公开(公告)号：CN104540941A

公开(公告)日：2015-04-22

申请号：CN201380035027.8

申请日：2013-05-02

申请人： 生物梅里埃公司 ,  原子能与替代能源委员会

发明人： 玛丽-海琳·查尔斯 ,  J-P·沙里耶 ,  玛丽亚姆-劳瑞·库比左勒斯 ,  阿涅斯·杜邦-菲力阿德 ,  韦罗妮克·拉内 ,  弗洛伦斯·里韦拉 ,  劳伦特·韦龙

IPC分类号： C12N13/00 ,  C07K1/12 ,  C12Q1/34 ,  G01N33/68

摘要： 本发明涉及用于从原核细胞和/或真核细胞获得肽的方法。

公开(公告)号：CN104540941A8

公开(公告)日：2021-12-17

申请号：CN201380035027.8

申请日：2013-05-02

申请人： 生物梅里埃公司 ,  原子能与替代能源委员会

发明人： 玛丽-海琳·查尔斯 ,  J-P·沙里耶 ,  玛丽亚姆-劳瑞·库比左勒斯 ,  阿涅斯·杜邦-菲力阿德 ,  韦罗妮克·拉内 ,  弗洛伦斯·里韦拉 ,  劳伦特·韦龙

IPC分类号： C12N13/00 ,  C07K1/12 ,  C12Q1/34 ,  G01N33/68

摘要： 本发明涉及用于从原核细胞和/或真核细胞获得肽的方法。

公开(公告)号：CN114032268A

公开(公告)日：2022-02-11

申请号：CN202111192940.1

申请日：2013-05-02

申请人： 生物梅里埃公司

发明人： 玛丽-海琳·查尔斯 ,  J-P·沙里耶 ,  玛丽亚姆-劳瑞·库比左勒斯 ,  阿涅斯·杜邦-菲力阿德 ,  韦罗妮克·拉内 ,  弗洛伦斯·里韦拉 ,  劳伦特·韦龙

IPC分类号： C12P21/06 ,  C07K1/107 ,  C12N13/00 ,  C12N1/06 ,  G01N33/68 ,  G01N30/72

摘要： 本发明涉及用于从原核细胞和/或真核细胞获得肽的方法。所述方法包括以下步骤：a)裂解原核细胞和/或真核细胞并且回收由此获得的蛋白质，b)使用至少一种变性剂使蛋白质变性，c)使用至少一种烷基化剂使变性的蛋白质烷基化，d)使用至少一种蛋白水解酶将在步骤c结束时获得的蛋白质酶促蛋白水解，e)回收在酶促蛋白水解步骤d结束时获得的肽，其中步骤a中所述原核细胞和/或真核细胞的裂解是在低浓度离液剂下的裂解，其中步骤a‑d同时进行，其中在低浓度离液剂下的裂解是通过借助于超声波探头进行的声处理的裂解，其中变性剂是选自三(2‑羧乙基)膦和二硫苏糖醇的硫醇还原剂，且烷基化剂是碘乙酰胺；所述方法在大气压力下进行。