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公开(公告)号：CN118516275A
公开(公告)日：2024-08-20
申请号：CN202410767701.1
申请日：2024-06-14
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： C12N1/20 , C02F3/34 , C12R1/22 , C02F101/16 , C02F103/20
摘要： 本申请属于农业污染物降解处理技术领域，具体涉及一株克雷伯菌N5菌株及其在氨氮降解中应用。所述克雷伯菌(Klebsiella oxytoca)N5菌株，其保藏号为CCTCC NO：M 2024658。该菌株在低氨氮浓度条件下，氨氮降解率最高可达96.40%（氨氮浓度106 mg/L条件下），表现出较好应用前景，尤其是在高浓度氨氮条件下，也表现出较好的氨氮降解效果（742 mg/L、848mg/L中氨氮降解率分别达72%、65.43%）。这一结果表明该菌株对于氨氮具有较好的耐受性和较好的利用性。这为养殖场等高浓度氨氮粪污的有效处理提供了可能，对于相关农业污废物处理具有较好的实用价值。
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公开(公告)号：CN106834324B
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201710038807.8
申请日：2017-01-19
申请人： 河南农业大学
摘要： 本申请属于基因工程技术领域，具体涉及一种能促进蛋白可溶性表达及提高蛋白表达量的重组表达载体。重组表达载体pET21b‑HEMBP（Pyr）为原核表达载体，在pET21b的基础上双酶切后，重组连接有HE‑MBP（Pyr）‑TEV序列；具体通过构建重组质粒pUC57‑HEMBP（Pyr）‑Nb、酶切、连接、转化、筛选等步骤构建获得。该重组表达载体在蛋白表达中的应用，可用于表达单克隆抗体、抗原、多聚蛋白、c‑di‑GMP和c‑GAMP合成酶等多种蛋白。本申请通过构建改造、构建新的重组表达载体，可以较好地提高蛋白表达量和提高蛋白的可溶度，在基因工程、蛋白工程中具有较好地实用价值和推广应用意义。
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公开(公告)号：CN104962561A
公开(公告)日：2015-10-07
申请号：CN201510357003.5
申请日：2015-06-25
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： C12N15/115 , C12N15/10 , C12Q1/68
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体设计一种酶促cGAMP生成量检测所用RNA适配体及检测方法。该RNA适配体包括spinach2，VC2/g20a和tRNA三部分，碱基序列如SEQ ID NO.1 所示。相较于现有的cGAMP生成量检测方法，本发明的主要技术优点体现在：1、本发明中的RNA适配体通过体外转录获得，无需切胶纯化，较好的保证了RNA适配体的完整性；2、相较于HPLC法，检测成本低廉，操作简便，相较于TLC法，操作安全无风险，检测样品数量大，可实现大规模样品检测；3、本发明中的RNA适配体可进一步纯化或者与其他试剂完善配制成标准化检测试剂盒，便于检测使用。
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公开(公告)号：CN104946705B
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201510281173.X
申请日：2015-05-28
申请人： 河南农业大学
摘要： 本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种采用固定化DisA蛋白连续生产c‑di‑AMP的方法。该方法步骤：1、DisA基因改造，通过基因工程手段，将DisA基因与cbm基因融合构建重组质粒载体；2、重组质粒转化，CBM‑DAC融合蛋白的表达；3、一步纯化和固定化DAC酶；4、连续化生产c‑di‑AMP；5、反应产物分离浓缩与纯化。本发明特异性的利用了CBM结构域与纤维素结合但无水解功能的特点，工艺较为成熟，生产成本低廉，环境友好，所制备的DAC酶类型多样，来源广泛，而且浓度、纯度较高，酶促反应效率较高，因而具有较好的开发应用价值。
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公开(公告)号：CN106834324A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710038807.8
申请日：2017-01-19
申请人： 河南农业大学
摘要： 本申请属于基因工程技术领域，具体涉及一种能促进蛋白可溶性表达及提高蛋白表达量的重组表达载体。重组表达载体pET21b‑HEMBP（Pyr）为原核表达载体，在pET21b的基础上双酶切后，重组连接有HE‑MBP（Pyr）‑TEV 序列；具体通过构建重组质粒pUC57‑HEMBP（Pyr）‑Nb、酶切、连接、转化、筛选等步骤构建获得。该重组表达载体在蛋白表达中的应用，可用于表达单克隆抗体、抗原、多聚蛋白、c‑di‑GMP和c‑GAMP合成酶等多种蛋白。本申请通过构建改造、构建新的重组表达载体，可以较好地提高蛋白表达量和提高蛋白的可溶度，在基因工程、蛋白工程中具有较好地实用价值和推广应用意义。
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公开(公告)号：CN104946705A
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201510281173.X
申请日：2015-05-28
申请人： 河南农业大学
摘要： 本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种采用固定化DisA蛋白连续生产c-di-AMP的方法。该方法步骤：1、DisA基因改造，通过基因工程手段，将DisA基因与cbm基因融合构建重组质粒载体；2、重组质粒转化，CBM-DAC融合蛋白的表达；3、一步纯化和固定化DAC酶；4、连续化生产c-di-AMP；5、反应产物分离浓缩与纯化。本发明特异性的利用了CBM结构域与纤维素结合但无水解功能的特点，工艺较为成熟，生产成本低廉，环境友好，所制备的DAC酶类型多样，来源广泛，而且浓度、纯度较高，酶促反应效率较高，因而具有较好的开发应用价值。
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公开(公告)号：CN117904058A
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202410125280.2
申请日：2024-01-30
申请人： 河南农业大学
摘要： 本申请属于致病微生物防治技术领域，具体涉及一株沙门氏菌噬菌体及其应用。所述沙门氏菌噬菌体保藏编号为CCTCC NO:M 20231665，已于2023年9月11日保藏于地址为中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心。该噬菌体可用于制备沙门菌灭菌药剂。本申请中，以致病性的沙门氏菌作为宿主菌，通过对部分生态环境中噬菌体筛选、鉴定，获得了一株具有较好广谱性、且生长适应条件较为宽泛的筛菌体。初步实验结果表明，筛选所得噬菌体表现出较好的灭菌效果。因此，基于此噬菌体，可为相关沙门菌防控药剂开发、进而为相关传染病防控奠定良好的技术基础。
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公开(公告)号：CN117322516A
公开(公告)日：2024-01-02
申请号：CN202311539149.2
申请日：2023-11-17
申请人： 河南农业大学 , 河南牧一动物药业有限公司
摘要： 本发明涉及一种黄芪的发酵方法、发酵黄芪提取液或发酵黄芪粉的应用，属于饲料添加剂技术领域。本发明的发酵方法包括以下步骤：在由黄芪饮片制成的黄芪粉与水的混合物中接入发酵菌种，密封后在30～37℃进行发酵，发酵结束后得到悬浮液；将得到的悬浮液进行固液分离，得到发酵黄芪提取液和发酵黄芪粉；发酵菌种为植物乳杆菌菌种和屎肠球菌菌种，植物乳杆菌菌种和屎肠球菌菌种的活菌数之比为0.5～2:1。本发明的方法采用固液混合发酵，解决了传统黄芪制剂用量大、作用效果缓慢、利用率低的问题，并且将发酵好的混悬液进行固液分离，分别得到两种制剂，均可用做饲料添加剂，不产生药渣废弃物，是一种环境友好型的发酵中药制备方法。
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