所有限公司

发明人： 罗同阳 ,  高庆华 ,  王玥 ,  董聪 ,  王庆庆 ,  贾振华 ,  马清河 ,  秦艳梅 ,  马金国

IPC分类号： C07K1/30 ,  C12N9/04

摘要： 本发明属于重组蛋白分离纯化制备领域，具体涉及一种添加絮凝剂辅助毕赤酵母发酵液固液分离的方法。本发明毕赤酵母发酵液由于菌体量多且黏度大，因此结合无机絮凝剂和有机絮凝剂，通过其发挥各自不同的作用达到最佳絮凝效果。

公开(公告)号：CN112481227B

公开(公告)日：2022-10-28

申请号：CN202011417612.2

申请日：2020-12-05

申请人： 河北省微生物研究所有限公司

发明人： 董聪 ,  高庆华 ,  罗同阳 ,  王玥 ,  王庆庆 ,  马金国 ,  樊晓东 ,  马清河 ,  秦艳梅

IPC分类号： C12N9/04 ,  C12N1/16 ,  C12R1/84

摘要： 本发明涉及一种发酵制备葡萄糖脱氢酶的方法，特别是指一种利用维生素B2提高FAD依赖的葡萄糖脱氢酶产量的方法。是将保藏编号为CGMCC NO.14382的巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris接种至以甘油为碳源的发酵培养液中进行培养；包括菌株培养阶段、碳源饲喂阶段、饥饿饲喂阶段、诱导表达阶段在诱导过程加维生素B2水溶液。本发明有效解决了现有技术中生产制备的葡萄糖脱氢酶酶活较低的问题，具有同体积发酵液获得更高的葡萄糖脱氢酶产量等优点。

公开(公告)号：CN114107364B

公开(公告)日：2023-07-28

申请号：CN202111579365.0

申请日：2021-12-22

申请人： 河北省微生物研究所有限公司

发明人： 高庆华 ,  罗同阳 ,  王玥 ,  董聪 ,  王庆庆 ,  王云鹏 ,  马清河 ,  马金国

IPC分类号： C12N15/81 ,  C12N15/53 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

摘要： 本发明公开了一种产漆酶重组毕赤酵母工程菌株的构建方法，涉及生物工程技术领域，包括以下步骤：S1：将漆酶基因连接到质粒载体上，得重组质粒pPIC9K‑Laccase；S2：将重组质粒pPIC9K‑Laccase转入毕赤酵母X33感受态细胞中，培养，得阳性转化子X33/pPIC9K‑Laccase感受态细胞；S3：将阳性转化子X33/pPIC9K‑Laccase感受态细胞与分子伴侣Hac1融合，培养，对所得菌株漆酶的活力进行筛选，得产漆酶重组毕赤酵母工程菌株。该方法构建的工程菌株漆酶活力高，稳定性好。

公开(公告)号：CN114107364A

公开(公告)日：2022-03-01

申请号：CN202111579365.0

申请日：2021-12-22

申请人： 河北省微生物研究所有限公司

发明人： 高庆华 ,  罗同阳 ,  王玥 ,  董聪 ,  王庆庆 ,  王云鹏 ,  马清河 ,  马金国

IPC分类号： C12N15/81 ,  C12N15/53 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

摘要： 本发明公开了一种产漆酶重组毕赤酵母工程菌株的构建方法，涉及生物工程技术领域，包括以下步骤：S1：将漆酶基因连接到质粒载体上，得重组质粒pPIC9K‑Laccase；S2：将重组质粒pPIC9K‑Laccase转入毕赤酵母X33感受态细胞中，培养，得阳性转化子X33/pPIC9K‑Laccase感受态细胞；S3：将阳性转化子X33/pPIC9K‑Laccase感受态细胞与分子伴侣Hac1融合，培养，对所得菌株漆酶的活力进行筛选，得产漆酶重组毕赤酵母工程菌株。该方法构建的工程菌株漆酶活力高，稳定性好。