-
公开(公告)号：CN108931513A
公开(公告)日：2018-12-04
申请号：CN201810989134.9
申请日：2018-08-28
申请人： 河南省医药科学研究院
摘要： 本发明涉及一种体外检测MUSK-Ab和LRP4-Ab的方法及试剂盒。该方法包括以下步骤：取293T细胞，将293T细胞转染pCMV6-AC-GFP-MuSK重组质粒和/或pCMV6-AC-GFP-LRP4重组质粒；向转染pCMV6-AC-GFP-MuSK重组质粒的转染细胞和/或转染pCMV6-AC-GFP-LRP4重组质粒的转染细胞添加多聚甲醛后固定15～30min；磷酸盐缓冲液洗涤之后添加牛血清白蛋白和TritonX-100进行封闭、通透2～3h；取待测血清，添加封闭、通透后的pCMV6-AC-GFP-MuSK重组质粒的转染细胞和/或封闭、通透的pCMV6-AC-GFP-LRP4重组质粒的转染细胞中，24～28℃下孵育45min～2h，磷酸盐缓冲液洗涤之后加入Alexa FluorTM568标记的羊抗人IgG，24～28℃下孵育45min～2h，磷酸盐缓冲液洗涤后使用荧光显微镜的蓝色激发光和绿色激发光激发，观察并拍照记录。所使用试剂均为常规试剂，不需要依赖价格昂贵的试剂盒，检测成本较低。
-
公开(公告)号：CN108931513B
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN201810989134.9
申请日：2018-08-28
申请人： 河南省医药科学研究院
摘要： 本发明涉及一种体外检测MUSK‑Ab和LRP4‑Ab的方法及试剂盒。该方法包括以下步骤：取293T细胞，将293T细胞转染pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒和/或pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒；向转染pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒的转染细胞和/或转染pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒的转染细胞添加多聚甲醛后固定15～30min；磷酸盐缓冲液洗涤之后添加牛血清白蛋白和TritonX‑100进行封闭、通透2～3h；取待测血清，添加封闭、通透后的pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒的转染细胞和/或封闭、通透的pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒的转染细胞中，24～28℃下孵育45min～2h，磷酸盐缓冲液洗涤之后加入Alexa FluorTM568标记的羊抗人IgG，24～28℃下孵育45min～2h，磷酸盐缓冲液洗涤后使用荧光显微镜的蓝色激发光和绿色激发光激发，观察并拍照记录。所使用试剂均为常规试剂，不需要依赖价格昂贵的试剂盒，检测成本较低。
-
公开(公告)号：CN112266934A
公开(公告)日：2021-01-26
申请号：CN202011178314.2
申请日：2020-10-29
申请人： 河南省医药科学研究院
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/65 , C12N15/12 , G01N33/564 , G01N33/554
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及用于表达Agrin蛋白的重组质粒及其构建方法和应用。本发明通过重叠延伸RT‑PCR获得Agrin全长基因片段，重组至真核表达质粒上，从而可以高效地在真核细胞中表达Agrin蛋白，并且以上述表达的Agrin蛋白作为抗原与血清中的Agrin抗体进行高效结合，所使用试剂均为常规试剂，检测成本较低，并且有助于重症肌无力致病机制研究的开展并且具有作为疾病生物标志物的潜在功能，为后续辅助患者精准诊疗提供指导。
-
公开(公告)号：CN110747229A
公开(公告)日：2020-02-04
申请号：CN201911153835.X
申请日：2019-11-22
申请人： 河南省医药科学研究院
摘要： 本发明涉及一种用于表达THBS4蛋白的真核表达质粒、构建方法及应用，该真核表达质粒含有用于表达THBS4蛋白的基因片段，该用于表达THBS4蛋白的真核表达质粒的构建方法包括以下步骤：对含有THBS4基因的质粒进行双酶切，电泳并胶回收，得到回收产物THBS4目的片段；对pENTER质粒进行双酶切，电泳并胶回收，得到pENTER载体片段；将THBS4目的片段和pENTER载体片段使用T4连接酶进行连接，得到连接产物；将连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞并扩大培养，提取质粒即得。可用于THBS4蛋白表达，从而得到纯化的THBS4蛋白，有助于后续MG这类慢性肌肉疾病致病机制的研究的开展并且具有作为疾病生物标志物的潜在功能，为后续辅助患者的精准诊疗提供指导。
-
-
-
搜索结果
4 条记录 (耗时 0.026 秒)
