公开(公告)号：CN104774860B

公开(公告)日：2018-07-17

申请号：CN201410017168.3

申请日：2014-01-14

申请人： 深圳华大生命科学研究院 ,  深圳华大三生园科技有限公司

发明人： 李勇 ,  田凯 ,  张欢欢 ,  刘楚新 ,  李飞达 ,  苗泽圃 ,  刘欢 ,  张耕耘

IPC分类号： C12N15/63 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10

摘要： 提供了适于转化细胞的构建体、系统及其应用，其中一种适于转化细胞的构建体包含编码CaS9的核酸序列，且不包含筛选标记基因。将该适于转化细胞的构建体与本发明的包含附着子序列、tracrRNA序列和crRNA序列，其中tracrRNA序列与crRNA序列可操作地连接构成gRNAs表达框的另一种适于转化细胞的构建体配合使用，即利用这两种构建体共转染细胞，能够有效实现对哺乳动物细胞的多种基因的剪切修饰，并获得无标记细胞株，且切割效率高、安全高效、重复性好。