公开(公告)号：CN107058188A

公开(公告)日：2017-08-18

申请号：CN201710398199.1

申请日：2017-05-31

申请人： 河南工业大学 ,  郑州金百合生物工程有限公司

发明人： 王卫国 ,  赵永亮 ,  杜灵广 ,  古亚楠 ,  管景帅 ,  苑旺 ,  王化朋 ,  王卫 ,  张仟伟 ,  陶宜辰 ,  王丽洁 ,  胡晓伟 ,  林强 ,  尹曼

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12R1/07

CPC分类号： C12N1/20

摘要： 本发明公开了一种纳豆激酶高产菌株的筛选方法，该方法是依据纳豆激酶的理化特性和纳豆芽孢杆菌的生长代谢特性通过一种选择性培养基的设计与应用，借助于高通量筛选和OD值的快速检测等技术以实现快速准确的纳豆激酶高产菌株的筛选。本发明与传统方法相比，具有方向明确，目标精准，工作量小，用时短，效率高，成功率大等优点，不仅使其工作量大、效率低，筛选的随机性大、目标性差的缺点得以克服，还使筛选周期明显缩短；与前沿的基因定点突变筛选法相比，不仅没有降低筛选的目标性和方向性，还节省了大量的人力物力财力等，同时，也大大降低了筛选的难度。该方法操作简单，方便快捷，可广泛用于丝氨酸蛋白酶类产生菌的快速筛选。

公开(公告)号：CN106995810A

公开(公告)日：2017-08-01

申请号：CN201710397584.4

申请日：2017-05-31

申请人： 河南工业大学 ,  郑州金百合生物工程有限公司

发明人： 赵永亮 ,  王卫国 ,  杜灵广 ,  古亚楠 ,  管景帅 ,  苑旺 ,  王丽洁 ,  王卫 ,  张仟伟 ,  陶宜辰 ,  林强 ,  胡晓伟

IPC分类号： C12N9/54 ,  C12R1/07

CPC分类号： C12N9/54

摘要： 本发明公开了一种固态发酵法制备纳豆激酶的方法，包括：大豆预处理、培养基制备、种子制备、接种、变温发酵、干燥、粉碎等单元操作。该方法是集原料预处理、培养基与种子制备、接种、发酵、干燥和粉碎等技术为一体，整个过程是在洁净或无菌环境中进行，不会产生跑、冒、滴、漏等不良现象，易于达到GMP要求。与传统法相比，本发明具有如下特点：巧妙的原料预处理和多组分培养基的组方设计，为纳豆激酶产生菌的生长提供了良好的物质基础；表面活性剂的采用，使纳豆激酶的产生与分泌明显提高；变温发酵方法及工艺的应用，使纳豆激酶的产率提高10‑45%；方法科学，工艺合理先进，利于环保。本发明可广泛用于纳豆激酶及其它相关产品的研发和生产。

公开(公告)号：CN107129977A

公开(公告)日：2017-09-05

申请号：CN201710397835.9

申请日：2017-05-31

申请人： 河南工业大学 ,  郑州金百合生物工程有限公司

发明人： 赵永亮 ,  王卫国 ,  杜灵广 ,  王化朋 ,  陶宜辰 ,  张仟伟 ,  王卫 ,  管景帅 ,  古亚楠 ,  王丽洁 ,  林强 ,  胡晓伟 ,  尹曼 ,  苑旺

IPC分类号： C12N9/54 ,  C12R1/07

CPC分类号： C12N9/54

摘要： 本发明公开了一种生产纳豆激酶的培养基及其制备方法和用途与用法，它是根据纳豆菌的生长生理特性以及纳豆激酶的产生、分泌特性、分子组成和理化特性等进行综合组方设计，在培养基原料组分选择和含量配比上，基于安全性第一原则，除了食用大豆外，其它全为食品级或医药级以上的生化类或医药级组分，所以，发酵后仅做简单后处理或不做任何处理即可作为产品使用；该培养基可做为生产纳豆激酶的通用培养基，该培养基既可用于固态法生产纳豆激酶，又可用于液态法生产纳豆激酶，经过适当调整，该培养基还可用于实验室中纳豆激酶产生菌的富集和培养。分类制备法既有利于提高灭菌效果，还可降低养分的损失。本发明培养基安全性高，适用面广；使用方便，效果优良。

公开(公告)号：CN106987577A

公开(公告)日：2017-07-28

申请号：CN201710398211.9

申请日：2017-05-31

申请人： 河南工业大学 ,  郑州金百合生物工程有限公司

发明人： 王卫国 ,  赵永亮 ,  杜灵广 ,  管景帅 ,  陶宜辰 ,  林强 ,  胡晓伟 ,  王丽洁 ,  苑旺 ,  古亚楠 ,  张仟伟 ,  王卫

IPC分类号： C12N9/54 ,  C12R1/07

CPC分类号： C12N9/54

摘要： 本发明公开了一种液态发酵法制备纳豆激酶的方法，包括：菌种活化、培养基制备、种子制备、接种、变温发酵、后处理等单元操作。该方法是集菌种活化、培养基制备、种子制备、接种、发酵、后处理等为一体，整个过程是在洁净或无菌环境中进行，不会产生跑、冒、滴、漏等不良现象，易于达到GMP要求。与传统法相比，本发明具有如下特点：巧妙的多组分培养基组方设计，为纳豆激酶产生菌的生长提供了良好的物质基础；表面活性剂的采用，使纳豆激酶的产生与分泌明显提高；变温发酵方法及工艺的应用，使纳豆激酶的产率提高6‑38%；工艺合理先进，便于扩大再生产，产量和质量明显提高，且利于环保。本发明可广泛用于纳豆激酶及其它相关产品的研发和生产。

公开(公告)号：CN106995810B

公开(公告)日：2021-05-07

申请号：CN201710397584.4

申请日：2017-05-31

申请人： 河南工业大学 ,  郑州金百合生物工程有限公司

发明人： 赵永亮 ,  王卫国 ,  杜灵广 ,  古亚楠 ,  管景帅 ,  苑旺 ,  王丽洁 ,  王卫 ,  张仟伟 ,  陶宜辰 ,  林强 ,  胡晓伟

IPC分类号： C12N9/54 ,  C12R1/07

摘要： 本发明公开了一种固态发酵法制备纳豆激酶的方法，包括：大豆预处理、培养基制备、种子制备、接种、变温发酵、干燥、粉碎等单元操作。该方法是集原料预处理、培养基与种子制备、接种、发酵、干燥和粉碎等技术为一体，整个过程是在洁净或无菌环境中进行，不会产生跑、冒、滴、漏等不良现象，易于达到GMP要求。与传统法相比，本发明具有如下特点：巧妙的原料预处理和多组分培养基的组方设计，为纳豆激酶产生菌的生长提供了良好的物质基础；表面活性剂的采用，使纳豆激酶的产生与分泌明显提高；变温发酵方法及工艺的应用，使纳豆激酶的产率提高10‑45%；方法科学，工艺合理先进，利于环保。本发明可广泛用于纳豆激酶及其它相关产品的研发和生产。