公开(公告)号：CN104651389A

公开(公告)日：2015-05-27

申请号：CN201410832003.1

申请日：2014-12-29

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 邱立友 ,  刘冬忍 ,  张朝辉 ,  高玉千 ,  戚元成 ,  申进文

IPC: C12N15/80

Abstract: 本发明涉及一种脂质体介导转化双孢蘑菇菌褶的方法，具体为：1）采摘菌褶未破的幼嫩蘑菇子实体，清洁表面后，收集菌褶组织并切成块；2）将脂质体和质粒混匀，于-5－5℃放置15－60min；3）将步骤2）产物用无菌超纯水稀释1000倍，与菌褶组织块混匀，室温放置80－120min；4）将步骤3）所得产物加入到RCM固体培养基中，室温培养8－12d；5）将萌发的双孢蘑菇菌褶组织块转移到含潮霉素的PDA平板上，室温培养10－20d；6）切下新生长的菌丝块移植到PDA斜面培养，传代培养2－5次，再转接到含潮霉素的PDA平板上，能够正常生长的即为转化子。该方法具有操作简便、转化率高、转化子稳定等优点。

公开(公告)号：CN104651389B

公开(公告)日：2017-06-06

申请号：CN201410832003.1

申请日：2014-12-29

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 邱立友 ,  刘冬忍 ,  张朝辉 ,  高玉千 ,  戚元成 ,  申进文

IPC: C12N15/80

Abstract: 本发明涉及一种脂质体介导转化双孢蘑菇菌褶的方法，具体为：1）采摘菌褶未破的幼嫩蘑菇子实体，清洁表面后，收集菌褶组织并切成块；2）将脂质体和质粒混匀，于‑5－5℃放置15－60 min；3）将步骤2）产物用无菌超纯水稀释1000倍，与菌褶组织块混匀，室温放置80－120 min；4）将步骤3）所得产物加入到RCM固体培养基中，室温培养8－12d；5）将萌发的双孢蘑菇菌褶组织块转移到含潮霉素的PDA平板上，室温培养10－20d；6）切下新生长的菌丝块移植到PDA斜面培养，传代培养2－5次，再转接到含潮霉素的PDA平板上，能够正常生长的即为转化子。该方法具有操作简便、转化率高、转化子稳定等优点。