公开(公告)号：CN113368112B

公开(公告)日：2022-09-27

申请号：CN202110503114.8

申请日：2021-05-10

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 万博 ,  张改平 ,  翟云云 ,  杜永坤 ,  魏战勇 ,  蒋大为 ,  王江 ,  韩世充 ,  何文瑞 ,  任子昱 ,  杨中元 ,  郭娟娟 ,  樊帅 ,  钟函 ,  陈星

IPC: A61K31/506 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明属于药物领域，具体公开了USP1‑UAF1抑制剂在制备防治猪繁殖与呼吸综合征药物中的应用，药物组合物。本发明先在化合物库中筛选出ML323，通过Western blot、Q‑PCR等验证ML323对PRRSV在细胞感染中的作用，再分别针对USP1、UAF1设计siRNA，验证下调USP1、UAF1表达对PRRSV感染的影响，同时构建USP1过表达细胞系，验证上调USP1表达对PRRSV感染的影响。实验结果表明，ML323对PRRSV在细胞中的增殖具有抑制作用，特别是ML323抑制细胞USP1、UAF1表达，抑制PRRSV N蛋白表达，抑制PRRSV ORF7mRNA表达。

公开(公告)号：CN113368112A

公开(公告)日：2021-09-10

申请号：CN202110503114.8

申请日：2021-05-10

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 万博 ,  张改平 ,  翟云云 ,  杜永坤 ,  魏战勇 ,  蒋大为 ,  王江 ,  韩世充 ,  何文瑞 ,  任子昱 ,  杨中元 ,  郭娟娟 ,  樊帅 ,  钟函 ,  陈星

IPC: A61K31/506 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明属于药物领域，具体公开了USP1‑UAF1抑制剂在制备防治猪繁殖与呼吸综合征药物中的应用，药物组合物。本发明先在化合物库中筛选出ML323，通过Western blot、Q‑PCR等验证ML323对PRRSV在细胞感染中的作用，再分别针对USP1、UAF1设计siRNA，验证下调USP1、UAF1表达对PRRSV感染的影响，同时构建USP1过表达细胞系，验证上调USP1表达对PRRSV感染的影响。实验结果表明，ML323对PRRSV在细胞中的增殖具有抑制作用，特别是ML323抑制细胞USP1、UAF1表达，抑制PRRSV N蛋白表达，抑制PRRSV ORF7mRNA表达。

公开(公告)号：CN116574846A

公开(公告)日：2023-08-11

申请号：CN202310592636.9

申请日：2023-05-24

Applicant: 河南农业大学 ,  河南格悦检测技术有限公司

Inventor： 万博 ,  郭娟娟 ,  张雨杭 ,  何文瑞 ,  韩世充 ,  张改平 ,  王亚楠 ,  胡曼 ,  王攀 ,  钟函 ,  柳顺达 ,  郭科威 ,  凌向辉 ,  付云龙 ,  韩光晖 ,  宋智慧

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体公开了一种检测猪星状病毒5型的实时荧光定量PCR试剂及方法。本发明以猪星状病毒5型毒株的ORF1ab基因的高度保守区作为靶基因，经鉴定灵敏性后筛选出一对PCR引物，并据此设计合成TaqMan探针，制备用于检测猪星状病毒5型的实时荧光定量PCR试剂。经验证，除PAstV‑5型外，本发明的检测试剂及方法对PRV、PPV、TGEV、PEDV病毒等均没有特征性扩增曲线，特异性和重复性良好，可检测到最低浓度为10copies/μL的病毒RNA，比常规RT‑PCR方法的敏感性高100倍，对临床采集的100份阳性待检病料进行检测，符合率良好。

公开(公告)号：CN116396959A

公开(公告)日：2023-07-07

申请号：CN202310061705.3

申请日：2023-01-20

Applicant: 河南农业大学 ,  河南格悦检测技术有限公司

Inventor： 万博 ,  张改平 ,  郭娟娟 ,  张雨杭 ,  何文瑞 ,  韩世充 ,  王亚楠 ,  李华玮 ,  王攀 ,  钟函 ,  任豪杰 ,  柳顺达 ,  付云龙

IPC: C12N15/11 ,  C12N5/20 ,  C07K16/10 ,  C12P21/08 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本申请涉及一种抗猪星状病毒五型PAstV5单克隆抗体、引物、杂交瘤细胞株、制备、应用，属于猪星状病毒检测技术领域。本发明的抗猪星状病毒五型PAstV5单克隆抗体制备用杂交瘤细胞株的制备方法包括如下步骤：1)采用pET32a‑PAstV5‑Cap‑1融合蛋白对小鼠进行免疫；2)取步骤1)中免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞；3)对步骤2)制得的杂交瘤细胞进行筛选，得到阳性杂交瘤细胞；4)对步骤3)筛选得到的阳性杂交瘤细胞进行亚克隆，筛选即得。该细胞株能够稳定的分泌抗体，制得的PAstV5单克隆抗体ELISA效价可达到50万倍以上，并可应用于ELISA、WB、IFA中对PAstV5的检测。

公开(公告)号：CN116660528A

公开(公告)日：2023-08-29

申请号：CN202310592686.7

申请日：2023-05-24

Applicant: 河南农业大学 ,  河南格悦检测技术有限公司

Inventor： 万博 ,  郭娟娟 ,  张雨杭 ,  何文瑞 ,  韩世充 ,  张改平 ,  王亚楠 ,  胡曼 ,  王攀 ,  钟函 ,  柳顺达 ,  郭科威 ,  凌向辉 ,  付云龙 ,  韩光晖 ,  宋智慧

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/536 ,  G01N33/535 ,  G01N21/31

Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种猪星状病毒5型的间接ELISA检测试剂及方法。本发明的猪星状病毒5型的间接ELISA检测试剂包含包被抗原的酶标板、酶标二抗、显色液、终止液、稀释液、洗涤液、阳性血清对照、阴性血清对照等中的一种或多种，可用于猪血清中PAstV5抗体的快速、准确定性。本发明提供的间接ELISA检测方法，通过设计抗原序列，优化包被液与包被条件、封闭液与封闭条件、血清稀释度、酶标二抗稀释度、血清与酶标二抗的作用时间、显色条件等，提高了检测的敏感性、特异性和稳定性，为PAstV病的血清学检测提供了重要方法。