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公开(公告)号：CN117384285A
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202311466172.3
申请日：2023-11-07
Abstract: 本发明提供应用DNA链置换反应纯化微量蛋白‑核酸偶联物的方法。通过将链霉亲和素磁珠与Biotin‑CT混合得到SA‑Biotin‑CT，将蛋白‑核酸偶联粗产物与SA‑Biotin‑CT孵育得到SA‑Biotin‑CT‑DNA‑Protein产物，并用洗脱缓冲液洗涤以去除未偶联核酸的蛋白，将Help‑CT与SA‑Biotin‑CT‑DNA‑Protein产物孵育后收集上清液获得。本发明的纯化方法可以在极小的反应体系内完成纯化，而且该纯化方法操作过程简单，条件温和，得到的蛋白‑核酸偶联物依然保留有良好的蛋白活性，极大程度的降低了蛋白‑核酸偶联物的纯化成本，提高了纯化效率。
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公开(公告)号：CN117250363A
公开(公告)日：2023-12-19
申请号：CN202310846283.0
申请日：2023-07-11
Abstract: 本发明提供一种甲状旁腺激素检测及甲状旁腺术中成像检测试剂盒，由纳米抗体‑核酸偶联产物、杂交链式反应引物、反应液、洗涤液、二抗、化学发光反应液、标准品组成。本发明合成了纳米抗体‑核酸偶联产物，能特异性识别甲状旁腺激素，与HP1‑FAM和HP2混合后触发杂交链式反应，放大荧光信号。加入Anti‑FITC‑HRP后，催化Luminol H2O2反应，通过酶标仪检测化学发光信号实现甲状旁腺激素的检测和定量。该方法仅需5分钟即可通过荧光信号分辨出甲状旁腺组织，具有操作方便、毒性小、特异性好、灵敏度高等特点。本发明可用于血清中甲状旁腺激素定量检测及甲状旁腺组织术中成像，并有望用于甲状旁腺功能亢进辅助诊断。
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公开(公告)号：CN112538468B
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN202011449794.1
申请日：2020-12-09
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供一种Perakine还原酶突变体及其应用，该突变体由野生型Perakine还原酶氨基酸序列在126位或127位发生以下单突变或126位和127位组合双突变获得：H126G/R/I/C/P/K/N/W/A/Y、R127M/P/N/S/F，其中“/”代表“或”。本发明在晶体三维结构和序列比对基础上，采用定点饱和突变技术对Perakine还原酶行分子改造，筛选获得具选择性还原烯酮双键的突变体。本发明作为催化剂用于选择性还原烯酮双键的方法具反应步骤简单、反应条件温和、环境友好、催化效率高、酶纯化简单、稳定性好、立体选择性强等优点，在烯酮双键还原及相关饱和酮类药物的合成领域具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN112538468A
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN202011449794.1
申请日：2020-12-09
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供一种Perakine还原酶突变体及其应用，该突变体由野生型Perakine还原酶氨基酸序列在126位或127位发生以下单突变或126位和127位组合双突变获得：H126G/R/I/C/P/K/N/W/A/Y、R127M/P/N/S/F，其中“/”代表“或”。本发明在晶体三维结构和序列比对基础上，采用定点饱和突变技术对Perakine还原酶行分子改造，筛选获得具选择性还原烯酮双键的突变体。本发明作为催化剂用于选择性还原烯酮双键的方法具反应步骤简单、反应条件温和、环境友好、催化效率高、酶纯化简单、稳定性好、立体选择性强等优点，在烯酮双键还原及相关饱和酮类药物的合成领域具有良好的应用前景。
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