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公开(公告)号：CN118531095A
公开(公告)日：2024-08-23
申请号：CN202410736309.0
申请日：2024-06-07
申请人： 浙江大学
IPC分类号： C12Q1/6851 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了用于RPA定量检测四环素抗性基因tetA的核酸分子及检测方法，属于分子生物学领域。该检测方法以含有四环素抗性基因tetA待测物的序列为DNA模板，利用核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的正向引物tetA‑F和核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的反向引物tetA‑R对DNA模板进行重组酶聚合酶扩增反应，得到扩增产物；扩增产物继续与核苷酸序列如SEQ ID No.3所示的单链荧光探针tetA‑P互补配对后激活核酸外切酶活性，得到用于定量判读的荧光扩增曲线。选取荧光扩增曲线中荧光斜率大于100的时间点作为扩增起始时间T，将起始时间T代入tetA质粒标准曲线中，定量计算得到tetA的拷贝数。该方法特异性强、检测速度快、仪器依赖性低，为抗生素抗性基因的现场检测提供技术支持。
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公开(公告)号：CN111751182B
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202010601576.9
申请日：2020-06-28
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明提供了一种用于不同污染情景微域土壤采样的装置及其方法，该装置包括无盖筒体和若干圆形隔层，圆形隔层可拆卸式水平固定于无盖筒体的中空内腔，圆形隔层包括内圆环、外圆环和承土网，内圆环和外圆环将圆形隔层划分为若干环形镂空空间，内圆环和外圆环均具有一定厚度；圆形隔层的底部贴合固定有承土网，承土网上固定有经过中心的若干辐条。本装置在使用时可模拟不同污染方式和不同降雨程度，同时实现对不同污染情景水平方向和垂直方向毫米级微域土壤的采样，满足土壤理化指标测定、污染物浓度监测和微生物相分析的要求，以期探明污染物在微域空间水平和垂直方向浓度梯度特征，解析微域空间内污染物对土壤理化性质和微生物的影响。
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公开(公告)号：CN110004047B
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN201910251288.2
申请日：2019-03-29
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明公开了一种富集反硝化型厌氧甲烷氧化微生物的串联管式中空纤维膜装置及其方法。它包括串联反应器系统、进出水系统、进出气系统。串联反应器系统由一定数量的管式中空纤维膜反应器串联组成。单根管式中空纤维膜反应器包括筒体、中空纤维膜束。进水系统包括进水罐、蠕动泵和进水管；出水系统包括溢流管、溢流瓶、出水管和出水罐。进气系统包括甲烷钢瓶、干路进气管和支路进气管；出气系统包括支路出气管、支路出气阀、出气汇流板、干路出气管和气袋。本发明利用管程的变化可以实现溶解氧浓度的梯度消减，反应器前端的好氧微生物消耗水体中的溶解氧，为后端厌氧甲烷氧化微生物提供厌氧条件，从而有效富集反硝化型厌氧甲烷氧化微生物。
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公开(公告)号：CN112210481B
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202011145277.5
申请日：2020-10-23
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明公开了一种适用于不同温度的微生物原位培养芯片及其方法。芯片包括第一固定板、培养板、接触板和第二固定板；第一固定板上开设有贯通板体厚度方向的若干第一通孔，培养板上开设有贯通板体厚度方向的若干第二通孔；接触板上开设有贯通板体厚度方向的接触室；第二固定板的上板面固定有若干用于承装固体培养基或液体培养基的筒状培养室。本发明通过培养板结构优选，依据高温和低温及常温生境需求，进行液体和固体培养基切换，拓展了原位培养芯片适用温度，实现不同温度下微生物原位培养，打破传统原位培养芯片的温度局限性，为好氧堆肥、厌氧发酵等高温介质下功能微生物原位培养提供基础。
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公开(公告)号：CN106675999B
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN201710042228.0
申请日：2017-01-20
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明公开了一种海洋comammox富集培养装置和方法。培养基供应桶通过反应器进水管连接圆柱形罐体的内腔；圆柱形罐体的内腔还通过反应器出水管连接废液桶；反应器进水管和反应器出水管均夹持于不同的蠕动泵中；液位传感器设置于圆柱形罐体内腔中，且高于反应器出水管末端高度；圆柱形罐体外壁上套有中空的控温夹套，控温夹套上设有控温夹套进水口和控温夹套出水口，控温夹套出水口、恒温水浴锅和控温夹套进水口通过管路连接形成循环回路。本发明填补了海洋comammox富集装置与方法上的空白，可用于选择性富集comammox。
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公开(公告)号：CN105784420B
公开(公告)日：2018-05-25
申请号：CN201610230507.5
申请日：2016-04-13
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明公开了一种浅水沉积物和水样采集装置及其使用方法。该装置包括采样管、带孔采样管盖、活塞推杆、上闷头、下闷头、止回阀、延长杆、沉积物采集头、水样采集头和沉积物切片头；采集水体时，采样管上端依次连接带孔采样管盖、止回阀、延长杆，采样管下端连接水样采集头；采集沉积物时，采样管上端依次连接带孔采样管盖、止回阀、延长杆，采样管下端连接沉积物采集头；保存沉积物时，采样管上端连接上闷头，采样管下端连接下闷头；切割沉积物时，采样管上端插入活塞推杆，采样管下端连接沉积物切片头。本发明集沉积物与水样采集于一身，能保存样品的原位分层特征，并且结构简单、造价低廉、携带容易、使用方便、功能多样，具有广泛的实用价值。
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公开(公告)号：CN104593304A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201510029597.7
申请日：2015-01-21
申请人： 浙江大学
IPC分类号： C12N1/20
CPC分类号： C12N1/20
摘要： 本发明提供了一种海洋氨氧化古菌快速富集培养的方法，包括以下几个步骤：A：富集培养接种物来源的选择和前处理；B：海洋氨氧化古菌培养条件的确定，包括培养温度、氨氮浓度、pH、溶解氧浓度的确定；C：海洋氨氧化古菌富集培养基的配制，培养基中添加抗生素和微生物三羧酸循环的中间代谢产物。D：海洋氨氧化古菌的富集培养；E：海洋氨氧化古菌富集过程中的分子生物学检测。海洋氨氧化古菌的富集将为氨氧化古菌生理特性的研究奠定基础，同时，由于氨氧化古菌具有较宽的环境条件耐受范围，若将其引入废水生物脱氮中，可以带来巨大的经济和环境效益。
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公开(公告)号：CN104403940A
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201410668280.3
申请日：2014-11-21
申请人： 浙江大学
CPC分类号： C12M23/38 , C12M27/02 , C12M41/12 , C12M41/22 , C12M41/26 , C12M41/32 , C12M41/34 , C12M41/40 , C12M41/44
摘要： 本发明公开了一种海洋亚硝酸盐型甲烷厌氧氧化微生物培养装置及方法。它包括反应器系统和控制器系统，其中反应器系统包括反应罐和低温水槽；反应罐上部为反应罐盖板，反应罐盖板中间设有搅拌轴，搅拌轴上端连接搅拌电机，下端连接搅拌桨，反应罐盖板上还设有液体取样管、气体取样口、进气管、出气管、温度探头、DO探头、pH探头、电导率探头和气压探头；低温水槽主要由压缩机、冷凝管和循环泵组成，并在侧壁上设有温度探头和液位探头。本发明可为海洋亚硝酸盐型甲烷厌氧氧化微生物提供生长所必需的厌氧、低温、高压和高盐度的环境，并通过各类探头和控制系统维持装置的稳定、高效运行，从而实现海洋亚硝酸盐型甲烷厌氧氧化微生物的快速培养。
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公开(公告)号：CN102389707B
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201110338268.2
申请日：2011-11-01
申请人： 浙江大学
CPC分类号： Y02A50/2358
摘要： 本发明公开了一种基于自动化控制的桨降式持气内循环反硝化型甲烷厌氧氧化反应器。它包括反应器主体、生物量截留器、自动化控制系统、控温系统、甲烷报警器和支架等；反应器主体具有反应器盖板、反应容器、导流筒、微孔曝气器和温控夹层，其中导流筒将反应器分为上升区、下降及持气区两部分，上升区设有出水口、生物量回流口和取泥口，反应器出水口与生物量截留器进水口相连，生物量回流口与生物量截留器排泥口相连，下降及持气区顶部设有螺旋桨，底部设有微孔曝气器；温控夹层紧贴于反应器外壁，通过控温系统控制反应器温度。本发明利用甲烷气泡浮力和下降流曳力的两力平衡，延长甲烷气泡在反应器内的持留时间，从而实现甲烷气体的高效利用。
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公开(公告)号：CN101735947B
公开(公告)日：2013-02-06
申请号：CN200910155264.3
申请日：2009-12-10
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明公开了一种模拟自然环境的土壤厌氧氨氧化菌富集系统。它包括进水箱、蠕动泵、时控器、反应器主体、喷头、土柱、带孔圆盘、支架、排水管、沉淀区、排泥管、填料层、取泥口、圆盘圆孔、喷头圆孔，反应器主体下部设有支架，反应器主体从上到下依次设有喷头、土柱、带孔圆盘、填料层、沉淀区，反应器主体底部设有排水管、排泥管，在反应器主体放土柱的侧壁上设多个取泥口，喷头上端与蠕动泵、进水箱依次连接，蠕动泵与时控器连接。本发明的优点：1)取相应深度土层于土柱中，建立模拟自然环境的土柱，有利于土壤中厌氧氨氧化菌的富集；2)时控组件实现了反应器间歇进水；3)此富集系统完全模拟原生态，可富集土壤生态系统中的厌氧氨氧化菌。
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