鲈鱼鳜鱼病原体多联检测引物组合、微流控芯片和试剂盒

    公开(公告)号:CN117487961A

    公开(公告)日:2024-02-02

    申请号:CN202310851996.6

    申请日:2023-07-12

    摘要: 本发明公开了一种鲈鱼鳜鱼病原体多联检测引物组合、微流控芯片和试剂盒,属于生物技术领域。该试剂盒包括流行性造血器官坏死病毒LAMP引物组、鳜鱼弹状病毒LAMP引物组、大口黑鲈虹彩病毒LAMP引物组、细胞肿大病毒属虹彩病毒LAMP引物组、一种多通道微流控芯片、DNA聚合酶,逆转录酶、2×反应缓冲液,荧光染料,矿物油,标准阳性模板和阴性对照。本发明将微流控技术与等温扩增技术相结合,实现一次检测中同时对四项样品指标进行检测,具有高通量、特异性强、实验重复性好、操作便捷快速的优点。可用于鲈鱼鳜鱼流行性造血器官坏死病毒、鳜鱼弹状病毒、大口黑鲈虹彩病毒、细胞肿大病毒属虹彩病毒病害的早期筛查,精准诊断和疫情监测。

    一种基于微滴式数字PCR技术的大口黑鲈虹彩病毒检测方法

    公开(公告)号:CN117106977A

    公开(公告)日:2023-11-24

    申请号:CN202311064232.9

    申请日:2023-08-23

    摘要: 本发明公开了一种基于ddPCR方法检测大口黑鲈虹彩病毒(Largemouth bass ranavirus,LMBV)的特异性引物、探针和方法。所述特异性引物包括序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物,序列如SEQ ID NO.2所示的反向引物和序列如SEQ ID NO.3所示的探针。在本发明中,根据LMBV的主要衣壳蛋白(Major Capsid Protein,MCP)基因序列设计引物和探针,并通过反应条件的优化,最终建立起基于ddPCR的LMBV检测方法,特异性强、灵敏性高、重复性好。在对临床样品检测的应用中,表现出比荧光定量PCR更高的灵敏度。本发明方法为LMBV检测提供了更精准、高效的检测方案,可广泛应用于科研和医学检测相关领域。

    一种精确鉴定杂交河鲀个体性别的SNP位点和引物及其方法

    公开(公告)号:CN117265087A

    公开(公告)日:2023-12-22

    申请号:CN202311305167.4

    申请日:2023-10-10

    申请人: 河海大学

    摘要: 本发明公开了一种精确鉴定杂交河鲀个体性别的SNP位点和引物及其方法,所述SNP位点的碱基序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示,所述引物碱基序列分别如SEQ ID NO.3‑4所示。本发明通过对杂交河鲀群体中雌雄个体基因组分析获得了一个雌雄特异的SNP位点,在该SNP位点上下游设计引物,在一个杂交河鲀群体的基因组中扩增,测序,鉴定该SNP位点是性别特异的,进一步通过HRM检测即可鉴定雌雄,雄性个体为双峰曲线,雌性个体为单峰曲线。本发明提供的精准鉴定杂交河鲀个体性别的方法,结果准确,容易掌握,相较于传统的PCR检测法检测结果更加精准,无需重复实验,且不会出现检测结果错判的情况。

    一种杂交河鲀培育装置及培育方法

    公开(公告)号:CN116918730A

    公开(公告)日:2023-10-24

    申请号:CN202310893643.2

    申请日:2023-07-20

    申请人: 河海大学

    摘要: 本发明公开了一种杂交河鲀培育装置及培育方法,所述用于培育杂交河鲀的装置,包括透光聚乙烯孵化器和开口培育装置;所述透光聚乙烯孵化器包括孵化器主体、与孵化器主体底端依次相连的底端爆气口、转接口、爆气管道、气体控制阀和气泵,所述孵化器主体顶端设有筛网。本发明有效解决实验室内杂交河鲀鱼卵孵化困难问题;有效提升实验室孵化量达1000‑10000枚;间歇换水充气孵化装置有效保证孵化水体理化因素,稳定提升鱼卵孵化质量及效率;温控循环水培育装置有效提升实验室内杂交河鲀养殖量、养殖成活率及稳定性。

    暗纹东方鲀抗菌肽ToNK-lysin及其应用

    公开(公告)号:CN115925863A

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202211483574.X

    申请日:2022-11-24

    申请人: 河海大学

    摘要: 本发明公开了暗纹东方鲀抗菌肽ToNK‑lysin,其氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。本发明利用体外重组表达技术获得了暗纹东方鲀抗菌肽ToNK‑lysin,该重组蛋白对河鲀头肾细胞没有细胞毒性作用,并能显著性地清除河鲀体内的哈维氏弧菌;此外,ToNK‑lysin重组蛋白能够降解大肠杆菌和哈维氏弧菌的基因组,并显著性地抑制它们的生长。作为一种有效的免疫效应分子,ToNK‑lysin蛋白在开发抗菌类药物、新型免疫制剂以及饲料添加剂等方面具有潜在应用价值。

    一种暗纹东方鲀精巢细胞系及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN114807011A

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN202210370925.X

    申请日:2022-04-11

    申请人: 河海大学

    摘要: 本发明公开了一种暗纹东方鲀精巢细胞系及其构建方法和应用,采用物理剪切配合胰酶消化法分离精巢组织细胞,进行原代培养,并在传代培养中,利用富营养培养基传代培养,继而成功构建了暗纹东方鲀精巢细胞系。本发明提供的暗纹东方鲀精巢细胞呈现上皮细胞形态,已连续培养超过100代,可提供大量的暗纹东方鲀精巢细胞,且细胞能维持良好的生长状态,可以对其进行冷冻保存。本发明提供的暗纹东方鲀精巢细胞系可直接用于暗纹东方鲀性别分化和发育相关基因表达调控研究,还可以作为暗纹东方鲀功能基因的体外研究平台。建立暗纹东方鲀精巢细胞系的应用价值显著,不仅有利于河鲀性别分化和发育相关领域的科学研究,也有利于促进暗纹东方鲀养殖产业的发展。

    一种纯天然紫菜酒的制作方法
    8.
    发明公开

    公开(公告)号:CN111778130A

    公开(公告)日:2020-10-16

    申请号:CN202010683556.0

    申请日:2020-07-15

    申请人: 河海大学

    IPC分类号: C12G3/055 C12G3/06

    摘要: 本发明公开了一种纯天然紫菜酒的制作方法,将紫菜粉加入到食品级酒中浸泡,过滤去除紫菜粉,获得含有纯天然紫菜的酒,再经无菌膜过滤后密封避光保存。本发明将紫菜添加到酒中,紫菜破壁后其内的牛磺酸等活性物质被充分释放出来,在酒精的引导下,更加容易被人体吸收,进而增强人体抗衰老和免疫能力。此外,本发明的紫菜酒口感可以依据个人喜好进行勾兑和调味。适宜工业化生产。

    一种快速鉴定暗纹东方鲀个体性别的SNP位点和引物及其方法

    公开(公告)号:CN110724735A

    公开(公告)日:2020-01-24

    申请号:CN201911078703.5

    申请日:2019-11-06

    申请人: 河海大学

    摘要: 本发明公开了一种快速鉴定暗纹东方鲀个体性别的SNP位点和引物及其方法,SNP位点的碱基序列如SEQ ID NO.1所示,本发明通过对暗纹东方鲀三个独立遗传群体的雌雄个体基因组分析,获得了一个雌雄特异的SNP位点,并针对该位点设计了两对雄性特异的PCR引物,用于鉴定暗纹东方鲀个体的雌雄性别;通过改进DNA提取方法,可在10分钟内完成鳍条DNA提取,简单快速,再通过PCR扩增与琼脂糖凝胶电泳,具有DNA条带的为雄性个体,反之为雌性个体,易于区分。本发明具有速度快、准确性高、操作简便、成本低等特点,使用该方法可在2小时内完成对暗纹东方鲀遗传性别的鉴定。

    斑点叉尾鮰疱疹病毒的快速检测引物、试剂盒、方法及其应用

    公开(公告)号:CN110628952A

    公开(公告)日:2019-12-31

    申请号:CN201911021029.7

    申请日:2019-10-25

    申请人: 河海大学

    发明人: 郝凯 赵哲

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/6851 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了一种斑点叉尾鮰疱疹病毒的快速检测引物、试剂盒、方法及其应用,属于生物技术领域。本发明包括PCR引物和探针设计、DNA模板制备、PCR扩增及通过荧光信号进行结果判断。本发明针对鮰疱疹病毒相应基因保守序列设计特异性的引物和taqMan探针,经过充分优化,独创引物探针、反应条件,从而建立一种快速可靠的荧光定量PCR检测斑点叉尾鮰疱疹病毒的方法。本发明实现了对DNA模板的定量,具有操作简单、检测快速、特异性好、灵敏度高和结果可靠等优点,能在斑点叉尾鮰疱疹病毒病早期快速诊断和实时监测方面发挥重要作用。