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公开(公告)号:CN105368797A
公开(公告)日:2016-03-02
申请号:CN201510568539.1
申请日:2015-09-09
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种表达猪细小病毒VP2基因的重组猪伪狂犬病毒株,其特征在于:重组猪伪狂犬病毒(Herpesviridae)毒株,CCTCC NO:V201346。本发明以猪细小病毒(PPV)7909标准株DNA为模板,用PCR方法扩增出了长度为1635 bp的VP2蛋白基因片段,并在上下游引物中均引入了BamHⅠ酶切位点。将PCR产物(PPV VP2目的片段)纯化回收后连接于pMD18-T载体,成功构建了重组质粒pMD-VP2。将该重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞,对VP2基因进行大量增殖,再提取重组质粒pMD-VP2用BamHⅠ酶切后,回收VP2片段与pG质粒进行连接。
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公开(公告)号:CN105368796A
公开(公告)日:2016-03-02
申请号:CN201510568140.3
申请日:2015-09-09
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种表达PPV VP2基因和猪IL-18基因的重组猪伪狂犬病毒株:重组猪伪狂犬病毒(Herpesviridae)毒株,CCTCC NO:V201347。本发明将构建的重组伪狂犬病毒PGVP218和实验室构建的不含IL-18的重组伪狂犬病毒rPRV-VP2分别免疫小鼠,同时以DMEM培养液作为阴性对照,PRV HB98疫苗、PPV灭活苗作为阳性对照组免疫小鼠,通过进行PPV特异抗体检测、PRV抗体中和试验、外周血T淋巴细胞亚群的测定及攻毒保护试验,来考察重组病毒的免疫原性。结果显示,重组病毒PGVP218对小鼠安全有效,可诱导小鼠产生针对PRV和PPV的特异性抗体,CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群数增多。
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