公开(公告)号：CN116375813A

公开(公告)日：2023-07-04

申请号：CN202211025619.9

申请日：2022-08-25

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 姬鹏超 ,  万博 ,  杜永坤 ,  蒋大伟 ,  姜文廷 ,  张昂克

IPC: C07K14/01 ,  C12N15/867 ,  C12N5/10 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明提供了一种非洲猪瘟病毒CD2v蛋白的制备方法，该方法为：构建重组载体pTRIP‑Pure‑CD2v‑ex，然后进行包装得到重组慢病毒液CD2v‑LVs，感染CHO‑S细胞，得到转导后的CHO‑S细胞，进行筛选后，筛选出表达量最高的高表达阳性CHO‑CD2v单克隆，PCR鉴定和蛋白纯化，得到非洲猪瘟病毒CD2v蛋白。还提供了应用，用于鉴别非洲猪瘟病毒野毒株与CD2v缺失毒株感染的间接ELISA抗体检测。本发明的非洲猪瘟病毒CD2v蛋白具有更接近天然蛋白的糖基化修饰，以该蛋白为检测抗原建立的间接ELISA检测方法，具有良好的特异性和灵敏度，且非洲猪瘟病毒CD2v蛋白细胞系的建立提高了蛋白表达量，很大程度上节约了生产成本。