公开(公告)号：CN114264712A

公开(公告)日：2022-04-01

申请号：CN202111602670.7

申请日：2021-12-24

Applicant: 清华大学

Inventor： 符汪洋 ,  王乾龙 ,  经求是 ,  秦怡 ,  张晓艳

IPC: G01N27/414 ,  C12Q1/6876 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/6825

Abstract: 本发明公开了一种基于石墨烯场效应晶体管(GFET)的miRNA检测方法及其应用,本发明将GFET表面利用共价键修饰上的DNA探针，可特异性识别待测miRNA，随后在DSN酶的作用下，将DNA探针水解并释放出miRNA，释放出的miRNA可参与到下一个循环，依次持续水解GFET表面上DNA，进而引起GFET电信号的变化，该信号强度的变化与miRNA的浓度相关。该发明首次将DSN与GFET结合，并充分利用了DSN在miRNA检测中的高特异性和信号放大功能，以及GFET在生物检测中的超敏和快速特点，可实现生物样品中miRNA的高特异性，快速、超敏的检测。

公开(公告)号：CN114150089B

公开(公告)日：2023-10-31

申请号：CN202111543506.3

申请日：2021-12-16

Applicant: 清华大学

Inventor： 符汪洋 ,  秦怡 ,  经求是 ,  王乾龙 ,  张晓艳

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6837

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13a/Cas12a反式切割和石墨烯场效应晶体管的核酸检测方法，将Cas13a/Cas12a固定在石墨烯表面后或者在溶液中与靶向不同病毒核酸的crRNA结合，构建Cas13a/Cas12a‑crRNA复合物，用于快速切割修饰在gFET上的ssRNA/ssDNA，进而引发转移特性曲线的变化，实现对多种病毒核酸的响应。

公开(公告)号：CN114280128B

公开(公告)日：2022-11-18

申请号：CN202111600880.2

申请日：2021-12-24

Applicant: 清华大学

Inventor： 符汪洋 ,  王乾龙 ,  经求是 ,  秦怡 ,  张晓艳

IPC: C12Q1/6825

Abstract: 本申请提供了一种双标记石墨烯场效应晶体管的制备方法及其在miRNA检测中的应用。本申请的双标记石墨烯场效应晶体管中对GFET的表面进行双链特异性核酸酶(DSN)和DNA探针的双标记修饰，将DSN酶固定在GFET表面，使DSN周围铺有DNA探针，同时每个DNA探针都在DSN的空间水解范围内。利用双标记的GFET快速测定miRNA的浓度时，向GFET的反应池中加入待测miRNA，其与DSN附近的DNA结合形成异源互补双链后，DSN可迅速水解DNA探针并释放miRNA，释放的miRNA可再次与其它DNA探针结合并引起DNA探针不断水解，进而引起电信号的变化。

公开(公告)号：CN114264712B

公开(公告)日：2023-04-25

申请号：CN202111602670.7

申请日：2021-12-24

Applicant: 清华大学

Inventor： 符汪洋 ,  王乾龙 ,  经求是 ,  秦怡 ,  张晓艳

IPC: G01N27/414 ,  C12Q1/6876 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/6825

Abstract: 本发明公开了一种基于石墨烯场效应晶体管(GFET)的miRNA检测方法及其应用,本发明将GFET表面利用共价键修饰上的DNA探针，可特异性识别待测miRNA，随后在DSN酶的作用下，将DNA探针水解并释放出miRNA，释放出的miRNA可参与到下一个循环，依次持续水解GFET表面上DNA，进而引起GFET电信号的变化，该信号强度的变化与miRNA的浓度相关。该发明首次将DSN与GFET结合，并充分利用了DSN在miRNA检测中的高特异性和信号放大功能，以及GFET在生物检测中的超敏和快速特点，可实现生物样品中miRNA的高特异性，快速、超敏的检测。

公开(公告)号：CN114280128A

公开(公告)日：2022-04-05

申请号：CN202111600880.2

申请日：2021-12-24

Applicant: 清华大学

Inventor： 符汪洋 ,  王乾龙 ,  经求是 ,  秦怡 ,  张晓艳

IPC: G01N27/414 ,  C12Q1/6825

Abstract: 本申请提供了一种双标记石墨烯场效应晶体管的制备方法及其在miRNA检测中的应用。本申请的双标记石墨烯场效应晶体管中对GFET的表面进行双链特异性核酸酶(DSN)和DNA探针的双标记修饰，将DSN酶固定在GFET表面，使DSN周围铺有DNA探针，同时每个DNA探针都在DSN的空间水解范围内。利用双标记的GFET快速测定miRNA的浓度时，向GFET的反应池中加入待测miRNA，其与DSN附近的DNA结合形成异源互补双链后，DSN可迅速水解DNA探针并释放miRNA，释放的miRNA可再次与其它DNA探针结合并引起DNA探针不断水解，进而引起电信号的变化。

公开(公告)号：CN114150089A

公开(公告)日：2022-03-08

申请号：CN202111543506.3

申请日：2021-12-16

Applicant: 清华大学

Inventor： 符汪洋 ,  秦怡 ,  经求是 ,  王乾龙 ,  张晓艳

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6837

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13a/Cas12a反式切割和石墨烯场效应晶体管的核酸检测方法，将Cas13a/Cas12a固定在石墨烯表面后或者在溶液中与靶向不同病毒核酸的crRNA结合，构建Cas13a/Cas12a‑crRNA复合物，用于快速切割修饰在gFET上的ssRNA/ssDNA，进而引发转移特性曲线的变化，实现对多种病毒核酸的响应。