公开(公告)号：CN113736811B

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202110911262.3

申请日：2021-08-10

申请人： 河北科星药业有限公司

发明人： 杨锴 ,  贾琳 ,  石虎 ,  王晓波 ,  牛志勇 ,  马兴树 ,  陈淑芳 ,  崔一

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  A61K39/108 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种促进tshs、yncE基因胞外表达的质粒及其构建方法和应用，该质粒DNA序列中包括温度敏感血凝素tsh基因、胞膜脂蛋白bor基因和囊泡蛋白yncE基因，其中，tsh基因由温度敏感血凝素转运蛋白tshβ基因和温度敏感血凝素效应蛋白tshs基因组成。该质粒的构建包括目的基因的克隆、yncE基因连接pETDuet‑1质粒、tsh基因和bor基因连接pETDuet‑1质粒及yncE2基因连接pETDuet‑1/tsh/bor质粒等步骤。本发明将上述质粒转化入表达菌株细胞，使目的蛋白共表达，用于制备基因工程菌疫苗的引物特异性强、灵敏度高。本发明的方法能够促进tshs、yncE基因胞外表达高效表达有活性蛋白，所制得疫苗防治效果突出。

公开(公告)号：CN113736811A

公开(公告)日：2021-12-03

申请号：CN202110911262.3

申请日：2021-08-10

申请人： 河北科星药业有限公司

发明人： 杨锴 ,  贾琳 ,  石虎 ,  王晓波 ,  牛志勇 ,  马兴树 ,  陈淑芳 ,  崔一

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  A61K39/108 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种促进tshs、yncE基因胞外表达的质粒及其构建方法和应用，该质粒DNA序列中包括温度敏感血凝素tsh基因、胞膜脂蛋白bor基因和囊泡蛋白yncE基因，其中，tsh基因由温度敏感血凝素转运蛋白tshβ基因和温度敏感血凝素效应蛋白tshs基因组成。该质粒的构建包括目的基因的克隆、yncE基因连接pETDuet‑1质粒、tsh基因和bor基因连接pETDuet‑1质粒及yncE2基因连接pETDuet‑1/tsh/bor质粒等步骤。本发明将上述质粒转化入表达菌株细胞，使目的蛋白共表达，用于制备基因工程菌疫苗的引物特异性强、灵敏度高。本发明的方法能够促进tshs、yncE基因胞外表达高效表达有活性蛋白，所制得疫苗防治效果突出。