公开(公告)号：CN117706097A

公开(公告)日：2024-03-15

申请号：CN202311546791.3

申请日：2023-11-20

Applicant: 浙江大学绍兴研究院

Inventor： 陈宇霖 ,  劳立峰 ,  徐丽华 ,  林世贤

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/543 ,  G01N33/533

Abstract: 本发明公开了一种定量检测非天然氨基酸插入效率的方法，包括以下步骤：S1、构建质粒、制备待检测蛋白；S2、制备链霉亲和素预包被酶标板；S3、标记待检测蛋白；S4、酶标仪定量检测；本发明方法能够在细胞裂解液、免疫沉淀产物、纯化蛋白或其他包含待检测蛋白的复杂样品中，对待检测蛋白中非天然氨基酸的插入效率进行定量检测；能够快速简便并准确定量蛋白质中非天然氨基酸的插入效率，尤其是能够应用于复杂样品的方法，有助于快速判断非天然氨基酸的插入效率。

公开(公告)号：CN117292741A

公开(公告)日：2023-12-26

申请号：CN202310095754.9

申请日：2023-01-18

Applicant: 浙江大学绍兴研究院

Inventor： 林世贤 ,  丁文龙 ,  刘超 ,  陈宇霖

IPC: G16B5/00 ,  G16B20/50 ,  G16B15/30 ,  G16B40/00

Abstract: 本发明公开了一种利用计算辅助设计开发结合细胞膜和/或血清白蛋白脂质化类似物的方法和应用，将一类包含芳香环和线性脂肪族侧链的双功能基团的分子引入到生物大分子上，可以赋予生物大分子膜结合和血清白蛋白结合的能力，利用这一双功能的脂质分子延长了生物大分子药物的半衰期，增强其药物效力，本发明以位点特异性的获得功能突变的方式研究蛋白质脂质修饰的功能，同时利用位点特异性的脂质化修饰提高生物大分子的细胞递送效率。

公开(公告)号：CN119842625A

公开(公告)日：2025-04-18

申请号：CN202411866716.X

申请日：2024-12-18

Applicant: 浙江大学 ,  浙江大学绍兴研究院

Inventor： 甘君琦 ,  唐玲 ,  丁文龙 ,  朱利平 ,  林世贤

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/52

Abstract: 本申请涉及一种稳定表达正交氨酰tRNA合成酶/tRNA对的细胞系，构建了一种能够稳定表达EcTyr正交氨酰tRNA合成酶/BsTyr tRNA对的HEK293T细胞系并公开了该细胞系的构建方法，构建方法借助PiggyBac转座子系统和质粒稳定转染将正交的EcTyr氨酰tRNA合成酶和BsTyr tRNA基因稳定整合到HEK293T细胞基因组，所构建的细胞系基因组由于整合了EcTyr正交氨酰tRNA合成酶和BsTyr tRNA基因，为在蛋白质的任意位点高效地引入非天然氨基酸提供了一个稳定的平台。本申请具有进一步为新型蛋白质结构和功能的探索以及含有某类特定功能的蛋白质药物的研发奠定实验基础的效果。

公开(公告)号：CN117890337A

公开(公告)日：2024-04-16

申请号：CN202311715943.8

申请日：2023-12-14

Applicant: 浙江大学绍兴研究院

Inventor： 丁文龙 ,  熊永照 ,  林世贤

IPC: G01N21/64 ,  C12N9/00 ,  C12N15/52 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于化学生物学领域，一种遗传编码1‑甲基‑色氨酸的方法，通过分子对接将1‑甲基‑色氨酸对接至苯丙氨酰‑tRNA合成酶的活性中心，分析苯丙氨酰‑tRNA合成酶与1‑甲基‑色氨酸产生相互作用的活性位点，包括Q356、E391、V393、T467以及A507，以相互作用活性位点为依据构建嵌合苯丙氨酰‑tRNA合成酶的突变文库，利用正负筛选体系筛选识别1‑甲基‑色氨酸的特定突变体。本发明通过合成具有特定结构和性质的1‑甲基‑色氨酸，可以将其插入到目标蛋白中的特定位置，从而实现对蛋白质的精确调控。这项技术不仅可以改变蛋白质的稳定性、活性和结构，还可以引入新的功能基团，拓展蛋白质的应用领域。

公开(公告)号：CN117491640A

公开(公告)日：2024-02-02

申请号：CN202311210254.1

申请日：2023-09-19

Applicant: 浙江大学绍兴研究院

Inventor： 陈宇霖 ,  林世贤 ,  万芮希

IPC: G01N33/68 ,  G01N27/447

Abstract: 一种定量检测蛋白质O‑GlcNAc修饰的方法，属于蛋白质检测技术领域。该方法包括酶介导掺入包含化学手柄的修饰糖分及含反应基团与质量标签的标记分子的环加成反应。本发明对样品要求低，操作简单，并且能够检测蛋白质O‑GlcNAc的修饰数量与修饰比例，可以应用于各种内源或外源蛋白质的O‑GlcNAc修饰的检测。

公开(公告)号：CN116990270A

公开(公告)日：2023-11-03

申请号：CN202310757048.6

申请日：2023-06-26

Applicant: 浙江大学绍兴研究院

Inventor： 林世贤 ,  赵红霞 ,  唐玲 ,  方誉

IPC: G01N21/64 ,  G01N30/72 ,  G01N27/62

Abstract: 本发明公开了一种利用遗传密码扩展技术在活细胞内提高π效应的方法及应用，以组蛋白甲基化修饰的解码蛋白为例，在活细胞内利用遗传密码扩展技术将解码蛋白构成芳香笼的芳香族氨基酸替换为强给电子侧链基团取代的芳香族氨基酸类似物，增强解码蛋白与组蛋白甲基化修饰的π效应，从而提高活细胞内解码蛋白与组蛋白甲基化修饰的亲和力，构建活细胞内高效识别组蛋白甲基化修饰的工具，并将其应用于活细胞成像，微环境捕获和靶向调控等领域。