公开(公告)号：CN102517276B

公开(公告)日：2013-07-31

申请号：CN201110417666.3

申请日：2011-12-14

申请人： 浙江大学

发明人： 费辉 ,  徐刚 ,  吴坚平 ,  杨立荣

IPC分类号： C12N11/14

摘要： 本发明公开了一种高底物耐受性的磁性纳米载体固定化醛缩酶的制备方法，包括如下步骤：1) 以二价和三价铁盐的混合物共沉淀制备超顺磁性Fe3O4纳米粒子，以硅烷偶联剂进行修饰，并在修饰后的微粒外表以戊二醛活化，从而得到表面活化的磁性纳米粒子；2)将纯化脱盐后的醛缩酶缓冲液和磁性载体在低温下搅拌、洗涤、冷冻干燥后得到磁性纳米载体固定化醛缩酶；3)采用该磁性纳米载体固定化醛缩酶为催化剂催化2-脱氧-D-核糖-5-磷酸，得到3-磷酸甘油醛和乙醛．本发明所涉及的固定化醛缩酶在催化2-脱氧-D-核糖-5-磷酸反应中，底物乙醛耐受性显著提高，酶的回收利用操作极大简化。

公开(公告)号：CN102517276A

公开(公告)日：2012-06-27

申请号：CN201110417666.3

申请日：2011-12-14

申请人： 浙江大学

发明人： 费辉 ,  徐刚 ,  吴坚平 ,  杨立荣

IPC分类号： C12N11/14

摘要： 本发明公开了一种高底物耐受性的磁性纳米载体固定化醛缩酶的制备方法，包括如下步骤：1) 以二价和三价铁盐的混合物共沉淀制备超顺磁性Fe3O4纳米粒子，以硅烷偶联剂进行修饰，并在修饰后的微粒外表以戊二醛活化，从而得到表面活化的磁性纳米粒子；2)将纯化脱盐后的醛缩酶缓冲液和磁性载体在低温下搅拌、洗涤、冷冻干燥后得到磁性纳米载体固定化醛缩酶；3)采用该磁性纳米载体固定化醛缩酶为催化剂催化2-脱氧-D-核糖-5-磷酸，得到3-磷酸甘油醛和乙醛．本发明所涉及的固定化醛缩酶在催化2-脱氧-D-核糖-5-磷酸反应中，底物乙醛耐受性显著提高，酶的回收利用操作极大简化。